Étude d’un mécanisme d’induction de la sénescence par les défauts de la machinerie d’épissage

La sénescence est un état cellulaire de réponse au stress jouant le rôle de barrière physiologique au développement et à la progression du cancer. La sénescence est principalement définie par une morphologie cellulaire élargie, un arrêt permanent de la prolifération, une accumulation de la β-galactosidase lysosomale, ainsi que la sécrétion de facteurs inflammatoires. En plus de ces caractéristiques distinctives, la sénescence présente des changements au niveau de l’épissage alternatif. L’épissage est un mécanisme servant au clivage des introns et à la liaison des exons proximaux, participant à la maturation de l’ARN prémessager. Ce processus moléculaire est orchestré par le spliceosome, lui-même composé de 5 complexes ribonucléoprotéiques incluant plusieurs centaines de protéines. Chez les métazoaires, l’épissage est modulé par des protéines régulatrices de l’épissage qui contribuent à l’inhibition ou la facilitation de la catalyse d’un site d’épissage. Cet épissage alternatif peut mener à l’inclusion d’introns, l’exclusion d’exons, ainsi qu’à la sélection de sites dits 3’ ou 5’ alternatifs, permettant ainsi la production d’une grande variété d’ARN messagers à partir d’un seul ARN prémessager matrice. Afin de comprendre davantage la fonctionnalité des variations de l’épissage alternatif dans le contexte de la sénescence cellulaire, le transcriptome de cellules non sénescentes et sénescentes a été séquencé. Cette analyse a révélé que lors de la sénescence, les gènes codant pour des protéines du spliceosome sont généralement à la baisse et les introns sont davantage retenus, suggérant une inhibition de l’épissage. Par l’utilisation de drogues inhibitrices de l’épissage ainsi que par la répression de membre constitutif du spliceosome, nous avons démontré que le bouleversement de l’épissage induit la sénescence. Afin d’explorer le potentiel mécanisme d’action, les transcrits dont l’épissage alternatif était le plus altéré lors de la sénescence ont été monitorés lors de traitements aux drogues inhibitrices de l’épissage. L’épissage alternatif de l’exon 6 de MDM4, générant le variant MDM4-S, s’est avéré être le plus réactif aux traitements. Finalement, une répression des variants de MDM4 ainsi qu’un sauvetage de la forme courte MDM4-S, ont démontré l'importance de l’épissage de MDM4 dans l’induction de la sénescence ainsi que dans l’amélioration de la survie cellulaire. Cette thèse présente donc des avancements importants dans notre compréhension des mécanismes d’induction de la sénescence et place l’épissage alternatif de MDM4 comme un détecteur de défauts du spliceosome fonctionnel contribuant à plusieurs phénotypes de la sénescence.

Name thesis:degree_name

Ph. D.

Level thesis:degree_level

Doctorat

Discipline thesis:degree_discipline

Microbiologie

Grantor dc:publisher

Université de Sherbrooke

Year dc:date.issued

2024

Author dc:creator

• Deschênes, Mathieu

Advisor dc:contributor.advisor

• Chabot, Benoît

• Sénescence
• Épissage alternatif
• MDM4
• Spliceosome
• ARN
• ADN
• Vieillissement
• Cancer
• Senescence
• Alternative splicing
• RNA
• DNA
• Aging

Licence dc:rights.uri

• http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ca/

Language dc:language.iso

fr

Handle dc:identifier.uri

http://hdl.handle.net/11143/21682

OAI identifier oai:identifier

oai:usherbrooke.scholaris.ca:11143/21682