Untersuchung einer Calcineurin-bindungsdefizienten FKBP12.6-Mutante in Kardiomyozyten

Der Ryanodin-Rezeptor (RyR) als größter bekannter Ionenkanal der Herzmuskelzelle gilt als Multiproteinkomplex. Durch die Interaktion mit Proteinen wie z.B. Kinasen und Phosphatasen wird er in seiner Aktivität gesteuert. Durch die Bindung von FKBP12.6 an den RyR2, die Isoform der Herzmuskelzelle, wird die Offenwahrscheinlichkeit des Kanals und damit der Calciumverlust in der Diastole herabgesetzt. Die durch FKBP12.6 koordiniertere Öffnung benachbarter RyR (coupled gating) bedingt zudem eine verbesserte relative Zellverkürzung der Zelle. Da die genaue Anzahl bzw. Funktion aller Bindungspartner am RyR derzeit noch nicht abschließend geklärt ist, liegt die Vermutung nahe, dass die Wirkung von FKBP durch andere Bindungspartner beeinflusst wird. Es ist bekannt, dass FKBP12.6 die Proteinphosphatase Calcineurin bindet und FK506-abhängig inhibiert. In dieser Arbeit wurde erstmals eine Calcineurin-bindungsdefiziente Mutante (FKBP12.6G89PV90K )erzeugt, um die funktionelle Bedeutung der FKBP12.6-Calcineurin-Interaktion zu untersuchen. Es konnte nachgewiesen werden, dass FKBP12.6G89PV90K Calcineurin bei erhaltener endogener Rotamaseaktivität weder binden noch inhibieren kann. Durch adenoviral vermittelte Überexpression in isolierten Kardiomyozyten adulter Kaninchen wurde die Auswirkung auf die Kontraktilität der Zellen untersucht. Bei nur gering ausgeprägter Expression der Mutante (MOI 10) fand sich kein Unterschied zu kontrolltransfizierten Myozyten, bei einer MOI 50 hingegen eine negative Inotropie der mit FKBP12.6G89PV90K-transfizierten Zellen. Im Vergleich zu FKBP12.6-überexprimierenden Zellen, die eine positive Inotropie zeigen, liegt so die Vermutung nahe, dass die bekannten Effekte von FKBP12.6 am RyR zum Teil durch Calcineurin vermittelt werden.

Author dc:creator

• Kania, Astrid

Contributors dc:contributor

• Hasenfuß, Gerd Prof. Dr.
• Wienands, Jürgen Prof. Dr.
• Crozier, Thomas Prof. Dr. Dr.

• 610 Medizin, Gesundheit
• Medicine
• FKBP12.6
• RyR2
• Calcineurin
• 44.61
• MED 411: Kardiologie

Licence

• https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/

Language dc:language

ger

Identifier

https://dx.doi.org/10.53846/goediss-826
urn:nbn:de:gbv:7-webdoc-2558-4
webdoc-2558
634462814

OAI identifier oai:identifier

oai:ediss.uni-goettingen.de:11858/00-1735-0000-0006-AFB3-E