Einfluss von Mistelextrakt, Selen, Kavir-Protein und Ascorbinsäure auf die Genexpression angiogener Wachstumsfaktoren und das Sprossverhalten humaner Granulosazellen

Nach der Ovulation kommt es im Rahmen der Entstehung des Corpus luteum zu einer starken angiogenen Aktivität im Ovar. In der vorliegenden Arbeit wurden die an diesem Prozess wesentlich beteiligten humanen Granulosazellen (GC) auf die Beeinflussung der Expression angiogener Wachstumsfaktoren in der TaqMan-PCR und des Sprossverhalten am Modell eines spheroidalen Spoutingassays durch Mistelextrakt, Selen, das Kavir-Protein und Ascorbinsäure in vitro untersucht. Zusätzlich wurde die Expression dieser Faktoren in GC mit der Zelllinie der humanen Granulosaluteinzellen HGL5 verglichen. <br>Es konnte auf mRNA-Ebene gezeigt werden, dass GC Angiopoeitin 1, 2 und deren Rezeptor Tie2, den Vascular Endothelian Growth Factor VEGF A sowie dessen Rezeptor KDR exprimieren. Dies eröffnet die Möglichkeit eines autokrinen Loops bei GC. <br>(1) Die Stimulation mit Mistelextrakt führte bei den GC zu einer signifikanten Verminderung der VEGF A-Expression. Trotzdem beeinflusste es das Sproutverhalten der GC selbst nicht. Dies kann über eine parakrine Wirkung auf Endothelzellen die von anderen Autoren beschriebene hemmende Wirkung von Mistelextrakten auf die Gefäßentwicklung erklären. <br>(2) Selen supprimierte signifikant die Expression von ANGPT2 (in GC und HGL5). Auch die kumulative Sproutlänge war nach Inkubation mit Selen signifikant erniedrigt. Im Gegensatz zu Daten aus Tumorzellen wurde die Expression von VEGF nicht verändert. Diese Daten deuten auf eine wichtige Rolle von Selen an der Regulation physiologischer angiogener Prozesse hin. Im Rahmen von Interaktionen zwischen GC und Endothelzellen kann die Angiogenese im Ovar sowohl über eine verminderte Sekretion als auch über eingeschränktes Sprouting gehemmt werden. <br>(3) Für das Kavir-Protein konnte in GC weder eine Veränderung der Expression der untersuchten Faktoren noch des Sproutverhaltens festgestellt werden. <br>(4) Die Inkubation mit Ascorbinsäure veränderte konzentrationsabhängig die Genexpression in GC. Nach Stimulation mit 50 µg/ml sank die Expression an VEGF A signifikant, gleichzeitig stieg die Anzahl der Sprouts signifikant an. Da dieser Effekt nicht auf die Wirkung von VEGF zurückzuführen ist, ist die Rolle der Kollagensynthese zu diskutieren. Die zellschädigende Konzentration von 5 mg/ml führte zu einer verstärkten VEGF-Expression, VEGF A kann deshalb bei GC, wie dies auch bei EC diskutiert wird, als Survival-Factor gedeutet werden. <br>Im Vergleich der HGL5 mit GC ließen sich deutliche Unterschiede feststellen, dies zeigt, dass HGL5 keinen Ersatz für GC darstellen.

Author dc:creator

• Hovemann, Inken

Contributors dc:contributor

• Gitsch, Gerald

• Angiopoietine
• Sprossverhalten
• Corpus luteum
• angiogenesis
• sprouting
• human granulosa cells
• Vascular endothelial Growth Factor

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