Expansion und retroviraler Gentransfer eines Suizidgens (HSV-TK) in humanen T-Lymphozyten zur adoptiven Immuntherapie

Ziel dieser Arbeit war, ein retrovirales Vektorsystem, welches von Re et al und Hoffmann et al. entwickelt wurde, auf die klinische Anwendbarkeit hin zu untersuchen. Die Vektorkonstruktion enthält ein Fusionsgen, welches als Suizidgen für die Herpes-simpex-Virus-Thymidinkinase (HSV-TK) kodiert und ein Resistenzgen gegen das zytotoxische Antibiotikum Neomycin trägt. Es konnte gezeigt werden, dass mit X-Vivo 15 Kulturmedium unter Zugabe von 5% humanem AB-Serum eine etwa 60-fache Expansion der Ausgangszellmenge möglich ist. Die Transduktionsversuche auf Retronektin-beschichteter Zellkulturplastik führte zu einer Verdoppelung der Ausgangszellzahlen unter Selektionsbedingungen. Funktionelle Untersuchungen zeigten, dass es bei den transduzierten Zellen bereits bei Konzentrationen von 1µg/ml (ca. 10% der in-vivo erreichbaren Gewebespiegeln) Ganciclovir zu einem Absterben aller Zellen nach 4 Tagen kam, während untransduzierte Zellen nicht in ihrem Proliferationsverhalten beeinflusst wurden. Nach Transduktion bleibt die T-lymphozytäre Funktion erhalten und eine spezifische Antigen-Antwort ist möglich.

Author dc:creator

• Schmah, Oliver

Contributors dc:contributor

• Finke, Jürgen

• retroviral
• Suizidgen
• genetransfer
• lymphocyte
• suicidegene
• immunotherapy

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