Stammdesign in B. licheniformis

Bacillus licheniformis ist ein Organismus von großem wissenschaftlichem und industriellem Interesse. Aufgrund seiner niedrigen natürlichen Kompetenzraten weist B. licheniformis DSM13 eine schlechte genetische Zugänglichkeit auf. Deswegen müssen bei diesem Organismus andere Transformationstechniken angewendet werden. Insbesondere Konjugation stellte hierfür eine gute Alternative dar. Das pKVM-System konnte ausgehend von E. coli auf verschiedene Bacillus-Spezies übertragen werden. Mit Hilfe dieses Vektorsystems konnten Mutationen in B. licheniformis erzeugt werden. B. licheniformis H1, ein naher Verwandter von B. licheniformis DSM13, besitzt effektive Restriktions-Modifikations-Systeme. Hierfür wurde ein in-vivo-Methylierungssystem etabliert, um das stammspezifische Methylierungsmuster zu erzeugen. Dieses System wurde genutzt, um einen Deletionsvektor für die Erzeugung einer markerfreien Deletion in B. licheniformis H1 zu übertragen. Der PBSX-orthologe Phage, ein induzierbarer Phage in B. licheniformis MW3, wurde durch homologe Rekombination deletiert. Die Mutante zeigte eine erniedrigte Sensitivität gegenüber Mitomycin C, das für die Induktion von lysogenen Phagen eingesetzt wird. Darüber hinaus konnten auch keine Phagenpartikel mehr identifiziert werden. Für ein Wachstum auf Harnstoff wurde der Urease-Gen-Cluster aus B. licheniformis 9945A auf den Urease-negativen Stamm B. licheniformis MW3 übertragen. Neben einer Instabilität der Insertion lieferte diese auch keinen Phänotyp. Das Genom von B. licheniformis 9945A, einem natürlich kompetenten Stamm, wurde sequenziert und analysiert. Im Vergleich zu B. licheniformis DSM13 besitzt dieser Stamm einen reduzierten Satz an potentiellen Prophagen. Drei NRPS-Gencluster mit Ähnlichkeiten zu Genen aus der Fengycin, Bacitracin und Lichenysin-Biosynthese konnten identifiziert werden.

Author dc:creator

• Rachinger, Michael

Contributors dc:contributor

• Daniel, Rolf PD Dr.
• Gottschalk, Gerhard Prof. Dr. em.

• 570 Biowissenschaften, Biologie
• Biologie
• Bacillus licheniformis
• Konjugation
• Methylierung
• Mutagenese
• conjugation
• methylation
• mutagenesis
• 42 Biologie
• 42.30 Mikrobiologie
• W Biologie
• WU Mikrobiologie
• WUV 000 Angewandte Mikrobiologie

Licence

• https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/

Language dc:language

ger

Identifier

https://dx.doi.org/10.53846/goediss-375
urn:nbn:de:gbv:7-webdoc-2561-0
webdoc-2561
675790603

OAI identifier oai:identifier

oai:ediss.uni-goettingen.de:11858/00-1735-0000-0006-ADB5-5