Mutationsanlyse bei Patienten mit Glykogenose Typ Ia

Die autosomal rezessiv vererbte Stoffwechselkrankheit Glykogenose Typ Ia beruht auf einer verminderten Aktivität der katalytischen Untereinheit des Glucose-6-Phosphatase-Enzymkomplexes, kodiert durch das Glucose-6-Phosphatase-Gen. Dieses Enzymsystem katalysiert sowohl den letzten Schritt der Glykogenolyse, als auch der Gluconeogenese und besitzt somit eine Schlüsselfunktion im Kohlenhydratstoffwechsel. <br> <br>G6Pase wird vor allem in Leber, Nieren und Dünndarmmucosa exprimiert. Ein Mangel des Enzyms führt zu rezidivierenden Hypoglykämien, Hyperlaktazidämie, Hyperurikämie, Hypertriglyceridämie und Hepatomegalie. <br> <br>Als Goldstandard zur Diagnosefindung der Glykogenose Typ Ia galt bislang der Nachweis einer erniedrigten Glucose-6Phosphatase-Aktivität in einem frischen Leberbiopsat. Durch die Isolation des Gens legten Lei et al. den Grundstein zur nichtinvasiven Untersuchung dieser Erkrankung. <br> <br>In der vorliegenden Arbeit wurden bei 16 Patienten Mutationen im Glucose-6-Phosphatase-Gen durch molekulargenetische Diagnostik identifiziert. <br> <br>Hierbei wurde DNA der Patienten aus Leukozyten einer EDTA-Blutprobe isoliert und die 5 Exons des G6Pase-Gens mittels PCR amplifiziert. Anschließend wurden die PCR-Amplifikate durch SSCP-Analyse auf eventuelle Mutationen untersucht. Proben, bei denen sich ein verändertes Bandenmuster fand, wurden einer Sequenzierung des betreffenden Exons zugeführt. Bei Patientenproben, die keinerlei Veränderung der SSCP-Analyse aller 5 Exons zeigten, wurden alle Exons des G6Pase-Gens sequenziert. <br> <br>Bei allen 16 Patienten konnte durch das Auffinden zweier Mutationen die Diagnose Glykogenose Typ Ia gestellt werden. <br> <br>Wir entdeckten bei 3 Patienten jeweils eine bislang noch nicht beschriebene Mutation (W70X, P113L, L265P) und konnten in 5 Fällen durch Genanalyse die Diagnose GSD Ia stellen, wo die Leberbiopsie bislang keine sichere Diagnosefindung brachte.

Author dc:creator

• Lang, Christine

Contributors dc:contributor

• Brandis, Matthias

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