Mutationsanlyse bei Patienten mit Glykogenose Typ Ia
type: CreativeWork
description: Die autosomal rezessiv vererbte Stoffwechselkrankheit Glykogenose Typ Ia beruht auf einer verminderten Aktivität der katalytischen Untereinheit des Glucose-6-Phosphatase-Enzymkomplexes, kodiert durch das Glucose-6-Phosphatase-Gen. Dieses Enzymsystem katalysiert sowohl den letzten Schritt der Glykogenolyse, als auch der Gluconeogenese und besitzt somit eine Schlüsselfunktion im Kohlenhydratstoffwechsel. G6Pase wird vor allem in Leber, Nieren und Dünndarmmucosa exprimiert. Ein Mangel des Enzyms führt zu rezidivierenden Hypoglykämien, Hyperlaktazidämie, Hyperurikämie, Hypertriglyceridämie und Hepatomegalie. Als Goldstandard zur Diagnosefindung der Glykogenose Typ Ia galt bislang der Nachweis einer erniedrigten Glucose-6Phosphatase-Aktivität in einem frischen Leberbiopsat. Durch die Isolation des Gens legten Lei et al. den Grundstein zur nichtinvasiven Untersuchung dieser Erkrankung. In der vorliegenden Arbeit wurden bei 16 Patienten Mutationen im Glucose-6-Phosphatase-Gen durch molekulargenetische Diagnostik identifiziert. Hierbei wurde DNA der Patienten aus Leukozyten einer EDTA-Blutprobe isoliert und die 5 Exons des G6Pase-Gens mittels PCR amplifiziert. Anschließend wurden die PCR-Amplifikate durch SSCP-Analyse auf eventuelle Mutationen untersucht. Proben, bei denen sich ein verändertes Bandenmuster fand, wurden einer Sequenzierung des betreffenden Exons zugeführt. Bei Patientenproben, die keinerlei Veränderung der SSCP-Analyse aller 5 Exons zeigten, wurden alle Exons des G6Pase-Gens sequenziert. Bei allen 16 Patienten konnte durch das Auffinden zweier Mutationen die Diagnose Glykogenose Typ Ia gestellt werden. Wir entdeckten bei 3 Patienten jeweils eine bislang noch nicht beschriebene Mutation (W70X, P113L, L265P) und konnten in 5 Fällen durch Genanalyse die Diagnose GSD Ia stellen, wo die Leberbiopsie bislang keine sichere Diagnosefindung brachte.
abstract: Die autosomal rezessiv vererbte Stoffwechselkrankheit Glykogenose Typ Ia beruht auf einer verminderten Aktivität der katalytischen Untereinheit des Glucose-6-Phosphatase-Enzymkomplexes, kodiert durch das Glucose-6-Phosphatase-Gen. Dieses Enzymsystem katalysiert sowohl den letzten Schritt der Glykogenolyse, als auch der Gluconeogenese und besitzt somit eine Schlüsselfunktion im Kohlenhydratstoffwechsel. G6Pase wird vor allem in Leber, Nieren und Dünndarmmucosa exprimiert. Ein Mangel des Enzyms führt zu rezidivierenden Hypoglykämien, Hyperlaktazidämie, Hyperurikämie, Hypertriglyceridämie und Hepatomegalie. Als Goldstandard zur Diagnosefindung der Glykogenose Typ Ia galt bislang der Nachweis einer erniedrigten Glucose-6Phosphatase-Aktivität in einem frischen Leberbiopsat. Durch die Isolation des Gens legten Lei et al. den Grundstein zur nichtinvasiven Untersuchung dieser Erkrankung. In der vorliegenden Arbeit wurden bei 16 Patienten Mutationen im Glucose-6-Phosphatase-Gen durch molekulargenetische Diagnostik identifiziert. Hierbei wurde DNA der Patienten aus Leukozyten einer EDTA-Blutprobe isoliert und die 5 Exons des G6Pase-Gens mittels PCR amplifiziert. Anschließend wurden die PCR-Amplifikate durch SSCP-Analyse auf eventuelle Mutationen untersucht. Proben, bei denen sich ein verändertes Bandenmuster fand, wurden einer Sequenzierung des betreffenden Exons zugeführt. Bei Patientenproben, die keinerlei Veränderung der SSCP-Analyse aller 5 Exons zeigten, wurden alle Exons des G6Pase-Gens sequenziert. Bei allen 16 Patienten konnte durch das Auffinden zweier Mutationen die Diagnose Glykogenose Typ Ia gestellt werden. Wir entdeckten bei 3 Patienten jeweils eine bislang noch nicht beschriebene Mutation (W70X, P113L, L265P) und konnten in 5 Fällen durch Genanalyse die Diagnose GSD Ia stellen, wo die Leberbiopsie bislang keine sichere Diagnosefindung brachte.
author: Lang, Christine
date modified: 2026-07-24T02:21:52Z
provider: University of Freiburg
publisher: Networked Digital Library of Theses and Dissertations
type: WebPage
source organization: University of Freiburg