Universität Tübingen
Genexpressionsmuster nach Behandlung von Hepatomzellen mit dem Cytokin TGF-beta bzw. mit Tumorpromotoren
Abstract
TGF-beta1 ist ein Cytokin, das in Hepatozyten neben Wachstumsarrest auch Apoptose auslösen kann. Ziel der hier vorliegenden Arbeit war es, zur Klärung der Frage beizutragen, welche Gene für die durch TGF-beta1 induzierte Apoptose verantwortlich sind. Hierfür wurden Mikroarrays des Typs AtlasTM Rat 1.2 der Firma Clontech eingesetzt, über welche die gleichzeitige Analyse von Expressionsänderungen in knapp 1200 Genen möglich ist. Die Untersuchungen wurden mit Hepatomzellen der Linie FTO-2B, die auf eine TGF-beta1-Behandlung mit einer starken Apoptoseantwort reagieren, durchgeführt. Nach Hybridisierung der Arrays mit cDNAs aus drei unabhängigen Versuchsreihen wurden die Genexpressionsmuster von Kontrollzellen und TGF-beta1-behandelten Zellen kreuzweise miteinander verglichen und die Gene mit den stabilsten Expressionsänderungen wurden den Validitätsklassen I-III wie folgt zugeordnet: I:Prothymosin-alpha, Galaninprecurser, PDGF-associated protein (HASPP28) II:Inhibitor of DNA binding 3/dominant negative helix-loop-helix protein, plasminogen activator inhibitor-1 III:Alcohol dehydrogenase 1/alcohol dehydrogenase A subunit, 40S ribosomal protein S17, ADP-ribosylation factor 5, 5-hydroxytryptamine (serotonin) receptor 1B Zumindest für Prothymosin-alpha und Galanin ist aufgrund von Literaturrecherchen eine direkte Beteiligung an der Apoptoseregulation wahrscheinlich, für PAI-1 erscheint eine indirekte Beteiligung möglich. In einer weiteren Versuchsserie wurde untersucht, ob die antiapoptotischen Verbindungen Dexamethason, Insulin und Phenobarbital ihre protektive Wirkung über die Induktion einheitlicher Genexpressionsmuster vermitteln. Hierfür wurden die jweiligen Expressionsmuster mit Hilfe von AtlasTM Rat Stress Arrays, die ca. 200 Gene umfassen, analysiert. Zwei der identifizierten Gene, FKBP12 (FK506 binding protein 12) und CRYAB (alphaB-crystallin), wurden durch alle drei Verbindungen induziert, wodurch sich gemeinsame Angriffspunkte sowohl auf der Ebene der TGF-beta1-Rezeptoraktivität (FKBP12) als auch bei der Aktivierung der Caspase-3 (CRYAB) ergeben könnten.
Author and committee
dc:creator, dc:contributor.*- Author
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- Herckelrath, Tanja
Identifiers
dc:identifier.*- Identifier
- hdl:10900/44533