Identifizierung und Analyse der an der pflanzlichen Zellwandbiosynthese beteiligten Gene in Arabidopsis thaliana

Das Transposon Assisted Signal Trapping (TAST) ist eine einfache Methode der Identifizierung apoplastischer Proteine aus regenerierten Protoplasten von Arabidopsis thaliana. Prototoplasten bilden während ihrer Regeneration eine neue Zellwand aus, wobei sie eine sehr aktive Zellwandsynthese aufweisen. Achtzig Prozent der isolierten Gene konnten durch das bioinformatische Programm SignalP auf Proteinbasis als apoplastisch identifiziert werden. Eine Expressionsanalyse zeigte, dass die zellwandspezifischen Gene in den ersten Stunden der Regeneration, die höchsten Expression aufwiesen. Anhand einiger Beispielgene (At3g13520, At4g19810, At4g24780, At4g31840) konnte die Lokalisation im Apoplasten durch die Fusion mit dem Green Fluorescent Protein (GFP) nachgewiesen werden. Außerdem wurde die Funktion eines Genes, das möglicherweise an der Zellwandbiosynthese beteiligt ist, an einer Arabidopsis thaliana T-DNA Knockout Mutante untersucht. Es ließ sich nachweisen, dass die T-DNA Insertion im UGE3-Gen (UDP-Glukose Epimerase), einem Gen des Nukleotidzucker-Synthesewegs, erfolgt war. Die Mutante zeigt eine starke Verkürzung der Wurzellänge. Die Zellwandmonosaccharide dieser Mutante unterschieden sich nicht vom Wildtyp. Hingegen konnten Unterschiede in der Zusammensetzung der Arabinogalaktan-Proteine der Wurzelzellwand festgestellt werden. Eine chemische oder genetische Komplementation der uge3 Mutante war nicht möglich. Es wird gefolgert, dass die T-DNA- Insertion nicht für das verkürzte Wurzelwachstum verantwortlich ist.

Author dc:creator

• Kuschinsky, Anja

Advisor dc:contributor.advisor

• Stahl, Ulf

Licence dc:rights.uri

• http://rightsstatements.org/vocab/InC/1.0/

Language dc:language.iso

de, German

Identifier URI

urn:nbn:de:kobv:83-opus-12283
http://dx.doi.org/10.14279/depositonce-1304

OAI identifier oai:identifier

oai:depositonce.tu-berlin.de:11303/1601