Implication des voies de signalisation associées au calcium dans la régulation des jonctions communicantes au niveau testiculaire

Le testicule est un organe complexe avec plusieurs types de cellules où les jonctions communicantes (JCs) sont particulièrement importantes puisqu'elles participent à la régulation de la maturation des spermatozoïdes. Dans le testicule, de telles jonctions sont retrouvées entre les cellules de Leydig, entre les cellules de Sertoli ainsi qu'entre les cellules germinales et les cellules de Sertoli. Plusieurs protéines des JCs membres de la famille des connexines (Cx) ont été détectées au niveau du testicule. Parmi les transcrits des 20 gènes codant pour les connexines identifiées chez les rongeurs (21 chez l'humain), la connexine 43 (Cx43, aussi appelée Gja1, pour Gap junction en anglais) est la connexine la plus abondante dans le système reproducteur masculin. Dans notre laboratoire, nous avons identifié plusieurs facteurs de transcription participant à la régulation de l'expression du gène Cx43 chez les cellules de Leydig et de Sertoli. En plus, plusieurs études ont confirmé l'importance des facteurs de transcription membres de la famille AP-1 pour la physiologie du testicule. Cependant, la caractérisation de ces derniers en rapport avec la voie de signalisation du calcium, notamment la voie des kinases Ca2+/calmoduline-dépendantes (CaMKs), n'est pas toujours bien définie. Puisqu'elle participe à la régulation de l'activité de plusieurs facteurs de transcription au niveau testiculaire, une emphase particulière a été portée sur la famille des CaMKs multifonctionnelles, composée de CaMKI, -Il et -IV. Afin de mieux définir et caractériser les voies de signalisation participant à I activation de des facteurs de transcription qui contribuent à la régulation du gène Cx43 dans les cellules de Leydig, différentes techniques ont été utilisées et leurs résultats comparés. Parmi ces techniques sont retrouvées des PCR quantitatives en temps réel, des Western-Blot, des immunoprécipitations de la chromatine (ChIP) et des analyses de séquençage d ARN. Ainsi, en partant de l'hypothèse stipulant que la voie de signalisation des Ca2+/CaMKs est impliquée dans l'activation de l'expression du gène Cx43 chez les cellules de Leydig du testicule de souris, nous avons examiné plusieurs paramètres, i) Évaluer les impacts de modulateurs du calcium sur l'expression endogène de Cx43 chez les cellules de Leydig, ii) Déterminer si les CAMKI, Il ou IV activent le promoteur Cx43 en transfection chez les cellules de Leydig MA10. iii) Confirmer l'implication de facteurs de transcriptions dépendants du calcium dans la régulation de l'expression de Cx43 chez les cellules de Leydig. En résumé, nos résultats montrent que la régulation de l'expression de Cx43 dans les cellules de Leydig MA-10 est régulée par CaMKI. Cette régulation nécessite la région proximale sur le promoteur Cx43 située entre -132 et -26 pb, impliquant le recrutement des facteurs de transcription membres de la famille AP-1. En conclusion, les facteurs AP-1, notamment les facteurs cJUN et cFOS, semblent être des facteurs clés qui sont importants pour la régulation du gène Cx43 en collaboration avec CaMKI dans les cellules de Leydig. Ainsi, la caractérisation de la voie de signalisation des CaMKs comme régulateur du promoteur Cx43 et de son mécanisme d'action participera à mieux définir la spécificité tissulaire de ce gène dans les cellules de Leydig.

Name thesis:degree_name

Maîtrise ès sciences (biologie)

Level thesis:degree_level

2e cycle

Discipline thesis:degree_discipline

Faculté des sciences

Grantor dc:publisher

Université de Moncton

Year dc:date.issued

2022

Author dc:creator

• Najih, Mustapha

Advisor dc:contributor.advisor

• Martin, Luc J.

• Jonctions communicantes (Biologie cellulaire)
• Calmoduline
• Chromatine
• Cellules interstitielles du testicule
• Cellules de Sertoli

Statement dc:rights

• Author

Language dc:language.iso

iso639-2b, fre

Dc Identifier Other

umir:2669

OAI identifier oai:identifier

oai:umoncton.scholaris.ca:20.500.14658/8357