Untersuchungen des adjuvanten Effekts des viralen Tegumentproteins VP22 auf die Induktion Melanom-spezifischer cytotoxischer T-Zellen in C57BL/6 Mäusen nach DNA-Immunisierung

Melanomzellen koennen durch zytotoxische T Zellen, die spezifisch das TRP-2 Differenzierungsantigen erkennen, zerstoert werden. Im Rahmen der vorliegenden Arbeit sollte daher eine TRP-2 DNA-Vakzine hergestellt und die Aktivierung TRP-2-spezifischer T-Zellen in der C57BL/6 Maus nach DNA Immunisierung evaluiert werden. Die Immunogenitaet der Vakzine sollte durch die Fusion von TRP-2 an VP22, dem Tegumentprotein des Herpes Simplex Virus 1, gesteigert werden. VP22 besitzt die Faehigkeit, interzellulaeren Transport von Proteinen zu vermitteln, so dass VP22-TRP-2 Fusionsproteine effizienter in professionelle antigenpraesentierende Zellen (APC), den Initiatoren spezifischer zytotoxischer Immunantworten, transferiert werden sollten. Verschiedene DNA Vakzine wurden hergestellt, die fuer VP22-TRP-2 Fusionsproteine mit jeweils unterschiedlichen TRP-2 Anteilen (gesamtes TRP-2 Protein oder interne TRP-2 Fragmente) kodieren. Durch die Deletion hydrophober N- und C-terminaler TRP-2 Sequenzen sollte ein effizientes Aus- und Einschleusen der Fusionsproteine ermoeglicht werden. Zu Kontrollzwecken wurden entsprechende DNA-Vakzine ohne VP22-Anteil hergestellt. In vivo induzierten VP22-TRP-2 DNA Vakzine tatsaechlich verbesserte TRP-2-spezifische T-Zellantworten: 30 % der VP22-TRP2 immunisierten C57BL/6 Maeuse zeigten eine TRP-2-spezifische T-Zellantwort, waehrend entsprechende Kontrollvakzine (ohne VP22-Anteil) nur in 4 % der Tiere eine TRP-2-spezifische Immunantwort induzierten. Desweiteren konnte mittels Westen Blot Analysen und Immunfluoreszenz-Mikrokopie ein Einfluss von VP22 auf die Stabilitaet beziehungsweise die intrazellulaere Lokalisation fusionierter TRP-2 Proteinfragmente nachgewiesen werden.

Level thesis:degree_level

thesis.doctoral

Grantor dc:publisher

Universität Heidelberg

Year

2004

Author dc:creator

• Gelen, Ebil-lun

Contributors dc:contributor

• Wolfrum, Juergen

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http://www.ub.uni-heidelberg.de/archiv/5099

OAI identifier oai:identifier

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