Funktionelle Analyse des Prostate-derived-Ets-Factors (PDEF) in der Prostatakarzinomzelllinie LNCaP

PDEF, ein Koregulator des Androgenrezeptors, zeigt eine deutlich tumorassoziierte Expression. Seine Rolle in der Tumorzellinvasion wird derzeit kontrovers diskutiert. Um die Funktion von PDEF im Prostatakarzinom zu untersuchen, wurde seine Expression in verschiedenen nicht-malignen und malignen Prostatazelllinien ermittelt. Des Weiteren wurden die Effekte der PDEF-Herunterregulierung mittels RNA-Interferenz in der androgensensiblen Prostatakarzinomzelllinie LNCaP analysiert. LNCaP-Zellen wurden mit siRNA gegen PDEF transfiziert. Als Kontrolle diente siRNA gegen das im Menschen nicht vorkommende Luciferasegen (LUC). Die Zellproliferation wurde mit dem BrdU-Assay ermittelt und der Bestimmung der Zellvitalität diente ein AlamarBlue -Assay. Die Genexpression wurde mittels Real-Time-RT-PCR quantifiziert. Die PDEF-mRNA-Expression war in den benignen immortalisierten Prostatazellen (BPH-1, PNT2, RwPE-1) über 1000-fach niedriger im Vergleich mit den Prostatakarzinomzelllinien (LNCaP, VCaP, PC-3). Durch die Transfektion mit spezifischer siRNA konnte die PDEF-Expression in den LNCaP-Zellen bis auf 20% herunterreguliert werden, während die siLUC-Transfektion keinen vergleichbaren Effekt hatte. Nach Herunterregulierung von PDEF zeigte sich eine deutliche Verminderung der Zellproliferation, einhergehend mit signifikant verringerter Expression verschiedener Prostatakarzinom-relevanter Gene: Androgenrezeptor, PSA, IGF-1, IGF-2, IGF-1-Rezeptor und der aktuell etablierte Marker PCA3. Im Gegensatz zu diesen Genen war die IGFBP-3-Expression mehr als 2-fach hochreguliert. Die Herunterregulierung von PDEF macht eine Funktion des Gens in Tumorzellproliferation und Apoptose deutlich. Eine siRNA-vermittelte Abnahme der Zellproliferation ging mit entsprechender Expression von Genen der Androgenrezeptor- und der IGF-Rezeptor-Achse einher. Die Expression von Genen mit antiproliferativen und proapoptotischen Effekten wie IGFBP-3 wurde hochreguliert. Darüber hinaus ist die PDEF-Expression in Prostatakarzinomzellen im Gegensatz zu beni gnen Prostatazellen deutlich mit einem malignen Phänotyp assoziiert. Demzufolge ist PDEF ein Marker für das Prostatakarzinom, der eine deutliche Tumorassoziation und eine entscheidende Funktion in der Tumorprogression zeigt.

Author dc:creator

• Schulz, Karoline Anna

Contributors dc:contributor

• Thelen, Paul PD Dr.
• Jarry, Hubertus Prof. Dr.
• Virsik-Köpp, Patricia Prof. Dr.

• 610 Medizin, Gesundheit
• Medicine
• Prostatakarzinom PDEF
• Androgenrezeptor
• LNCaP-Zellen
• prostate cancer PDEF
• androgen receptor
• LNCaP cells
• 44.88
• MED 283: Molekularbiologie {Medizin}
• MED 471: Urologie

Licence

• https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/

Language dc:language

ger

Identifier

https://dx.doi.org/10.53846/goediss-996
urn:nbn:de:gbv:7-webdoc-2953-3
webdoc-2953
666361312

OAI identifier oai:identifier

oai:ediss.uni-goettingen.de:11858/00-1735-0000-0006-B1E1-4