Genetic and functional characterisation of killer cell immunoglobulin like receptors (KIR) of rhesus macaques (Macaca mulatta)

Diese Doktorarbeit beschreibt die Charakterisierung der genetischen Diversität der killer cell immunoglobulin like Rezeptoren (KIR) und die Interaktion zwischen KIR und MHC-Klasse-I Molekülen im Rhesusaffen (Macaca mulatta). In Menschen wurde gezeigt, dass KIR Haplotypen Auswirkungen auf die Resistenz gegen unterschiedliche Krankheiten haben. Der Rhesusaffe ist ein häufig verwendetes Tiermodel für verschiedene Krankheiten, wie z.B. AIDS. Die Diversität der KIR Gene wurde in anderen Studien bereits untersucht; jedoch wurde bis jetzt noch keine Genotypisierung für den Rhesusaffen beschrieben weshalb Informationen über KIR Genotypen und Haplotypen fast komplett fehlen. Desweiteren fehlen Informationen über die Interaktion zwischen KIR und MHC-Klasse-I Molekülen. Ein Ziel dieser Studie war es, ein KIR Genotypisierungsassay für den Rhesusaffen zu etablieren und KIR Genotypen und Haplotypen zu bestimmen. Dabei wurden acht neue KIR cDNA Sequenzen aus einer NK Zell cDNA Bank isoliert. Alle Sequenzen kodieren KIR3D Moleküle, was die hohe Diversität der Lineages II KIR Gene im Rhesusaffen bestätigt. Für diese Sequenzen und die bereits in öffentlichen Datenbanken veröffentlichten Sequenzen wurde ein KIR Genotypisierungsassay mit 31 Primerpaaren etabliert. Hiermit konnten 25 KIR Genotypen in vier Familien mit einer gesamt Zahl von 70 Tieren identifiziert werden. Mit Hilfe von Segregationsstudien in diesen Familien konnten 21 Haplotypen bestimmt werden. Die Haplotypen variieren in ihrer Anzahl an Genen zwischen 5 und 11 KIR Genen pro Haplotyp. Diese Ergebnisse zeigen ein vergleichbares Level der Diversität und Komplexität der KIR Haplotypen im Menschen und Rhesusaffen. Das zweite Ziel dieser Doktorarbeit war die Identifizierung von spezifischen Interaktionen zwischen KIR und MHC-Klasse-I Moleküle und die Bestimmung von Interaktionsstellen dieser Moleküle. Hierfür wurden KIR-Fc Fusionsproteine mit unterschiedlichen Mamu-A und -B transfizierten Zellen untersucht. Starke spezifische Interaktionen konnten zwischen zwei KIR Molekülen jeweils mit zwei Mamu-A Molekülen identifiziert werden, wohingegen keine spezifische Interaktion mit Mamu-B Molekülen gefunden werden konnte. Die Bestimmung der Interaktionsstellen wurde mit den beiden KIR Molekülen (KIR3DLW03 und KIR3DL05) durchgeführt, die eine spezifische Interaktion gezeigt haben. Hierbei wurde ein unterschiedliches Bindungsmuster der beiden Moleküle fest gestellt. Die Bindungsspezifität von KIR3DL05 zeigt Ähnlichkeiten zu der Bindungsspezifität bei Menschen wobei hauptsächlich die α1 Domäne des Mamu-A Moleküls bindet, insbesondere aber das Bw-Epitop. Im Kontrast dazu bindet das KIR3DL05 Molekül die α1 und α2 Domäne des Mamu-A Moleküls. Desweiteren sind unterschiedliche Aminosäuren auf Seite der KIR Moleküle an der Bindung dieser Moleküle mit den Mamu-A Molekülen beteiligt. Die Erkenntnisse der etablierten KIR Genotypisierung und die entdeckten Interaktionen zwischen KIR und Mamu-A Molekülen werden die Aussagekraft zukünftiger Untersuchungen mit dem Rhesusaffen als Tiermodel verbessern und werden die benötigte Anzahl an Tieren für Krankheitsstudien reduzieren

Author dc:creator

• Kruse, Philip Hermann

Contributors dc:contributor

• Walter, Lutz Prof. Dr.
• Wienands, Jürgen Prof. Dr.
• Engel, Wolfgang Prof. Dr.

• 570 Biowissenschaften, Biologie
• Biologie
• Killer cell immunoglobulin like Rezeptoren (KIR)
• Rhesusaffe (Macaca mulatta)
• NK Zelle
• killer cell immunoglobulin like receptors (KIR)
• rhesus macaque (Macaca mulatta)
• NK cell
• 44.45
• 42.30
• MED 340: Immunologie / Allergologie / Umweltmedizin / Medizinische Ökologie - Allgemein- und Gesamtdarstellungen
• WF

Licence

• https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/

Language dc:language

eng

Identifier

https://dx.doi.org/10.53846/goediss-431
urn:nbn:de:gbv:7-webdoc-2844-2
webdoc-2844
663756480

OAI identifier oai:identifier

oai:ediss.uni-goettingen.de:11858/00-1735-0000-0006-ADED-9