Die Isolierung und Charakterisierung der cDNA und des Gens Metr-1 der Maus, einem Vertreter der Bruno-like Genfamilie und Analysen zur Expression

Die Proteine der BRUNO-like Familie gehören der Familie der RNA-Bindungsproteine an. Diese Proteine spielen eine wichtige Rolle in der Entwicklung, Zelldifferenzierung und Regulation des Nervensystems, aber auch für den mRNA-Transport, die mRNA-Lokalisation und die mRNA-Translation sind sie von großer Bedeutung. Charakteristisch für die Struktur dieser Proteine sind drei RNA-Recognition-Motifs (RRM), die eine Kernstruktur einer funktionellen RNA-Bindungs-Domäne (RBD) repräsentieren. Im Rahmen dieser Arbeit wurde ein neuer Vertreter der Bruno-like Gen Familie, Metr-1 der Maus, isoliert und anschließend charakterisiert. Metr-1 ist ein 2843 Nukleotide großes Transkript mit einem offenen Leserahmen für ein 481 Aminosäuren kodierendes Protein METR-1, das die charakteristischen drei RRM Motive aufweist. Durch Northern Blot Analysen konnten man Transkripte einerseits in der Gehirn mRNA mit einer Größe von 2,8 kb sowie 3,5 kb und andererseits ein 3.0 kb großes Transkript in der Testis RNA nachweisen. Expressions-Analysen mit Hilfe der RT-PCR Technik zeigten, daß Metr-1 schon in der RNA 9,5 Tage p.c. alter Maus-Embryonen schwach zu detektieren ist. Außerdem konnte eine Expression in den Keimzellen, in den Pachytän-Spermatozyten, nachgewiesen werden. In whole mount in situ"- Analysen wurde gezeigt, daß Metr-1 wahrscheinlich in der embryonalen Entwicklung, der Differenzierung und der dorsoventralen Orientierung des embryonalen Nervensystems eine Rolle spielt. So wurde Metr-1 in den dorsalen Bereichen des Telencephalons, Mesencephalons, Diencephalons, Myencephalons, Neuroephitels, Neuralrohrs und in den Spinalganglien 10,5 und 11,5 Tage p.c. alter Embryonen identifiziert. Durch in situ Hybridisierungs-Analysen von Gehirnschnitte adulter Mäuse wurde eine Metr-1 Expression ausschließlich im Zytoplasma der Purkinje-Zellen des Cerebellums aufgezeigt. Mittels genomischer Southern Blot Analyse wurde nachgewiesen, daß Metr-1 als Einzelkopie im Genom vorliegt. Das Gen der Maus wurde mit Hilfe eine Cosmid Klons charakterisiert; es ist ca. 18 kb groß und weist insgesamt 13 Exone auf.

Author dc:creator

• Wilhelm, Christian

Contributors dc:contributor

• Laccone, Franco PD Dr.
• Engel, Wolfgang Prof. Dr.
• Hoyer-Fender, Sigrid Prof. Dr.

• 570 Biowissenschaften, Biologie
• Biologie
• Maus
• Bruno-like Gen
• Metr-1
• Embryo
• Nervensystem
• Gehirn
• RNA-Bindungs-Proteine
• mouse
• Bruno-like gene
• nervous system
• brain
• RNA binding protein
• 42.13
• 42.20
• WJ 000: Genetik {Biologie}
• WJD 200: Gen-Expression {Biologie, Genetik}
• WJL 000: Molekulargenetik {Biologie}

Licence

• https://webdoc.sub.gwdg.de/diss/copyrdiss.htm

Language dc:language

ger

Identifier

https://dx.doi.org/10.53846/goediss-142
urn:nbn:de:gbv:7-webdoc-1253-4
webdoc-1253
361329059

OAI identifier oai:identifier

oai:ediss.uni-goettingen.de:11858/00-1735-0000-0006-AC19-D