Produktion und molekulare Charakterisierung eines monoklonalen polyreaktiven, 'natürlichen' Autoantikörpers

Durch Fusionierung von B-Lymphozyten eines Patienten mit rheumatoider Arthritis mit einer Heteromyelomzellinie wurden Hybridome gewonnen, die monoklonale IgM-kappa und IgMl-Antikörper produzieren. Im ELISA sowie mit SDS-PAGE, FACS, Immunfluoreszenz, Immunhistologie und RIA wurde gezeigt, daß es sich bei den kappa-Klonen um polyspezifische (kreuzreaktive) Autoantikörper handelt, während die lambda-Klone auf die meisten getesteten Autoantigene nicht reagierten. Die kappa-Klone (z.B. G1.B6) erkennen beispielsweise Aktin, BSA, eine Subpopulation von Maus-B-Zellen, Cytokeratin, Desmin, Fibronectin, g-Fc, hCI, hCII, hCIV, hCV, hsp65, Hu-Alb, Insulin, mCII, Ov-Alb, Pepsin, Rattenmyosin, Somiten im Mausembryo, Tg, TPO, TSH-Rezeptor, Vimentin, Z-Ag. Sie erkennen nicht HEp2 Zellen und Gelatine. Die kappa-Kette des Klons G1.B6 (EMBL Accession-Number X94431, ID HSG1B6IGK) besitzt ein V-Segment der VkI-Familie, die Sequenz ist gegenüber dem Keimbahngen O2/O12 kaum mutiert (1 stille Mutation). Das J-Segment der kappa-Kette ist ein J1-Segment, die Sequenz ist gegenüber dem Keimbahngen unmutiert. Die VJ-Sequenz zeigt eine weitgehende Übereinstimmung mit der leichten Kette eines pathologischen humanen Autoantikörpers gegen das Erythrozyten-Antigen i. Die schwere Kette des Klons G1.B6 (EMBL Accession-Number X94432, ID HSG1B6IGM) besitzt ein V-Segment aus der VH1-Familie (bis auf 1 bp in Keimbahnkonfiguration, Gen DP75/HumHV1L1). Die CDR3-Region ist durch eine D-D Fusion (DXP4 + DK4, beide zu 100 in Keimbahnkonfiguration) ungewöhnlich lang. Als J-Segment wird JH5b verwendet (100 in Keimbahnkonfiguration). <br>Es handelt sich um einen typischen 'natürlichen' Autoantikörper, der zudem einige für TPO-Autoantikörper charakteristische Eigenschaften besitzt, und somit ein ideales Studienobjekt für weitere Studien zur Bedeutung der natürlichen Autoantikörper und deren Beziehung zu pathologischen Autoantikörpern darstellt.

Author dc:creator

• Eysenbach, Gunther

Contributors dc:contributor

• Peter, Hans-Hartmut

• natürlicher Autoantikörper
• autoimmunerkrankung ,
• immunology
• rheumatology
• autoantibody
• monoclonal antibody
• natural autoantibody

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