Schaffung dreidimensionaler Kapillarnetze in extrazellulären Kollagenmatrices aus genmodifizierten humanen Endothelzellen.

Von der Entwicklung, Aufrechterhaltung und Regeneration des arteriell-venösen Gefäßnetzes hängt die Funktion eines jeden Organs und des Organismus insgesamt ab. Daher spielt die Angiogenese eine wichtige Rolle in der Wundheilung und Geweberegeneration. <br>Ziel dieser Arbeit war die Schaffung eines stabilen Kapillarnetzes aus kultivierten genmodifizierten Endothelzellen zur Vaskularisation dreidimensionaler, im Rahmen des Tissue Engineering hergestellten Gewebe-Konstrukte. Wesentlichen Einfluß auf die Angiogenese üben angiogene Wachstumsfaktoren aus, die gezielt die Endothelzell-Proliferation, -Migration und -Differenzierung beeinflussen. Es wurden daher drei verschiedene Wachstumsfaktoren getestet: bFGF, VEGF und EGF. Zwei extrazelluläre Matrices: TissuVlies und Matrigel <br>wurden auf Stabilität und Eignung zur Endothelzellimplantation getestet. Humane Endothelzellen, sogenannte HUVEC, wurden aus Nabelschnüren isoliert und in speziellem Nährmedium kultiviert. Proliferationsassays in zweidimensionaler und dreidimensionaler Zellkultur mit verschiedenen Konzentrationen von rekombinanten Wachstumsfaktoren bFGF, VEGF und EGF zeigten eine deutliche Stimulation von Endothelzellen, wobei der stärkste proliferative Effekt durch bFGF hervorgerufen wurde. Die transiente liposomale Transfektion von Endothelzellen wurde erfolgreich mit beiden konstruierten hVEGF-165-Vektoren und beiden Transfektionsreagenzien durchgeführt. Das nach Transfektion der Endothelzellen exprimierte hVEGF-165 führte im Trennkammersystem zu einer gesteigerten Proliferation von nicht-transfizierten Endothelzellen. Außerdem wurden hVEGF-165-transfizierte HUVEC in den Kollagenschwamm und in das Kollagengel implantiert und zeigten eine signifikant gesteigerte Proliferationsaktivität und Ausbildung von kapillarähnlichen Strukturen in beiden Matrices. <br>Im Rahmen des Tissue Engineering ergibt sich eine Fülle von Möglichkeiten, Angiogenese therapeutisch einzusetzen und zu nutzen.

Author dc:creator

• Riabikhin, Artiom W.

Contributors dc:contributor

• Stark, Gerhard Björn

• Endothelzellen
• Gen-transfer
• 3D-Zellkultur
• tubuläre Strukturen
• therapeutic angiogenesis
• lipid-mediated gen transfer
• growth factors
• extracellular matrices
• tube-like structures

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