Charakterisierung humoraler und zellulärer Immunantworten gegen das Hepatitis-B-Virus X-Antigen mittels DNA-Immunisierung im Mausmodell

In der vorliegenden Arbeit wurde die Immunogenität des Hepatitis-B X-Antigens im murinen System mit der Methode der intramuskulären DNA-Vakzinierung im Hinblick auf die Entwicklung einer effizienten Immuntherapie der chronischen HBV-Infektion sowie des HBV-induzierten HCCs untersucht. Das X-Antigen spielt wahrscheinlich über Interaktionen eine wichtige Rolle bei der Etablierung der chronischen HBV-Infektion und der HCC-Genese. Im Serum HBV-infizierter Patienten wurden bereits einzelne Epitope des X-Antigens auf humoraler und T-Helferzell-Ebene in verschiedenen Studien charakterisiert. Zunächst wurden HBx-Expressionsplasmide der beiden HBV-Subtypen ayw und adw kloniert und die entsprechenden Antigene in eukaryontischen Zellen exprimiert. Um eine effiziente MHC-Klasse-I Präsentation des X-Antigens zu erreichen, wurden HBx-spezifische Vakzinia-Viren rekombiniert und selektioniert. Die Expression der rekombinanten Vektoren wurde in murinen Zellinien getestet. C57BL/6 und Balb/c Mäuse wurden mit den HBx-Expressionsvektoren sowie adjuvant mit den Zytokin-Vektoren IL-12 und IL-18 immunisiert. Die Antikörper-Analyse immunisierter Mäuse zeigte eine präferentielle Induktion von HBx-spezifischen Antikörpern in Balb/c Mäusen mit leicht erhöhter Serokonversionsrate bei Ko-Administration von IL-12- und IL-18. Bei Balb/c Mäusen wurden überwiegend schwache T-Helferzellantworten nach Immunisierung mit dem ayw-Subtyp beobachtet. Insgesamt konnte die parallele Induktion einer signifikanten Antikörperantwort und einer T-Helferzellantwort bei Balb/c Mäusen demonstriert werden. Der Nachweis einer signifikanten CD8+ zytotoxischen T-Zellantwort gegen Epitope beider Subtypen ist weder in Balb/c noch in C57BL/6 Mäusen mit der Methode der intramuskulären DNA-Immunisierung gelungen. Mit der Herstellung rekombinanter Vakzinia-Viren und der Klonierung von Expressionsvektoren der beiden X-Antigene liefert diese Arbeit wichtige Grundlagen für zukünftige immunologische Studien mit dem X-Antigen.

Author dc:creator

• Meckel, Stephan

Contributors dc:contributor

• Blum, Hubert Erich Christoph

• X-Antigen
• DNA-Immunisierung
• T-Zellantwort
• CTL-Antwort
• Antikörperantwort
• hepatitis B virus
• DNA vaccine
• T cell responses
• vaccinia virus

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