Die Rolle von Membrantransportprozessen bei der Aktivierung der Cl´-Sekretion an Kolonkryptbasiszellen

Das Ziel dieser Arbeit war die Charakterisierung der Sekretionsmechanismen nativer Kolonkryptzellen und vor allem, welche Bedeutung Membrantransportprozesse wie Exo- und Endozytose für die Sekretion haben. Dazu wurden Saugelektroden-Untersuchungen an den sekretorisch besonders aktiven Kolonkryptbasiszellen der Ratte durchgeführt. Mit Hilfe eines verbesserten Synchrondetektors war es erstmals möglich, das Membranpotential (Vm), die Zelleitfähigkeit (Gm) und die Zellmembrankapazität(Cm) gleichzeitig und mit sehr hoher zeitlicher Auflösung zu messen. Cm erlaubt eine direkte Erfassung der Summe aus exo- und endozytotischen Ereignissen an der Zellmembran. Bei der Aktivierung der Sekretion durch die Calcium-erhöhenden Agonisten Carbachol und ATP und auch bei Aktivierung des cAMP-Weges durch Forskolin/IBMX kam es zu einer Zunahme von Gm und Cm. Die Erhöhung von Cm war in beiden Fällen gering und die Korrelation von Cm/Gm schwach. Die größte Zunahme von Cm fand sich bei Zellschwellung nach Gabe hypotoner Lösung, die Korrelation Cm/Gm war am schwächsten ausgeprägt. Diese Ergebnisse könnten durch ein erhöhtes Exozytose/Endozytose-Verhältnis oder eine Vergrößerung der Zelle aufgrund Entfaltung zuvor eingefalteter Membrananteile erklärt werden. Zur Untersuchung der Natur der Kapazitätsänderungen verwendeten wir Toxin A, einen Zytoskelettinhibitor. Die Wirkung der verschiedenen Agonisten und der Zellschwellung auf Cm, Gm und Vm wurde durch Toxin A nicht signifikant verändert. Unsere Daten sprechen daher gegen Exozytose von Chlorid-Kanalhaltigen Vesikeln als Hauptmechanismus zur Aktivierung der Chlorid-Leitfähigkeit. Die Aktivierung von bereits in der Membran vorhandenen Kanälen scheint für sowohl Sekretion als auch Volumenregulation besonders wichtig zu sein.

Author dc:creator

• Hübner, Malte

Contributors dc:contributor

• Warth, Richard

• Chloridkanal
• CFTR
• Saugelektrodentechnik
• Exozytose
• Endozytose
• patch-clamp
• chloride-channel, capacitance
• colon
• secretion

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