Emergenza clonale di resistenza al metotrexato nelle cellule PDX con codice a barre dell'osteosarcoma

L'osteosarcoma è il tumore osseo maligno primario più comune nei bambini, negli adolescenti e nei giovani adulti, con circa 400 nuovi casi registrati ogni anno negli Stati Uniti. Gli sforzi per generare nuove opzioni terapeutiche sono stati limitati dalla difficoltà di comprendere meglio la biologia dell'osteosarcoma e i meccanismi sottostanti responsabili della resistenza ai farmaci. Diversi studi hanno dimostrato come l'eterogeneità intratumorale nasca come conseguenza della contemporanea coesistenza di più popolazioni subclonali e questi subcloni rispondano in maniera diversa alla chemioterapia. Questo comportamento può essere responsabile della resistenza ai farmaci frequentemente osservata nell'osteosarcoma. Pertanto, nel presente studio abbiamo cercato di valutare la conseguenza dell'instabilità cromosomica e dei brevi salti macroevolutivi nei meccanismi di resistenza al metotrexato (MTX) nelle cellule di osteosarcoma. Al fine di chiarire l'emergenza clonale della resistenza alla chemioterapia mirata e citotossica nell'osteosarcoma, abbiamo quindi lavorato sul codice a barre delle nostre linee cellulari derivate da modelli di xenotrapianto derivato dal paziente (PDX), quindi abbiamo generato cloni resistenti trattando le linee cellulari PDX con codice a barre con singolo agente Metotrexato (MTX). Per ogni clone è stato estratto il DNA al fine di eseguire il sequenziamento del DNA codificato a barre per determinare se la firma genomica dei cloni resistenti è presente in una sottopopolazione all'inizio del trattamento e se la resistenza è acquisita attraverso la selezione evolutiva o la modifica dipendente dal trattamento. Saggi funzionali di resistenza MTX, utilizzando [3H] Methotrexate per il saggio di trasporto, definiscono ulteriormente le basi della resistenza emersa. L'analisi dell'espressione genica dei quattro geni coinvolti nel meccanismo della resistenza MTX definisce la correlazione con l'assorbimento e la resistenza MTX. L'ampia variabilità della risposta alla selezione applicata da MTX alle cellule PDX può essere il risultato di un cancro a breve termine.

Grantor dc:publisher

Università degli studi di Catania

Year dc:date

2023

Author dc:creator

• LONGO, GIUSEPPE

Contributors dc:contributor

• STEFANI, Stefania

• Osteosarcoma, PDX, Methotrexate
• Osteosarcoma, PDX, Metrotressato

Statement dc:rights

• info:eu-repo/semantics/openAccess
• license:NON PUBBLICO - Accesso privato/ristretto
• license uri:iris.PRI01

Language dc:language

ita

Handle dc:identifier

https://hdl.handle.net/20.500.11769/582197

OAI identifier oai:identifier

oai:www.iris.unict.it:20.500.11769/582197