Σύνθεση αναλόγων των κανναβινοειδών CBD, CBN, CBG, CBC και έλεγχος της δράσης τους στο κανάλι TRPΑ1

Η παρούσα διπλωματική εργασία επικεντρώνεται στη σύνθεση και τη φασματοσκοπική ταυτοποίηση ημισυνθετικών παραγώγων των κανναβινοειδών της κανναβιδιόλης (CBD), κανναβινόλης (CBN), κανναβιγερόλης (CBG) και κανναβιχρωμένης (CBC), στα οποία εισήχθησαν πλευρικές αλυσίδες μήκους 3 έως 8 ατόμων άνθρακα. Παράλληλα, εξετάστηκε η δράση τους στο κανάλι παροδικού δυναμικού TRPA1 με στόχο να διερευνηθεί ο τρόπος με τον οποίο οι μεταβολές στο μήκος της πλευρικής αλυσίδας επηρεάζουν τη δραστικότητα και τη συγγένεια των ημισυνθετικά παραγόμενων κανναβινοειδών προς τον συγκεκριμένο μοριακό στόχο. Πιο συγκεκριμένα, για την ποιοτική ανάλυση των παραγόμενων ενώσεων εφαρμόστηκε φασματοσκοπία πυρηνικού μαγνητικού συντονισμού (NMR), τόσο σε μια διάσταση (1D) όσο και σε δυο διαστάσεις (2D). Στο πλαίσιο της μονοδιάστατης φασματοσκοπίας πραγματοποιήθηκε φασματοσκοπία πρωτονίου (¹H-NMR) και φασματοσκοπία άνθρακα (¹³C-NMR), με σκοπό την αρχική αποτύπωση του προφίλ των συντιθέμενων ενώσεων και αναγνώριση βασικών χημικών ομάδων. Παράλληλα, χρησιμοποιήθηκαν δισδιάστατες τεχνικές, όπως η ομοπυρηνική συσχέτιση μέσω COSY (Correlation Spectroscopy), καθώς και οι ετεροπυρηνικές τεχνικές HSQC (Heteronuclear Single Quantum Coherence) σε συνδυασμό με πειράματα DEPT (Distortionless Enhancement by Polarization Transfer), για τη διακριτή συσχέτιση των διαφόρων τύπων άνθρακα. Επιπλέον, εφαρμόστηκε η τεχνική HMBC (Heteronuclear Multiple Bond Correlation), η οποία παρείχε πληροφορίες για μακρινές συσχετίσεις μεταξύ πρωτονίων και ανθράκων. Η ολοκληρωμένη αυτή προσέγγιση συνέβαλε καθοριστικά στη διασαφήνιση της δομής των τελικών προϊόντων. Η βιολογική αξιολόγηση των ημισυνθετικών παραγώγων πραγματοποιήθηκε μέσω λειτουργικής δοκιμασίας ενεργοποίησης του ιοντικού καναλιού TRPA1 σε κύτταρα HEK293E που υπερεκφράζουν το ανθρώπινο TRPA1. Η μεταβολή της ενδοκυττάριας συγκέντρωσης Ca²⁺ καταγράφηκε με τη χρήση της πρωτεΐνης-αισθητήρα GCaMP6s, επιτρέποντας την ποσοτική αποτίμηση της δραστικότητας κάθε ένωσης. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι το μήκος της αλκυλικής πλευρικής αλυσίδας επηρεάζει καθοριστικά την ενεργοποίηση του TRPA1. Τα δεδομένα αυτά επιβεβαιώνουν την ύπαρξη δομικής εξάρτησης στη ρύθμιση του TRPA1 και αναδεικνύουν τα ημισυνθετικά κανναβινοειδή ως πιθανούς μη-κλασικούς τροποποιητές των καναλιών TRP. Πιο συγκεκριμένα, η κανναβιβαρίνη (CBNV) βρέθηκε ότι ήταν ο ισχυρότερος ενεργοποιητής του διαύλου TRPA1, ενώ ακολουθούν τα ανάλογα CBG (π.χ. CBGH, CBGP).

Authors dc:creator

• ΓΙΑΝΝΑΚΟΥ ΔΑΝΑΗ
• GIANNAKOU DANAI

• Θετικές Επιστήμες
• Science

Language dc:language

Ελληνικά, Greek

Identifier

uoadl:5373434

OAI identifier oai:identifier

oai:lib.uoa.gr:uoadl:5373434