Induktion Borna Disease Virus-spezifischer Immunität durch Vakzinierung mit dendritischen Zellen

Das Borna Disease Virus (BDV) ist ein stark neurotropes, nicht-zytolytisches Virus, das bei vielen Warmblütern tödlich verlaufende Meningoenzephalitiden verursachen kann. Dabei spielen immunpathologische Prozesse, die wesentlich durch CD8+ T-Lymphozyten vermittelt werden, eine zentrale Rolle. Die Suszeptibilität von Mäusen gegenüber der BDV-induzierten Erkrankung ist sehr unterschiedlich: Mäuse vom Stamm MRL erkranken spontan, während Mäuse vom Stamm B10.BR aufgrund einer immunologischen Ignoranz trotz hoher zerebraler Viruslast krankheitsresistent sind. Die Hypersensitivität der MRL-Tiere könnte auf einer erniedrigten Aktivierungsschwelle der CD8+ T-Zellen beruhen. Falls diese Hypothese zutrifft, sollte man MRL-Mäuse leichter mit peptidbeladenen dendritischen Zellen (DCs) immunisieren können als B10.BR-Mäuse. <br>Das Ziel dieser Arbeit war die Etablierung eines DC-Immunisierungsprotokolls und die Evaluierung verschiedener experimenteller Ansätze zur Quantifizierung der induzierten Immunantwort. Zunächst wurde ein Protokoll zur effizienten in vitro-Generierung syngener DCs aus Knochenmark erarbeitet. Diese Zellen wurden anschließend durchflusszytometrisch charakterisiert. Für die Immunisierung von Mäusen wurden DCs entweder mit dem immun-dominanten zytotoxischen T-Zell (CTL)-Epitop aus dem BDV-Nukleoprotein (TELEISSI) oder mit einem Kontrollpeptid beladen. Die erfolgreiche Induktion BDV-spezifischer CTLs wurde mit unabhängigen Testverfahren nachgewiesen. Milzlymphozyten aus Mäusen, die mit TELEISSI-beladenen DCs immunisiert worden waren, zeigten im 51Chromfreisetzungstest eine spezifische Lyse peptidmarkierter Zielzellen. Nach Immunisierung von Mäusen mit TELEISSI-beladenen DCs trat eine spezifische protektive Immunität gegen ein rekombinan-tes Vacciniavirus auf, welches das BDV-Nukleoprotein exprimiert. Durch Immunisierung mit TELEISSI-beladenen DCs konnte zudem die immunologische Ignoranz persistent BDV-infizierter Mäuse gebrochen werden, die Tiere entwickelten daraufhin BDV-typische neurologische Symptome. Weiter resultierte die Vakzinierung von Mäusen mit TELEISSI-beladenen DCs in einem moderaten Impfschutz gegen nachfolgende Infektion mit BDV. Insgesamt konnte mit dieser Arbeit somit die methodische Basis zur Aufklärung der immuno-logischen Unterschiede zwischen MRL- und B10.BR-Mäusen gelegt werden. Für verglei-chende Untersuchungen der T-Zell-Aktivierungsschwellen der beiden Mausstämme erwies sich der Vacciniavirus-Test als ungeeignet, da sich herausstellte, dass MRL-Mäuse eine stark verminderte Vacciniavirus-Resistenz aufweisen. Von den untersuchten Verfahren scheint der 51Chromfreisetzungstest am besten geeignet zu sein, mögliche Unterschiede aufzudecken.

Author dc:creator

• Fassnacht, Ulrike

Contributors dc:contributor

• Stäheli, Peter

• Vakzinierung
• vaccination
• dendritic cell
• Borna Disease
• immunity
• T-cell

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