Interaktionen von HLA-DR-Molekülen mit Chaperonen der HSP70-Familie und deren Bedeutung für das Prozessieren und Präsentieren von Autoantigenen

Die Rheumatoide Arthritis ist eine Autoimmunerkrankung. Sie ist mit bestimmten Allelen der HLA-DRB1-Gene gekoppelt. Die betroffenen b-Ketten dieser HLA-DR4-Subtypen tragen in der Peptidbindungstasche eine gemeinsame Aminosäuresequenz, das sog. shared epitope (QKRAA, QRRAA, RRRAA). Um die Funktion dieser Allele vergleichen zu können, wurden murine Makrophagen zur Verfügung gestellt, die Gene für HLA-DRB1*0401 (TP0401) bzw. DRB1*0408 (TP0408) exprimieren, die sich nur in einer einzelnen Aminosäure in Position 71 (Lys - Arg) der DR-b-Kette unterscheiden. TP-Zellen aktivieren den humanen T-Zellklon PM-A C3, der ein Epitop der a-Kette des Acetylcholin-Rezeptors (AChR) im Kontext von HLA-DR4 erkennt. Von diesem Antigen ist bekannt, das es von Zellen, deren HLA-DR-b-Ketten sich innerhalb des shared epitopes unterscheiden, verschieden prozessiert wird. Durch Bindungsstudien von Peptid an die entsprechenden MHC-Moleküle und Induktion von invarianter Kette konnte bestätigt werden, daß der Unterschied in den DR-b-Ketten dieser TP-Zellen allein für das Prozessieren der a-Kette des AChR wichtig ist. Durch proteinchemische Analysen wurde demonstriert, daß die rekombinant hergestellte Präparation der a-Kette Chaperone aus E. coli, nämlich DnaK (HSP70) und in geringen Mengen DnaJ (HSP40), enthielt. Durch Depletion an ATP-Agarose konnte DnaK entfernt werden. Die so gewonnene DnaK-freie Antigenpräparation wurde zur Stimulation des humanen T-Zell-Klons PM-A C3 eingesetzt. Im Gegensatz zu den vorangegangenen Experimenten konnte nun kein Unterschied in der Präsentation der a-Kette durch *0401 im Vergleich zu *0408 festgestellt werden. Durch Zugabe von DnaK zur gereinigten Proteinlösung von r1-437 gelang bei Präsentation durch DRB1*0401-positive APZ die Rekonstitution der T-Zell-Antwort. Dies läßt den Schluß zu, daß DnaK für das in dieser Arbeit verwendete System einen essentiellen Bestandteil bei der Prozessierung und Präsentation von Polypeptiden und Proteinen darstellt.

Author dc:creator

• Roth, Sabine

Contributors dc:contributor

• Jahn, Dieter

• HLA-DR
• HSP70

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