Universität Tübingen
Untersuchungen zu Lokalisation, intrazellulärer Calciumkonzentration, Membranpotential und sekretorischer Aktivität reninsezernierender Zellen in der afferenten Arteriole der Ratte
Abstract
Ein wichtiges Steuerelement bei der Regulation des Wasser- und Elektrolythaushalts eines Organismus ist das Renin-Angiotensin-Aldosteron-System (RAAS), dessen Aktivität in erster Linie durch die Sekretionsrate der Protease Renin moduliert wird. Um mehr über die zellulären Regulationsmechanismen der reninsezernierenden Zellen zu erfahren, wurde die Abhängigkeit der intrazellulären Calciumkonzentration ([Ca2+]i) sowie der Reninsekretion von verschiedenen Stimuli untersucht. Mittels Immunfluoreszenzfärbungen konnten reninsezernierende Zellen in Kryoschnitten von Nieren normal sowie kochsalzarm ernährter Ratten lokalisiert werden. Desweiteren konnten Reningranula in isolierten reninsezernierenden Zellen dargestellt werden. Mit Hilfe des Calcium-sensitiven Fluoreszenzfarbstoffes Fura-2 wurde die [Ca2+]i sowie die Regulation der Calcium-Homöostase untersucht. Es zeigte sich, da eine Erhöhung der extrazellulären Kaliumkonzentration ([K+]o) zur Membrandepolarisation und zu einem konzentrationsabhängigen Anstieg der [Ca2+]i in den untersuchten Zellen führte, der von der Anwesenheit von extrazellulärem Calcium ([Ca2+]o) abhängig und durch Gabe des L-Typ Calcium-Kanalblockers Isradipin inhibierbar war. Weiterhin war [Ca2+]i auch von Änderungen der [Ca2+]o abhängig. Gabe des Vasokonstriktors Angiotensin II (ANG II) führte zu einem konzentrations-abhängigen Anstieg der [Ca2+]i, der ab einer Konzentration von 3*10-8 M ANG II in eine Peak- und eine Plateau-Phase gegliedert war. Es wurde eine Konzentration-Wirkungs-Beziehung erstellt und eine EC50 von 11 nM ermittelt. Mit Hilfe des spannungssensitiven Fluoreszenzfarbstoffes DiBAC4(3) konnte ein Effekt des KATP-Kanalöffners Levcromakalim und des KATP-Kanalblockers Glibenclamid auf das Membranpotential festgestellt werden, wogegen beide Substanzen keinen Effekt auf [Ca2+]i hatten.
Author and committee
dc:creator, dc:contributor.*- Author
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- Rauch, Ulrich
Identifiers
dc:identifier.*- Identifier
- hdl:10900/48135