Delivery of nucleic acids by cell-penetrating peptides: application in modulation of gene expression
Viimaste aastakümnete teaduslike saavutuste abil on loodud suur hulk erinevaid meetodeid, mis võimaldavad reguleerida geeniekspressiooni. Enamik geeniekspressiooni mõjutamiseks kasutatavaid molekule põhinevad nukleiinhapetel (NH-del) ja nende analoogidel, varieerudes lühikestest oligonukleotiididest (ON) kuni suurte plasmiidse DNA (pDNA) molekulideni. Oma füsikokeemilistest omadustest tingituna ei ole need molekulid ise võimelised bioloogilisi membraane läbima ning oma toimekohtadeni jõudmiseks vajavad nad transportvektorite abi. Rakku sisenevad peptiidid (RSP-d) on üks grupp mitteviiruslikke transportvektoreid, mis on leidnud laialdast kasutust alates nende avastamisest 1994. a. RSP-d on katioonsed ja/või amfipaatsed peptiidid, mis koosnevad 5–40 aminohappest ning on võimelised rakkudesse transportima erinevaid bioloogiliselt aktiivseid kargomolekule, nende hulgas pDNA-d, splaissingut korrigeerivaid ON-e (SKO) ja väikeseid interfereeruvaid RNA-sid (siRNA), seda nii in vitro kui in vivo tingimustes. Käesoleva töö eesmärk oli disainida ja iseloomustada uusi RSP-del põhinevaid vektoreid, mis moodustaksid mitte-kovalentselt nanopartikleid erinevate NH-del põhinevate molekulidega, seal hulgas pDNA-d geenide transportimiseks, SKO-sid splaissingu moduleerimiseks ning siRNA-sid geeniekpressiooni vaigistamiseks. Modifikatsioonidena lisasime RSP-dele stearhappe ja/või uudse endosomotroopse modifikatsiooni või muutsime RSP aminohappelist järjestust. Kokkuvõttes moodustavad kirjeldatud peptiidid mitteviiruslike transportvektorite platvormi erinevate NH-del ja nende analoogidel põhinevate molekulide transpordiks, mida saab kasutada geeniteraapia eesmärkidel ning geeniekpressiooni moduleerimisel, nii in vitro kui in vivo tingimustes.
dissertatsioonid, geeniteraapia, rakumembraan, bioloogiline transport, penetratsioon, peptiidid, nukleiinhapped, gene therapy, cell membrane, membrane transport, penetration, peptides, nucleic acids
Networked Digital Library of Theses and Dissertations