Proximité génômique de deux gènes des familles Vk12 et Vk23 d'immunoglobuline de souris BALB/c

Le locus Igk chez la souris est très complexe et plusieurs études sont encore à faire sur cette partie du génome. Grâce à l'avènement des banques d'ADN génômique de cosmides et du système d'électrophorèse en champs pulsé (CHEF pour 'contour-clamped homogeneous electric fields'), des analyses plus étendues de ce locus peuvent être accomplies. L'objectif de cette étude est de déterminer l'organisation du locus Igk autour de la région génétique Vk1 afin de contribuer à la compréhension des mécanismes de recombinaison et de génération de la diversité des anticorps. L'établissement d'une liaison physique entre les gènes du locus Igk nous permettrait de répondre à plusieurs questions concernant ce locus. Le réarrangement est-il un mécanisme ordonné? A quoi un si grand nombre de gènes Vk (100 à 300) servirait-il s'ils ne peuvent pas tous être exprimés? Est-ce que la position des gènes Vk influence la fréquence et l'ordre de leur expression? Un clone Vk1 a été isolé d'une banque de cosmides pWE15 contenant de l'ADN génômique de foie de souris BALB/c, et cartographié. Parallèlement, une nouvelle technique de clonage en 'slot blot' a été testée avec la même banque de cosmides. D'autres sondes Vk ont pu déceler la présence d'un second gène sur le clone criblé. D'après le séquençage de ces gènes, le gène criblé semblait faire partie plutôt de la famille Vk23 et le second gène était un membre de la famille Vk12. Ces gènes étaient distants de ~ 8.5Kb et placés dans la même orientation transcriptionnelle. Une analyse des REFs BamHI de deux segments de gène a alors été enclenchée pour savoir si leur proximité était réelle dans l'ADN génômique de foie de souris BALB/c. La liaison de ces segments Vk23 et Vk12 ne s'accordait pas avec une carte génétique du locus, alors plus d'analyses RFLP ont été effectuées. D'autre part, l'ADN génômique de souris a été analysé sur un gel à deux dimensions utilisant la technique d'électrophorèse CHEF, et hybridé avec une sonde Vk1. Cependant, la question de dipersion ou de regroupement des membres de la famille Vk1 sur le locus IgK demeure encore en suspens.

Name thesis:degree_name

M. Sc.

Level thesis:degree_level

Maîtrise

Discipline thesis:degree_discipline

Biochimie

Grantor dc:publisher

Université de Sherbrooke

Year dc:date.issued

1993

Author dc:creator

• Migneault, Monique

Advisor dc:contributor.advisor

• Gibson, David

Language dc:language.iso

fr

Handle dc:identifier.uri

http://hdl.handle.net/11143/14437

OAI identifier oai:identifier

oai:usherbrooke.scholaris.ca:11143/14437