Estudio de las interacciones de nanopartículas aniónicas de oro con ADN y sus monómeros constituyentes

En la presente Tesis Doctoral se desarrolla un estudio exhaustivo de la agregación de nanopartículas de oro (AuNPs) provocada por la interacción con las distintas unidades monoméricas del ADN, así como el efecto protector de ADN polimérico tanto de hebra doble como simple a la aglomeración inducida por una sal inerte. Se ha establecido un orden de afinidad para las nucleobases a partir de la determinación de valores de energías libres correspondientes al proceso de adsorción, obtenidos por tres procedimientos diferentes. Dicho estudio se ha extrapolado también a la adenosina y a la adenosina monofosfato, donde la agregación fue menor conforme aumentó el grado de complejidad del monómero; sin embargo, el no observarse aglomeración de nanoclusters no es sinónimo de no adsorción, hecho que se ha comprobado en el caso del nucleótido. La fuerza impulsora que diferencia el grado de agregación entre la adenosina neutra o cargada y el AMP es de carácter marcadamente electrostático. Se ha desarrollado paralelamente un método colorimétrico de detección de ADN de cadena larga tomando como punto de referencia el color azul de la banda de plasmón correspondiente a nanopartículas agregadas. Para ello fue necesaria la optimización de la cantidad de sal a añadir para desestabilizar al coloide, el orden de adición de los diferentes componentes así como el tamaño de la nanopartícula. A diferencia de los oligonucleótidos, donde sólo hay protección contra la agregación inducida por un electrolito para los de cadena simple, se observó un aumento del grado de dispersión del sistema coloidal conforme aumentó la concentración del biopolímero. Así mismo, técnicas como la miscroscopía de fuerza atómica, medidas de viscosidad o de dispersión dinámica de luz, entre otras, confirman que la mera presencia de nanopartículas aniónicas provoca cambios estructurales en el polinucleótido. Estos cambios reducen la estabilidad del ADN, provocando una preferencia por interaccionar con los cationes sodios y protegiendo a las nanopartículas de la agregación. Por otro lado se han obtenido complejos ADN-nanopartículas similares en conformación y estructura a las histonas sin necesidad de funcionar la nanopartícula o dotarla de carga positiva, trabajando a diferentes temperaturas y corroborando a través de espectros de dicroísmo circular que el ADN mantiene una conformación similar a la nativa.

Author dc:creator

• Carnerero Panduro, José María

Advisor dc:contributor.advisor

• Prado Gotor, Rafael

Statement dc:rights

• Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacional

Licence dc:rights.uri

• http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

Language dc:language.iso

spa

Handle dc:identifier.uri

https://hdl.handle.net/11441/71469

OAI identifier oai:identifier

oai:idus.us.es:11441/71469