{"id":{"repo_id":"moncton","oai_identifier":"oai:umoncton.scholaris.ca:20.500.14658/8039"},"canonical_url":"https://search.dev.ndltd.org/etd/moncton/oai:umoncton.scholaris.ca:20.500.14658/8039","repository":{"repo_id":"moncton","name":"University de Moncton","base_url":"https://umoncton.scholaris.ca/server/oai/request"},"display":{"title":"Impact des microvésicules de plaquettes sur l'expression de produits inflammatoires des monocytes et macrophages THP-1","abstract":"Les microvésicules de plaquettes (PMVs) sont de petites vésicules de 0,2 à 1 μm relâchées en grandes quantités par les plaquettes activées dans les environs du foyer inflammatoire. Les PMVs peuvent s’associer à la surface de plusieurs types cellulaires, dont certaines peuvent les internaliser. Dans la cellule hôte, leur cargo de microARN, de facteurs de transcription, d’organites, de lipides bioactifs et d’enzymes peuvent modifier le phénotype de la cellule. Les monocytes et les macrophages, responsables de l’élimination des vésicules extracellulaires en conditions homéostatiques, interagissent avec les PMVs durant la réponse inflammatoire. Leur capacité d’internaliser les PMVs et d’utiliser leur contenu à des fins liées à l’inflammation fait l’objet de cette étude. Nous avons démontré par cytométrie de flux que le modèle cellulaire monocytaire THP-1 et les macrophages qui en sont dérivés captent les PMVs. Leur capacité d’internaliser ces PMVs fut démontrée par microscopie confocale. Pour évaluer le transfert potentiel de contenu, les transcrits et les protéines des gènes prostaglandine synthases (PTGS) 1 et 2, lipoxygénases (ALOX) 5, 12 et 15, et thromboxane A synthase 1 (TBXASI) ont été quantifiés par la méthode rétrotranscription-réaction de polymérase en chaine quantitative (RT-qPCR) et immunobuvardage de type western, respectivement. Bien que les résultats de RT-qPCR n’étaient pas conclusifs, l’abondance des protéines cyclooxygénase (COX)-1 (encodée par le gène PTGS1) et TBXA A1 augmenta dans les cellules THO-1 de façon significative et proportionnelle à la dose de PMVs. La sécrétion de 12-HHTrE, produit par l’activité des deux enzymes transférées sur l’acide arachidonique (AA), augmenta aussi après l’incubation. Sachant que les enzymes COX-1 et TBXA A1 sont abondantes dans les plaquettes et leurs microparticules, ces résultats semblent démontrer un transfert de contenu des PMVs vers les cellules THP-1. L’effet de l’interaction en question sur les cytokines produites fut aussi investigué; quoiqu’aucun changement ne fut observé chez les THP-1 non différenciées, les PMVs ont changé le profil de cytokines produites par les M₀ et les M₁ en augmentant de façon générale la sécrétion de produits chimiotactiques. Nos résultats démontrent que les PMVs présentes en quantité suffisante semblent transférer une partie de leur contenu aux THP-1, et que ceci augmente leur phénotype pro-inflammatoire.","abstract_html":"Les microvésicules de plaquettes (PMVs) sont de petites vésicules de 0,2 à 1 μm relâchées en grandes quantités par les plaquettes activées dans les environs du foyer inflammatoire. Les PMVs peuvent s’associer à la surface de plusieurs types cellulaires, dont certaines peuvent les internaliser. Dans la cellule hôte, leur cargo de microARN, de facteurs de transcription, d’organites, de lipides bioactifs et d’enzymes peuvent modifier le phénotype de la cellule. Les monocytes et les macrophages, responsables de l’élimination des vésicules extracellulaires en conditions homéostatiques, interagissent avec les PMVs durant la réponse inflammatoire. Leur capacité d’internaliser les PMVs et d’utiliser leur contenu à des fins liées à l’inflammation fait l’objet de cette étude. Nous avons démontré par cytométrie de flux que le modèle cellulaire monocytaire THP-1 et les macrophages qui en sont dérivés captent les PMVs. Leur capacité d’internaliser ces PMVs fut démontrée par microscopie confocale. Pour évaluer le transfert potentiel de contenu, les transcrits et les protéines des gènes prostaglandine synthases (PTGS) 1 et 2, lipoxygénases (ALOX) 5, 12 et 15, et thromboxane A synthase 1 (TBXASI) ont été quantifiés par la méthode rétrotranscription-réaction de polymérase en chaine quantitative (RT-qPCR) et immunobuvardage de type western, respectivement. Bien que les résultats de RT-qPCR n’étaient pas conclusifs, l’abondance des protéines cyclooxygénase (COX)-1 (encodée par le gène PTGS1) et TBXA A1 augmenta dans les cellules THO-1 de façon significative et proportionnelle à la dose de PMVs. La sécrétion de 12-HHTrE, produit par l’activité des deux enzymes transférées sur l’acide arachidonique (AA), augmenta aussi après l’incubation. 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