Caractérisation de l'expression des facteurs de transcription des groupes SOXD et SOXE au niveau du testicule chez la souris
"Les facteurs de transcription Sox (SRY-related box) sont une famille de protéines fortement conservées chez les vertébrés. Elles régulent plusieurs processus de développement incluant la détermination et la différenciation sexuelle chez l'embryon mâle. Il est bien connu que certains membres de cette famille sont présents dans les cellules germinales et les cellules Sertoli chez le testicule post-natal. Par contre, aucun facteur de transcription Sox n'a été identifié au niveau des cellules de Leydig adultes. Les objectifs de cette thèse sont d'identifier l'expression des facteurs de transcription Sox9, Sox5 et Sox13 chez la lignée cellulaire de Leydig murine MA-10 ainsi que de caractériser et de localiser leur profil d'expression à partir de testicules de souris entiers représentant trois différents stades de développement post-nataux. Les techniques utilisées sont la qPCR, le Western blot, l'immunohistochimie et l'immunofluorescence. Les trois protéines d'intérêt sont identifées chez la lignée cellulaire MA-10 et le testicule entier. Les niveaux d'ARNm de Sox9, Sox5 et Sox13 semblent augmenter par rapport à l'âge, mais seul Sox5 augmente de façon significative. Les Western blot démontrent que les expression protéiques Sox9 et Sox13 au niveau du testicule entier demeurent constantes chez les trois stades d'intérêts. Cependant, l'expression Sox5 semble augmenter entre les âges de 60 jours et de 365 jours. De plus, les protéines des membres Sox étudiés sont majoritairement exprimées dans les extraits nucléaires des cultures cellulaires MA-10. Les stimulations avec le second messager AMPc, reconnu pour activer la stéroïdogenèse, n'ont pas d'effets sur la transcription et l'expression de Sox9, Sox5 et Sox13 au niveau des cellules MA-10. À partir des résultats d'immunohistochimes et d'immunofluorescences, nous n'avons pas réussi à tirer de conclusions en raison de marquages diffus et de l'incapacité de produire des lames contrôles fiables. L'ensemble des résultats a quand même permis de conclure que les facteurs de transcriptions Sox9, Sox5 et Sox13 sont exprimés dans le testicule post-natal et dans les cellules de Leydig adultes de la souris. Ces protéines pourraient réguler plusieurs processus, incluant la stéroïdogenèse et la spermatogenèse chez le mâle adulte."--Sommaire.
Cellules interstitielles du testicule, Facteurs de transcription, Protéines, Analyse, Buvardage de western, Transcription génétique, Régulation, Immunocytochimie, Immunofluorescence
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