Clonage du génome l'herpesvirus cyprin-3 en tant que chromosome artificiel bactérien

L’herpèsvirus de la carpe koi (KHV), ou herpèsvirus cyprin 3 (CyHV-3) est l’agent responsable d’une maladie mortelle chez les carpes koi et commune. Dans cette étude, nous avons décrit le clonage du génome du KHV sous forme d’un chromosome artificiel bactérien (BAC) stable et infectieux permettant la production de souches recombinantes du KHV. Cet objectif a été atteint par l’insertion d’une cassette BAC flanquée de sites loxP au sein du gène de la thymidine kinase (TK). Cette insertion a généré un plasmide BAC stable en bactéries et a permis de régénérer des virions par transfection en cellules permissives. Ainsi, des virions excisés pour la cassette BAC et possédants un gène TK tronqué ont été produits. De la même manière, des virions révertants pour TK ont également été produits. Les souches FL BAC excisée et révertante se répliquent de manière comparable à la souche parentale in vitro. La souche révertante a induit une maladie comparable à la souche sauvage, tandis que la souche excisée a présenté un phénotype partiellement atténué. Enfin, l’utilité du BAC KHV pour la production de recombinants a été démontrée par la production d’une souche délétée pour l’ORF16 grâce au principe de recombinaison en système procaryote. L’obtention du BAC KHV est une avancée importante qui permettra l’étude des gènes viraux impliqués dans la pathogénie du KHV ainsi que la production de vaccins recombinants atténués.

Grantor dc:publisher

ULiège - Université de Liège

Year dc:date

2008

Author dc:creator

• Fournier, Guillaume

Contributors dc:contributor

• Vanderplasschen, Alain
• Costes, Bérénice

• herpesvirus cyprin 3
• chromosome artificiel bactérien
• thymidine kinase
• Cyprinid Herpesvirus 3
• Bacterial Artificial Chromosome
• Life sciences
• Veterinary medicine & animal health
• Biochemistry, biophysics & molecular biology
• Sciences du vivant
• Médecine vétérinaire & santé animale
• Biochimie, biophysique & biologie moléculaire

Statement dc:rights

• open access
• info:eu-repo/semantics/openAccess

Licence

• http://purl.org/coar/access_right/c_abf2

Language dc:language

fr

Identifier

info:hdl:2268/117939

OAI identifier oai:identifier

oai:orbi.ulg.ac.be:2268/117939