Genetische und biochemische Charakterisierung von Nup192p - ein essentielles zentrales Nukleoporin des Kernporenkomplexes
Ein Hauptmerkmal eukaryotischer Zellen ist der von einer Kernmembran umschlossene Zellkern. Der regulierte Molekülaustausch zwischen Zellkern und Zytoplasma wird durch die in der Kernhülle liegenden Kernporenkomplexe (NPCs) ermöglicht. In der Hefe S. cerevisiae sind zwar alle am Aufbau des NPCs beteiligten Nukleoporine identifiziert, aber nur teilweise charakterisiert. Die vorliegende Arbeit beschäftigt sich mit Nup192p, einem der größten und eines der wenigen essentiellen Nukleoporine der Hefe S. cerevisiae ist. Um mehr über Funktion, Lage und Struktur von Nup192p zu erfahren, wurden genetische und biochemische Analysen durchgeführt. Die Ergebnisse dieser Arbeit zeigen, dass Nup192p auf genetischer Ebene spezifisch mit dem essentiellen Nsp1p-Nup49p-Nup57p-Nic96p-Komplex, dem essentiellen Nup84p-Komplex sowie mit Nup188p interagiert. Mittels Affinitätschromatographie und Western Blot Analyse konnte gezeigt werden, dass die genetischen Interaktionen zwischen Nup192p und Nup188p bzw. zwischen Nup192p und Nsp1p, Nup49p sowie Nic96p auf biochemischer Ebene direkten Interaktionen entsprechen. Dagegen sind die biochemischen Interaktionen zwischen Nup192p und dem Nup84p-Komplex schwächer ausgeprägt. Dies könnte bedeuten, dass Nup192p und der Nup84p-Komplexes aufeinander folgende oder überlappende Funktion in der NPC-Biogenese besitzen könnten. Die Ergebnisse unterstützen das Modell, dass Nup192p ein zentraler und essentieller struktureller Bestandteil der Speichen-Ring-Struktur ist. In dieser Umgebung könnte Nup192p Bestandteile des zentralen Transportkanals, z.B. den Nsp1p-Komplex, über Nic96p und Nup188p mit transmembranen Kernporenproteinen, wie Pom152p verbinden. Als möglicher Bestandteil des Speichen-Ring-Komplexes könnte Nup192p eine stabilisierende Funktion besitzen. Während der NPC-Biogenese könnte Nup192p als ein Gerüst fungieren und das Einfügen der mit Nup192p interagierenden Nukleoporine am richtigen Ort ermöglichen oder erleichtern.
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