Ein Gen für ein neues Ubiquitin-konjugierendes Enzym: Genomische Organisation, Expression und Funktion
type: CreativeWork
description: Zu Beginn dieser Arbeit wurde die 3'untranslatierte Region der cDNA des HGC1- Gens, das im Rahmen der Diplomarbeit teilweise isoliert und charakterisiert worden war, über MARATHON-PCR vervollständigt. Die fehlenden Sequenzen im 5'Bereich der cDNA von HGC1 konnten wegen eines hohen GC-Gehalts in der 5'Region des Gens nicht identifiziert werden. Aus der bekannten Nukleotidsequenz von HGC1 (3194 bp) kann ein offener Leserahmen von 445 AS abgeleitet werden und eine 3'untranslatierte Region von 1858 bp für HGC1 bestimmt werden. Über Northern Blot Analysen mit Poly(A+) konnte außerdem zwei Transkripte von 2,4 kb (bekannt) und 4 kb nachgewiesen werden. Das Ziel dieser Arbeit war es, die Funktion von HGC1 während der embryonalen und postnatalen Entwicklung der Maus zu analysieren. Dazu wurde das zu HGC1 homologe Gen der Maus (Mrhgc1) aus einer genomischen Phagenbibliothek des Mausstammes 129/SvJ isoliert und charakterisiert. Mrhgc1 erstreckt sich mit seinen 13 Exons über ca. 11 kb des Genoms der Maus. Die zusammengesetzte cDNA-Sequenz zeigt eine 95 %ige Homologie zu der Nukleotidsequenz von HGC1. Auf Proteinebene beträgt die Homologie 99 %. Mit Hilfe von Fluoreszenz in situ Hybridisierungen konnte Mrhgc1 auf dem Maus-Chromosom 3 in die Region F1 kartiert werden. Über Northern Blot Analysen konnte eine Expression von Mrhgc1 schon in embryonalen Stammzellen nachgewiesen werden. Abgleiche in der Datenbank ergaben, daß die abgeleitete Proteinsequenz von Mrhgc1 und HGC1 Homologien zu Mitgliedern der Genfamilie der 'ubiquitin conjugating enzymes' (E2-Enzyme) aufweist. Diese E2-Enzyme sind in den Ubiquitin-abhängigen Proteinabbau von regulatorischen und abnormalen Proteinen involviert. Sie zeichnen sich durch eine sogenannte UBC-Domäne aus, eine konservierte Region, dessen aktives Zentrum Ubiquitin bindet. Die Homologien von Mrhgc1 und HGC1 zu den E2-Enzymen beschränken sich auf die UBC-Domäne. Über Datenbankvergleiche konnte außerdem ein in Caenorhabditis elegans unbekanntes und …
abstract: Zu Beginn dieser Arbeit wurde die 3'untranslatierte Region der cDNA des HGC1- Gens, das im Rahmen der Diplomarbeit teilweise isoliert und charakterisiert worden war, über MARATHON-PCR vervollständigt. Die fehlenden Sequenzen im 5'Bereich der cDNA von HGC1 konnten wegen eines hohen GC-Gehalts in der 5'Region des Gens nicht identifiziert werden. Aus der bekannten Nukleotidsequenz von HGC1 (3194 bp) kann ein offener Leserahmen von 445 AS abgeleitet werden und eine 3'untranslatierte Region von 1858 bp für HGC1 bestimmt werden. Über Northern Blot Analysen mit Poly(A+) konnte außerdem zwei Transkripte von 2,4 kb (bekannt) und 4 kb nachgewiesen werden. Das Ziel dieser Arbeit war es, die Funktion von HGC1 während der embryonalen und postnatalen Entwicklung der Maus zu analysieren. Dazu wurde das zu HGC1 homologe Gen der Maus (Mrhgc1) aus einer genomischen Phagenbibliothek des Mausstammes 129/SvJ isoliert und charakterisiert. Mrhgc1 erstreckt sich mit seinen 13 Exons über ca. 11 kb des Genoms der Maus. Die zusammengesetzte cDNA-Sequenz zeigt eine 95 %ige Homologie zu der Nukleotidsequenz von HGC1. Auf Proteinebene beträgt die Homologie 99 %. Mit Hilfe von Fluoreszenz in situ Hybridisierungen konnte Mrhgc1 auf dem Maus-Chromosom 3 in die Region F1 kartiert werden. Über Northern Blot Analysen konnte eine Expression von Mrhgc1 schon in embryonalen Stammzellen nachgewiesen werden. Abgleiche in der Datenbank ergaben, daß die abgeleitete Proteinsequenz von Mrhgc1 und HGC1 Homologien zu Mitgliedern der Genfamilie der 'ubiquitin conjugating enzymes' (E2-Enzyme) aufweist. Diese E2-Enzyme sind in den Ubiquitin-abhängigen Proteinabbau von regulatorischen und abnormalen Proteinen involviert. Sie zeichnen sich durch eine sogenannte UBC-Domäne aus, eine konservierte Region, dessen aktives Zentrum Ubiquitin bindet. Die Homologien von Mrhgc1 und HGC1 zu den E2-Enzymen beschränken sich auf die UBC-Domäne. Über Datenbankvergleiche konnte außerdem ein in Caenorhabditis elegans unbekanntes und …
author: Altmann, Maria Elisabeth
language: ger
keywords: 570 Biowissenschaften, Biologie, Biologie, Ubiqitin-konjugierende Enzyme (E2), knock-out, 42.13, 42.20, 42.23, W
license: https://webdoc.sub.gwdg.de/diss/copyrdiss.htm
date published: 2012-04-16T14:57:02Z
date modified: 2026-07-24T02:24:11Z
provider: Georg-August-Universität Göttingen
publisher: Networked Digital Library of Theses and Dissertations
type: WebPage
source organization: Georg-August-Universität Göttingen

PropertyValue
property ID: Handle
value: https://hdl.handle.net/11858/00-1735-0000-0006-AC7B-F

PropertyValue
property ID: DOI
value: 10.53846/goediss-666