{"id":{"repo_id":"goettingen","oai_identifier":"oai:ediss.uni-goettingen.de:11858/00-1735-0000-0006-ABD2-2"},"canonical_url":"https://search.dev.ndltd.org/etd/goettingen/oai:ediss.uni-goettingen.de:11858/00-1735-0000-0006-ABD2-2","repository":{"repo_id":"goettingen","name":"Georg-August-Universität Göttingen","base_url":"https://ediss.uni-goettingen.de/oai/request"},"display":{"title":"Mechanismus der Hemmung der glucagon-stimulierten Phosphoenolpyruvat-Carboxykinase-1-Genexpression durch das proinflammatorische Interleukin 6 in primär kultivierten Rattenhepatozyten","abstract":"Im Verlauf einer Sepsis führt Dysregulation der vor allem durch Glucagon stimulierten hepatischen Glucose-Freisetzung zur Hypoglykämie. Interleukin-6 (IL6) ist der Hauptmediator der hepatischen Akut-Phase-Reaktion. In kultivierten Rattenhepatozyten hemmte IL6 die durch Glucagon ausgelöste Steigerung der Phosphoenolpyruvat-Carboxykinase-1-(PCK1)- Genexpression und den die Steigerung vermittelnden cAMP-Anstieg. Ziel dieser Arbeit war es, den molekularen Mechanismus der Hemmung der Glucagonwirkung auf das PCK1-Gen durch IL6 zu charakterisieren, wobei zur Kontrolle der wie Glucagon über cAMP wirkende ß-Agonist Isoproterenol eingesetzt werden sollte. In primär kultivierten Rattenhepatozyten stimulierten Glucagon und Isoproterenol den Anstieg der PCK1-mRNA. IL6 hemmte sowohl den durch Glucagon als auch den durch Isoproterenol stimulierten PCK1-mRNA-Anstieg. Glucagon und Isoproterenol steigerten in kultivierten Rattenhepatozyten die cAMP-Bildung, aber nur die glucagon-stimulierte cAMP-Bildung wurde durch IL6 gehemmt. Infolge intrazellulär erhöhter cAMP-Spiegel wurde die Glucose-Freisetzung aus Glykogen durch Glucagon und Isoproterenol in kultivierten Rattenhepatozyten stimuliert. IL6 hemmte die glucagon-stimulierte, aber nicht die isoproterenol-stimulierte Glucose-Freisetzung. Zunächst sollte nun geklärt werden, warum IL6 nur den glucagon-, nicht aber den isoproterenol-abhängigen cAMP-Anstieg inhibierte. Hier schien ein Angriffspunkt am Glucagon-Rezeptor wahrscheinlich. Daher wurde ein Glucagon-Rezeptor-Bindungsassay mit Membranen aus kultivierten Rattenhepatozyten etabliert. IL6 verminderte die 125J-Glucagon-Bindung transient. Die Verminderung der verfügbaren Glucagon-Rezeptoren könnte die Hemmung des glucagon-abhängigen cAMP-Anstiegs durch IL6 erklären. Weiterhin reduzierte IL6 in Membranen aus kultivierten Rattenhepatozyten die KD der Bindungsstelle für Glucagon; es erhöhte also die Affinität des Glucagons zum Rezeptor. Dies könnte auch zur Inhibition des Glucagon-abhängigen cAMP-Anstiegs durch IL6 beitragen, da bei einigen G-Protein-gekoppelten Rezeptoren die Affinitätserhöhung zum Liganden mit einer Hemmung der cAMP-Bildung, vermutlich über eine Erschwerung der Dissoziation des Gs-Proteins, einhergeht. Da der gemeinsame Angriffspunkt bei der Hemmung der glucagon- und isoproterenol-abhängigen PCK1-Genaktivierung durch IL6 nicht die cAMP-Bildung war, kam ein in der Signalkette weiter distal gelegener Schritt, z.B. ein Antagonismus im PCK1-Promotor gegen cAMP-stimulierte Transkriptionsfaktoren, die das Gen aktivieren, in Betracht. Diese Möglichkeit wurde in primären Rattenhepatozyten-Kulturen, die mit PCK1-Promotor-Luciferase-Genkonstrukten transfiziert wurden, untersucht: Insgesamt zeigen die Transfektionsexperimente, daß es zwar Angriffspunkte für eine positive und negative Regulation des PCK1-Genexpression durch IL6 im Bereich des PCK1-Promotors bis 1149 bp gibt, daß aber der Angriffspunkt für den IL6-Glucagon-Antagonismus außerhalb des untersuchten Promotorbereichs bis 2500 bp lokalisiert sein muß.","abstract_html":"Im Verlauf einer Sepsis führt Dysregulation der vor allem durch Glucagon stimulierten hepatischen Glucose-Freisetzung zur Hypoglykämie. Interleukin-6 (IL6) ist der Hauptmediator der hepatischen Akut-Phase-Reaktion. In kultivierten Rattenhepatozyten hemmte IL6 die durch Glucagon ausgelöste Steigerung der Phosphoenolpyruvat-Carboxykinase-1-(PCK1)- Genexpression und den die Steigerung vermittelnden cAMP-Anstieg. Ziel dieser Arbeit war es, den molekularen Mechanismus der Hemmung der Glucagonwirkung auf das PCK1-Gen durch IL6 zu charakterisieren, wobei zur Kontrolle der wie Glucagon über cAMP wirkende ß-Agonist Isoproterenol eingesetzt werden sollte. In primär kultivierten Rattenhepatozyten stimulierten Glucagon und Isoproterenol den Anstieg der PCK1-mRNA. IL6 hemmte sowohl den durch Glucagon als auch den durch Isoproterenol stimulierten PCK1-mRNA-Anstieg. Glucagon und Isoproterenol steigerten in kultivierten Rattenhepatozyten die cAMP-Bildung, aber nur die glucagon-stimulierte cAMP-Bildung wurde durch IL6 gehemmt. 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Diese Möglichkeit wurde in primären Rattenhepatozyten-Kulturen, die mit PCK1-Promotor-Luciferase-Genkonstrukten transfiziert wurden, untersucht: Insgesamt zeigen die Transfektionsexperimente, daß es zwar Angriffspunkte für eine positive und negative Regulation des PCK1-Genexpression durch IL6 im Bereich des PCK1-Promotors bis 1149 bp gibt, daß aber der Angriffspunkt für den IL6-Glucagon-Antagonismus außerhalb des untersuchten Promotorbereichs bis 2500 bp lokalisiert sein muß.","abstract_has_math":false,"creators":["Quaas, Meike"],"institution":null,"degree_name":null,"degree_level":null,"degree_discipline":null,"degree_department":null,"school":null,"contributors":["Jungermann, Kurt Prof. Dr.","Hardeland, Rüdiger Prof. Dr.","Götze, Otto Prof. Dr."],"advisors":[],"committee_chairs":[],"committee_members":[],"year":2012,"date_issued":"2012-04-16T14:46:13Z","date_published":"2012-04-16T14:46:13Z","updated_at":"2026-07-24T02:24:11Z","subjects":["570 Biowissenschaften, Biologie","Biologie","Phosphoenolpyruvat-Carboxykinase-1","Interleukin 6","Glucagon-Rezeptor","45.13","45.15","WH 000: Cytologie {Biologie}"],"languages":["ger"],"rights":[],"rights_urls":["https://webdoc.sub.gwdg.de/diss/copyrdiss.htm"],"identifier_entries":[{"key":"dc:identifier","label":"Identifier","values":["https://dx.doi.org/10.53846/goediss-72","urn:nbn:de:gbv:7-webdoc-1057-6","webdoc-1057","33082872X"],"render_values":[{"text":"https://dx.doi.org/10.53846/goediss-72","href":"https://dx.doi.org/10.53846/goediss-72","code":true},{"text":"urn:nbn:de:gbv:7-webdoc-1057-6","href":null,"code":true},{"text":"webdoc-1057","href":null,"code":true},{"text":"33082872X","href":null,"code":true}]}]},"links":{"outbound_url":"https://hdl.handle.net/11858/00-1735-0000-0006-ABD2-2","outbound_label":"Handle","outbound_source":"dc:identifier"},"metadata_groups":[{"id":"people","label":"People","entries":[{"key":"dc:contributor","label":"Contributor","values":["Jungermann, Kurt Prof. Dr.","Hardeland, Rüdiger Prof. Dr.","Götze, Otto Prof. Dr."]},{"key":"dc:creator","label":"Author","values":["Quaas, Meike"]}]},{"id":"academic_context","label":"Academic Context","entries":[{"key":"dc:date","label":"Dc Date","values":["2012-04-16T14:46:13Z","2013-01-30T23:50:46Z","2001-04-02","2000-10-30"]},{"key":"dc:type","label":"Dc Type","values":["doctoralThesis"]}]},{"id":"subjects_keywords","label":"Subjects and Keywords","entries":[{"key":"dc:subject","label":"Dc Subject","values":["570 Biowissenschaften, Biologie","Biologie","Phosphoenolpyruvat-Carboxykinase-1","Interleukin 6","Glucagon-Rezeptor","45.13","45.15","WH 000: Cytologie {Biologie}"]}]},{"id":"language_rights","label":"Language and Rights","entries":[{"key":"dc:language","label":"Dc Language","values":["ger"]},{"key":"dc:rights","label":"Dc Rights","values":["https://webdoc.sub.gwdg.de/diss/copyrdiss.htm"]}]},{"id":"identifiers","label":"Identifiers","entries":[{"key":"dc:identifier","label":"Identifier","values":["https://hdl.handle.net/11858/00-1735-0000-0006-ABD2-2","https://dx.doi.org/10.53846/goediss-72","urn:nbn:de:gbv:7-webdoc-1057-6","webdoc-1057","33082872X"]}]},{"id":"additional","label":"Additional Metadata","entries":[{"key":"dc:description","label":"Description","values":["Im Verlauf einer Sepsis führt Dysregulation der vor allem durch Glucagon stimulierten hepatischen Glucose-Freisetzung zur Hypoglykämie. 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Dies könnte auch zur Inhibition des Glucagon-abhängigen cAMP-Anstiegs durch IL6 beitragen, da bei einigen G-Protein-gekoppelten Rezeptoren die Affinitätserhöhung zum Liganden mit einer Hemmung der cAMP-Bildung, vermutlich über eine Erschwerung der Dissoziation des Gs-Proteins, einhergeht. Da der gemeinsame Angriffspunkt bei der Hemmung der glucagon- und isoproterenol-abhängigen PCK1-Genaktivierung durch IL6 nicht die cAMP-Bildung war, kam ein in der Signalkette weiter distal gelegener Schritt, z.B. ein Antagonismus im PCK1-Promotor gegen cAMP-stimulierte Transkriptionsfaktoren, die das Gen aktivieren, in Betracht. 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