{"id":{"repo_id":"freiburg-diss","oai_identifier":"oai:freidok.uni-freiburg.de:750"},"canonical_url":"https://search.dev.ndltd.org/etd/freiburg-diss/oai:freidok.uni-freiburg.de:750","repository":{"repo_id":"freiburg-diss","name":"University of Freiburg","base_url":"https://freidok.uni-freiburg.de/oai/oai2.php"},"display":{"title":"ApolipoproteinE-Sendai (Arg 145 ->Pro) : Expression, Reinigung und Charakterisierung einer Apolipoprotein E-Variante, die mit der Lipoprotein-Glomerulopathie assoziiert ist","abstract":"Varianten des Apolipoprotein E(ApoE)sind in Zusammenhang mit der Lipoprotein-Glomerulopathie aufgetreten, einer neuen Nierenerkrankung, bei der es zur Ablagerung von Lipoproteinen in glomerulären Kapillaren kommt. Ein Drittel der betroffenen Patienten sind heterozygot für ApoE-Sendai(Arg145->Pro). ApoE-Varianten können ebenfalls eine Hyperlipoproteinämie(HLP)Typ III hervorrufen. Die rezessive Form der Typ III HLP wird durch ApoE2(Arg158->Cys) hervorgerufen, einer Mutante mit verminderter Bindung an den Low-Density Lipoprotein(LDL)-Rezeptor aber mit fast normaler Heparinbindung. Die dominante Form der HLP Typ III hingegen wird durch Mutanten mit stark verminderter Heparinbindung aber erhaltener Bindung an den LDL-Rezeptor hervorgerufen. Ziel der vorliegenden Arbeit war es, ApoE-Sendai funktionell zu charakterisieren und anderen die HLP Typ III verursachenden ApoE-Varianten gegenüberzustellen. Zu diesem Zweck wurden ApoE2, ApoE3, ApoE1(Arg146->Glu), eine dominante Variante, und ApoE2-Sendai im Baculovirus-System exprimiert und über verschiedene chromatographische Verfahren gereinigt. Die Bindung an den LDL-Rezeptor wurde mittels der Komplexierung von rekombinantem ApoE an Phospholipid-Vesikel und an Very-Low Density Lipoproteine eines Patienten mit familiärem ApoE-Mangel untersucht. Verglichen mit ApoE3 zeigten ApoE2, ApoE1 und ApoE-Sendai eine LDL-Rezeptorbindung von weniger als 5 Die Heparinbindung betrug 53, 23 und 66 im Vergleich zu ApoE3. ApoE-Sendai ist somit die einzige bekannte Mutante innerhalb der Heparinbindungsdomäne des ApoE (Aminosäuren 142-147), welche eine verminderte Rezeptorbindung bei fast normaler Heparinbindung aufweist. Diese Eigenschaften des ApoE-Sendai könnten in Zusammenhang zur Lipoprotein-Glomerulopathie stehen.","abstract_html":"Varianten des Apolipoprotein E(ApoE)sind in Zusammenhang mit der Lipoprotein-Glomerulopathie aufgetreten, einer neuen Nierenerkrankung, bei der es zur Ablagerung von Lipoproteinen in glomerulären Kapillaren kommt. Ein Drittel der betroffenen Patienten sind heterozygot für ApoE-Sendai(Arg145->Pro). ApoE-Varianten können ebenfalls eine Hyperlipoproteinämie(HLP)Typ III hervorrufen. Die rezessive Form der Typ III HLP wird durch ApoE2(Arg158->Cys) hervorgerufen, einer Mutante mit verminderter Bindung an den Low-Density Lipoprotein(LDL)-Rezeptor aber mit fast normaler Heparinbindung. Die dominante Form der HLP Typ III hingegen wird durch Mutanten mit stark verminderter Heparinbindung aber erhaltener Bindung an den LDL-Rezeptor hervorgerufen. Ziel der vorliegenden Arbeit war es, ApoE-Sendai funktionell zu charakterisieren und anderen die HLP Typ III verursachenden ApoE-Varianten gegenüberzustellen. Zu diesem Zweck wurden ApoE2, ApoE3, ApoE1(Arg146->Glu), eine dominante Variante, und ApoE2-Sendai im Baculovirus-System exprimiert und über verschiedene chromatographische Verfahren gereinigt. Die Bindung an den LDL-Rezeptor wurde mittels der Komplexierung von rekombinantem ApoE an Phospholipid-Vesikel und an Very-Low Density Lipoproteine eines Patienten mit familiärem ApoE-Mangel untersucht. Verglichen mit ApoE3 zeigten ApoE2, ApoE1 und ApoE-Sendai eine LDL-Rezeptorbindung von weniger als 5 Die Heparinbindung betrug 53, 23 und 66 im Vergleich zu ApoE3. ApoE-Sendai ist somit die einzige bekannte Mutante innerhalb der Heparinbindungsdomäne des ApoE (Aminosäuren 142-147), welche eine verminderte Rezeptorbindung bei fast normaler Heparinbindung aufweist. Diese Eigenschaften des ApoE-Sendai könnten in Zusammenhang zur Lipoprotein-Glomerulopathie stehen.","abstract_has_math":false,"creators":["Panagiotou, Eleftheria"],"institution":null,"degree_name":null,"degree_level":null,"degree_discipline":null,"degree_department":null,"school":null,"contributors":["März, Winfried"],"advisors":[],"committee_chairs":[],"committee_members":[],"year":null,"date_issued":"","date_published":null,"updated_at":"2026-07-24T02:21:52Z","subjects":["Bindungsstudien","LDL-Rezeptor","apolipoprotein E","glomerulopathy","heterologous gene expression","purification procedures","LDL-receptor binding studies"],"languages":[],"rights":[],"rights_urls":[],"identifier_entries":[]},"links":{"outbound_url":"https://freidok.uni-freiburg.de/data/750","outbound_label":"Repository record","outbound_source":"source_url"},"metadata_groups":[{"id":"people","label":"People","entries":[{"key":"dc:contributor","label":"Contributor","values":["März, Winfried"]},{"key":"dc:creator","label":"Author","values":["Panagiotou, Eleftheria"]}]},{"id":"academic_context","label":"Academic Context","entries":[{"key":"dc:type","label":"Dc Type","values":["DoctoralThesis"]}]},{"id":"subjects_keywords","label":"Subjects and Keywords","entries":[{"key":"dc:subject","label":"Dc Subject","values":["Bindungsstudien","LDL-Rezeptor","apolipoprotein E","glomerulopathy","heterologous gene expression","purification procedures","LDL-receptor binding studies"]}]},{"id":"additional","label":"Additional Metadata","entries":[{"key":"dc:description.abstract","label":"Abstract","values":["Varianten des Apolipoprotein E(ApoE)sind in Zusammenhang mit der Lipoprotein-Glomerulopathie aufgetreten, einer neuen Nierenerkrankung, bei der es zur Ablagerung von Lipoproteinen in glomerulären Kapillaren kommt. Ein Drittel der betroffenen Patienten sind heterozygot für ApoE-Sendai(Arg145->Pro). ApoE-Varianten können ebenfalls eine Hyperlipoproteinämie(HLP)Typ III hervorrufen. Die rezessive Form der Typ III HLP wird durch ApoE2(Arg158->Cys) hervorgerufen, einer Mutante mit verminderter Bindung an den Low-Density Lipoprotein(LDL)-Rezeptor aber mit fast normaler Heparinbindung. Die dominante Form der HLP Typ III hingegen wird durch Mutanten mit stark verminderter Heparinbindung aber erhaltener Bindung an den LDL-Rezeptor hervorgerufen. Ziel der vorliegenden Arbeit war es, ApoE-Sendai funktionell zu charakterisieren und anderen die HLP Typ III verursachenden ApoE-Varianten gegenüberzustellen. Zu diesem Zweck wurden ApoE2, ApoE3, ApoE1(Arg146->Glu), eine dominante Variante, und ApoE2-Sendai im Baculovirus-System exprimiert und über verschiedene chromatographische Verfahren gereinigt. Die Bindung an den LDL-Rezeptor wurde mittels der Komplexierung von rekombinantem ApoE an Phospholipid-Vesikel und an Very-Low Density Lipoproteine eines Patienten mit familiärem ApoE-Mangel untersucht. Verglichen mit ApoE3 zeigten ApoE2, ApoE1 und ApoE-Sendai eine LDL-Rezeptorbindung von weniger als 5 Die Heparinbindung betrug 53, 23 und 66 im Vergleich zu ApoE3. ApoE-Sendai ist somit die einzige bekannte Mutante innerhalb der Heparinbindungsdomäne des ApoE (Aminosäuren 142-147), welche eine verminderte Rezeptorbindung bei fast normaler Heparinbindung aufweist. Diese Eigenschaften des ApoE-Sendai könnten in Zusammenhang zur Lipoprotein-Glomerulopathie stehen.","Variants of apolipoprotein E (apoE) have been linked to lipoprotein glomerulopathy, a new renal disease characterized by the deposition of lipoproteins in glomerular capillaries. One third of affected patients are heterozygous for apoE2-Sendai(Arg145->Pro). Variants of apoE can also produce type III hyperlipoproteinemia (HLP). Recessive type III HLP is caused by apoE2(Arg158->Cys), a mutant with diminished low-density lipoprotein (LDL) receptor binding but half normal heparin binding. Dominant type III HLP is caused by mutations that markedly alter heparin binding but modestly reduce receptor binding. This study examined whether apoE2-Sendai was functionally different from type III HLP-producing apoE variants by expressing apoE3, apoE2, apoE1 (Arg146->Glu), a dominant apoE variant, and apoE2-Sendai in the baculovirus system. Recombinant apoE was purified by different chromatographic procedures. LDL receptor binding was studied using recombinant apoE complexed to phospholipid vesicles and to very-low density lipoprotein from a patient with familiar apoE deficiency.Compared with apoE3, receptor-binding activities of apoE2, apoE1 and apoE2-Sendai all were less than 5 Heparin-binding activities were 53, 23 and 66 respectively of apoE3. ApoE2-Sendai represents the only known mutation within the heparin-binding domain of apoE(residues 142 through 147), revealing diminished receptor binding and almost normal heparin binding. These unique characteristics of apoE-Sendai may relate to the development of lipoprotein glomerulopathy."]},{"key":"dc:format.medium","label":"Dc Format Medium","values":["application/pdf"]},{"key":"dc:title","label":"Title","values":["ApolipoproteinE-Sendai (Arg 145 ->Pro) : Expression, Reinigung und Charakterisierung einer Apolipoprotein E-Variante, die mit der Lipoprotein-Glomerulopathie assoziiert ist","ApolipoproteinE-Sendai (Arg 145 ->Pro) : Expression, purification and characterization of an apolipoprotein E-variant associated with lipoprotein glomerulopathy"]}]}],"canonical_facts":{"dc:contributor":["März, Winfried"],"dc:creator":["Panagiotou, Eleftheria"],"dc:description.abstract":["Varianten des Apolipoprotein E(ApoE)sind in Zusammenhang mit der Lipoprotein-Glomerulopathie aufgetreten, einer neuen Nierenerkrankung, bei der es zur Ablagerung von Lipoproteinen in glomerulären Kapillaren kommt. Ein Drittel der betroffenen Patienten sind heterozygot für ApoE-Sendai(Arg145->Pro). ApoE-Varianten können ebenfalls eine Hyperlipoproteinämie(HLP)Typ III hervorrufen. Die rezessive Form der Typ III HLP wird durch ApoE2(Arg158->Cys) hervorgerufen, einer Mutante mit verminderter Bindung an den Low-Density Lipoprotein(LDL)-Rezeptor aber mit fast normaler Heparinbindung. Die dominante Form der HLP Typ III hingegen wird durch Mutanten mit stark verminderter Heparinbindung aber erhaltener Bindung an den LDL-Rezeptor hervorgerufen. Ziel der vorliegenden Arbeit war es, ApoE-Sendai funktionell zu charakterisieren und anderen die HLP Typ III verursachenden ApoE-Varianten gegenüberzustellen. Zu diesem Zweck wurden ApoE2, ApoE3, ApoE1(Arg146->Glu), eine dominante Variante, und ApoE2-Sendai im Baculovirus-System exprimiert und über verschiedene chromatographische Verfahren gereinigt. Die Bindung an den LDL-Rezeptor wurde mittels der Komplexierung von rekombinantem ApoE an Phospholipid-Vesikel und an Very-Low Density Lipoproteine eines Patienten mit familiärem ApoE-Mangel untersucht. Verglichen mit ApoE3 zeigten ApoE2, ApoE1 und ApoE-Sendai eine LDL-Rezeptorbindung von weniger als 5 Die Heparinbindung betrug 53, 23 und 66 im Vergleich zu ApoE3. ApoE-Sendai ist somit die einzige bekannte Mutante innerhalb der Heparinbindungsdomäne des ApoE (Aminosäuren 142-147), welche eine verminderte Rezeptorbindung bei fast normaler Heparinbindung aufweist. Diese Eigenschaften des ApoE-Sendai könnten in Zusammenhang zur Lipoprotein-Glomerulopathie stehen.","Variants of apolipoprotein E (apoE) have been linked to lipoprotein glomerulopathy, a new renal disease characterized by the deposition of lipoproteins in glomerular capillaries. One third of affected patients are heterozygous for apoE2-Sendai(Arg145->Pro). Variants of apoE can also produce type III hyperlipoproteinemia (HLP). Recessive type III HLP is caused by apoE2(Arg158->Cys), a mutant with diminished low-density lipoprotein (LDL) receptor binding but half normal heparin binding. Dominant type III HLP is caused by mutations that markedly alter heparin binding but modestly reduce receptor binding. This study examined whether apoE2-Sendai was functionally different from type III HLP-producing apoE variants by expressing apoE3, apoE2, apoE1 (Arg146->Glu), a dominant apoE variant, and apoE2-Sendai in the baculovirus system. Recombinant apoE was purified by different chromatographic procedures. LDL receptor binding was studied using recombinant apoE complexed to phospholipid vesicles and to very-low density lipoprotein from a patient with familiar apoE deficiency.Compared with apoE3, receptor-binding activities of apoE2, apoE1 and apoE2-Sendai all were less than 5 Heparin-binding activities were 53, 23 and 66 respectively of apoE3. ApoE2-Sendai represents the only known mutation within the heparin-binding domain of apoE(residues 142 through 147), revealing diminished receptor binding and almost normal heparin binding. These unique characteristics of apoE-Sendai may relate to the development of lipoprotein glomerulopathy."],"dc:format.medium":["application/pdf"],"dc:subject":["Bindungsstudien","LDL-Rezeptor","apolipoprotein E","glomerulopathy","heterologous gene expression","purification procedures","LDL-receptor binding studies"],"dc:title":["ApolipoproteinE-Sendai (Arg 145 ->Pro) : Expression, Reinigung und Charakterisierung einer Apolipoprotein E-Variante, die mit der Lipoprotein-Glomerulopathie assoziiert ist","ApolipoproteinE-Sendai (Arg 145 ->Pro) : Expression, purification and characterization of an apolipoprotein E-variant associated with lipoprotein glomerulopathy"],"dc:type":["DoctoralThesis"]},"updated_at":"2026-07-24T02:21:52Z"}