{"id":{"repo_id":"freiburg-diss","oai_identifier":"oai:freidok.uni-freiburg.de:509"},"canonical_url":"https://search.dev.ndltd.org/etd/freiburg-diss/oai:freidok.uni-freiburg.de:509","repository":{"repo_id":"freiburg-diss","name":"University of Freiburg","base_url":"https://freidok.uni-freiburg.de/oai/oai2.php"},"display":{"title":"Die Analyse von Knorpelregeneraten nach Autologer Chondrozytentransplantation : Morphologie von Zell- und Matrixmarkern in der Experimentellen Gelenkchirurgie","abstract":"Die Technik der Autologen Chondrozytentransplantation (ACT) könnte bald routinemäßig zur Behandlung von Gelenkknorpeldefekten eingesetzt werden. Die Regeneratqualität ist schwierig zu beurteilen. Bisher wurden zur Untersuchung des Verfahrens Kaninchen eingesetzt. Der Transfer von Ergebnissen aus Kleintierstudien scheint aufgrund von Unterschieden zwischen dem menschlichen und dem Kaninchenknorpel problematisch. <br>Eine hyaluronanreiche Matrix ist zudem ein Grunderforderniss für die metabolischen und mechanischen Eigenschaften des hyalinen Knorpels. <br>Im Rahmen der Weiterentwicklung eines Großtiermodells befaßt sich diese Arbeit mit der Morphologie von Zell- und Matrixmarkern. <br>Sechs Schafe (Alter 3-5a) wurden zwei Knieoperationen unterzogen: Zuerst wurde eine Knorpelbiopsie zur Chondrozytenisolierung und nachfolgender in vitro Zellvermehrung durchgeführt. Anschließend wurden drei artifizielle Knorpeldefekte auf dem medialen Femurkondylus gesetzt. Diese wurden entweder unbehandelt belassen oder mittels ACT oder nur mit einem Periostlappen behandelt. Nach 16 Wochen wurden Biopsien der Defektareale entnommen und für Immunfluoreszenz, konventionelle und Elektronenmikroskopie fixiert. Kontroll- und Regeneratknorpel wurden in Bezug auf HAS-Expression, Kollagen Typ I-, Typ II- und Proteoglykangehalt verglichen. <br>In gesundem Knorpel exprimierten 50 der Zellen HAS. Nach ACT sah man eine höhere Zelldichte und zudem 75 HAS-positive Zellen. Im Vergleich zu den Präparaten der unbehandelten bzw. der nur mit einem Periostlappen behandelten Defekte resultierte aus der ACT-Behandlung ein Regenerat von höher differenzierter Morphologie. <br>Das Schafsmodell scheint die Voraussetzungen für eine Weiterverwendung zur Evaluierung der ACT zu erfüllen. Die Ergebnisse legen nahe, daß hohe HAS-Expressionslevel für eine Synthese von bioartifiziellem Knorpel essentiell sind. Eine Einbeziehung dieses Markers in weitere Untersuchungen zur Reifung von Knorpelregeneraten erscheint sinnvoll.","abstract_html":"Die Technik der Autologen Chondrozytentransplantation (ACT) könnte bald routinemäßig zur Behandlung von Gelenkknorpeldefekten eingesetzt werden. 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Eine Einbeziehung dieses Markers in weitere Untersuchungen zur Reifung von Knorpelregeneraten erscheint sinnvoll.","Repair of full thickness joint cartilage defects is within reach of rountine clinical practice. The quality of regenerating hyaline cartilage, however, is difficult to assess. Synthesis of an extracellular matrix with high hyaluronan content is crucial for its metabolic and functional properties. We studied hyaluronan synthase (HAS) expression in knee joints of adult sheep as a novel cellular marker for chondrocyte function. <br>Six house-bred Merino sheep (age 3 to 5 years) underwent two stage surgery of their femoral condyles for autologous chondrocyte transplantation (ACT). First, cells were isolated from biopsies and expanded in vitro for two weeks using standard culture techniques. In a second session, three defects were made and either left untreated, covered with periosteal flap alone, or in combination with chondrocyte suspensions injected under the flaps. After 16 weeks, biopsies were taken from the operated knees at the defect sites and from the untreated condyle. Specimens were processed for safranin-O and electron microscopy, and for immunofluorescence using three different polyclonal anti-HAS antibodies recognizing one or all of the three known mammalian HAS. Control and regenerating tissues were compared regarding their morphology and the expression of HAS, in relation to collagens I and II (Col I; Col II), and adult cartilage proteoglycan (PG). <br>In comparison with untreated defects or with periosteal flap alone, ACT provided a neocartilage with better differentiated morphology. In healthy joint cartilage, about 50 of the chondrocytes expressed HAS, independent of antibody. Following ACT, a higher density of chondrocytes was observed, of which more than 75 expressed HAS, whereas the regenerates without ACT showed a lower density of HAS-expressing cells. We propose to use HAS immunofluorescence as an additional marker of matrix synthesis by chondrocytes and joint cartilage regeneration."]},{"key":"dc:format.medium","label":"Dc Format Medium","values":["application/pdf"]},{"key":"dc:title","label":"Title","values":["Die Analyse von Knorpelregeneraten nach Autologer Chondrozytentransplantation : Morphologie von Zell- und Matrixmarkern in der Experimentellen Gelenkchirurgie","Analysis of cartilage regenerates after autologous chondrocyte transplantation : morphology of cell- and matrixmarkers in experimental joint surgery"]}]}],"canonical_facts":{"dc:contributor":["Reichelt, Achim"],"dc:creator":["Mrosek, Eike Herbert"],"dc:description.abstract":["Die Technik der Autologen Chondrozytentransplantation (ACT) könnte bald routinemäßig zur Behandlung von Gelenkknorpeldefekten eingesetzt werden. Die Regeneratqualität ist schwierig zu beurteilen. Bisher wurden zur Untersuchung des Verfahrens Kaninchen eingesetzt. 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Kontroll- und Regeneratknorpel wurden in Bezug auf HAS-Expression, Kollagen Typ I-, Typ II- und Proteoglykangehalt verglichen. <br>In gesundem Knorpel exprimierten 50 der Zellen HAS. Nach ACT sah man eine höhere Zelldichte und zudem 75 HAS-positive Zellen. Im Vergleich zu den Präparaten der unbehandelten bzw. der nur mit einem Periostlappen behandelten Defekte resultierte aus der ACT-Behandlung ein Regenerat von höher differenzierter Morphologie. <br>Das Schafsmodell scheint die Voraussetzungen für eine Weiterverwendung zur Evaluierung der ACT zu erfüllen. Die Ergebnisse legen nahe, daß hohe HAS-Expressionslevel für eine Synthese von bioartifiziellem Knorpel essentiell sind. Eine Einbeziehung dieses Markers in weitere Untersuchungen zur Reifung von Knorpelregeneraten erscheint sinnvoll.","Repair of full thickness joint cartilage defects is within reach of rountine clinical practice. The quality of regenerating hyaline cartilage, however, is difficult to assess. Synthesis of an extracellular matrix with high hyaluronan content is crucial for its metabolic and functional properties. We studied hyaluronan synthase (HAS) expression in knee joints of adult sheep as a novel cellular marker for chondrocyte function. <br>Six house-bred Merino sheep (age 3 to 5 years) underwent two stage surgery of their femoral condyles for autologous chondrocyte transplantation (ACT). First, cells were isolated from biopsies and expanded in vitro for two weeks using standard culture techniques. In a second session, three defects were made and either left untreated, covered with periosteal flap alone, or in combination with chondrocyte suspensions injected under the flaps. After 16 weeks, biopsies were taken from the operated knees at the defect sites and from the untreated condyle. 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