Wnt-/beta- Catenin Zielgene der frühen Mausentwicklung

In der vorliegenden Arbeit wurden entwicklungsrelevante Zielgene der Wnt-/b- Catenin- Kaskade identifiziert. <br>Es wurde ein Zellkultursystem etabliert, mit dem es möglich war, unter einfachen experimentellen Bedingungen, die Wnt- Kaskade in Zellen induzieren zu können. Für das benutzte Zellkultursystem aus Embryonalen Stammzellen (ES- Zellen), und Wnt- exprimierenden Fibroblasten, konnte gezeigt werden, daß ES- Zellen in der Lage sind, das Wnt- Signal intrazellulär fortzuleiten und darauf mit Transkriptionsregulation zu reagieren. <br>Mit dem Co- Kultursystem ist es gelungen, die Wnt- abhängige Regulation des mesodermalen Gens brachyury zu zeigen. Mit biochemischen Methoden ist die direkte Interaktion des transkriptionellen Komplexes aus Lef-/ b- Catenin mit einem brachyury- Promoterfragment gezeigt und in Transaktivierungsexperimenten, die Relevanz von Tcf-/Lef- Bindungsstellen innerhalb des Promoters nachgewiesen worden. <br>Zur Identifizierung weiterer Wnt- regulierter Gene, wurde dasselbe Zellkultursystem der Co-Kultur von ES- Zellen mit Wnt- exprimierenden Fibroblasten genutzt. Es wurde eine Differenzielle Hybridisierung von nicht- induzierten ES- Zellen gegenüber Wnt- induzierten ES- Zellen durchgeführt. Hierdurch gelang es mehrere Gene zu finden, die verstärkt in Wnt- stimulierten ES- Zellen exprimiert sind. Durch Expressionsanalysen in Whole- mount in situ- Hybridisierungen sind für drei der Wnt- induzierten Gene spezifische Expressionsmuster in der Mausentwicklung von 7,5- 12,5dpc gezeigt worden.

Author dc:creator

• Arnold, Sebastian Johannes

Contributors dc:contributor

• Kemler, Rolf

• beta-Catenin
• In-situ Hybridisierung
• Promoterstudie
• Differenzielle Hybridisierung
• Mesoderminduktion

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