Analytik und präparative Trennungen liposomaler Systeme mit Zonen-Free-Flow Elektrophorese
Ziel dieser Arbeit war es, herauszufinden, inwieweit sich die Methode der Free-Flow Elektrophorese (FFE) dazu eignet, liposomale Systeme aufzutrennen. Zwischen einzelnen Liposomen findet ein Lipidaustausch statt, d.h. Lipide wechseln ihren Aufenthaltsort zwischen zwei benachbarten Liposomen. Die FFE ermöglicht auf sehr einfache Weise, die Kinetik des Lipidaustausches darzustellen. Erstmals konnte der Lipidaustausch ungelabelter Liposome gemessen werden. Auch der beschleunigte Austauschprozess durch das nicht spezifische Lipidtransferprotein (ns-LTP) wurde verfolgt. Mit Hilfe der FFE konnte nun erstmals auch der Lipidaustausch zwischen den Monolayern einer Membran, der Flip-Flop, detailliert untersucht werden. Mit der FFE hat man nun eine Möglichkeit der Präparation von unsymmetrischen Liposomen als Membranmodell. Weiterhin wurden Erythrozyten und mit Fluoreszenzfarbstoffen markierte Liposomen untersucht. Bis jetzt ist es nicht möglich, eine große Menge Liposomen mit unimodaler Größenverteilung zu produzieren. Deshalb wurde der Einfluss unterschiedlicher Liposomengrößen auf die elektrophoretische Mobilität untersucht. Dabei stellte sich heraus, dass sich auch neutrale Liposomen, die nur in ihrem Durchmesser variieren, elektrophoretisch auftrennen lassen. Zum ersten Mal ist es gelungen, Liposomen aus Neutrallipiden auf Grund ihrer Größe elektrophoretisch zu trennen. Die elektrophoretische Trennung ist abhängig von dem Medium, in dem die Liposomen hergestellt werden. Die Ionen des Mediums werden z.T. an die Liposomenoberfläche adsorbiert und bilden unterschiedliche Zetapotentiale aus. Die elektrophoretische Trennung beruht zusätzlich auf dem Relaxationseffekt, der durch die Bewegung der Teilchen im elektrischen Feld zustande kommt und zu einer Unsymmetrie der Ladungswolke um die Partikel führt.
Größentrennung, Erythrozytenghosts, Free-Flow Elektrophorese, free-flow electrophoresis, size separation
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