Beeinflußung der [³H]-Acetylcholin-Freisetzung im Rattenhippocampus und menschlichen Neokortex durch ß-Amyloid 1-28 und durch Hemmung der Cholinacetyltransferase
Im ersten Teil der vorliegenden Arbeit wurde im Superfusionsexperiment die Wirkung des aus 28 Aminosäuren bestehenden Amyloid-ß-Proteins (Aß1-28) auf die [³H]-Acetylcholin (ACh)-Freisetzung und [³H]-Cholin-Beladung im menschlichen Neokortex und Rattenhippocampus untersucht. Aß1-28 ist ein synthetisches Derivat des histopathologisch charakteristischen Aß-Proteins des M. Alzheimer, dessen klinische Symptomatik mit einer Störung der cholinergen Neurotransmission in Verbindung gebracht wird. Die Kalium (20 mM, 60 min)-evozierte [³H]-ACh-Freisetzung wurde in beiden Spezies durch Aß1-28 (0.1 nM) gehemmt. Die Verlängerung der Einwirkzeit des Aß1-28 verstärkte die Inhibition. Keine Zunahme der Hemmung bewirkte bei der Ratte die Variation des zur Präparation von Aß1-28 eingesetzten pH-Werts, mit der der Effekt des Aß1-28 in veränderter Sekundärstruktur untersucht wurde. In 0.1 nM Konzentration steigerte Aß1-28 bei der Ratte die [³H]-Cholin-Beladung, beim Menschen erst bei 1 nM. Die Verlängerung der Einwirkdauer führte lediglich im menschlichen Gewebe zu einer weiteren Zunahme der radioaktiven Beladung. Wiederum blieb die Variation des pH-Werts ohne zusätzlichen Effekt im Rattenhippocampus. Im zweiten Teil wurde die Aktivierung der Cholin-Acetyltransferase (ChAT) in menschlichem Neokortexgewebe durch Depolarisation untersucht. Im Superfusionsexperiment mit Gabe der ChAT-Inhibitoren Okadasäure (50 nM) und Bromo-ACh (30 µM) wurde die Aktivierung der ChAT mittels Kalium (20 mM, 4 min)-Depolarisation indirekt demonstriert, während bei elektrischer Stimulation (3 Hz, 90 Pulse a‘ 2 ms, 68 mA) die entsprechende Wirkung der Okadasäure ausblieb. Mittels ChAT-Assay wurde die Aktivierung der ChAT durch vierminütige Kalium-Depolarisation direkt nachgewiesen.
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