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Durch Untersuchung der Genstruktur der Antigenrezeptoren von PCNSL konnte herausgearbeitet werden, dass bevorzugt bestimmte Gene zur Kodierung der schweren Ketten verwendet werden. Hier ist vor allem das VH4-34-Gen häufig vertreten. Dieses wurde bisher hauptsächlich im Zusammenhang mit Autoimmunerkrankungen beschrieben. Zusätzlich ergaben die Untersuchungen der Sequenzen der Antigenrezeptoren ein hohes Maß an Mutationen. Die bevorzugte Verwendung von Genen zur Kodierung der Antigenrezeptoren sowie das Muster der Mutationen geben Hinweis darauf, dass die Erkennung bislang unidentifizierter Antigene eine Rolle in der Pathogenese von PCNSL spielt.
Ziel dieser Arbeit war in erster Linie, aus DNA primär zerebraler Lymphome chimäre Antigenrezeptoren zu gewinnen mit konstanten Regionen der Maus und variablen Regionen der humanen, variablen Regionen aus den Primär zerebralen Lymphomen.
In einem weiteren Schritt sollte die Bindung der Antigenrezeptoren an Kandidaten-Antigene untersucht werden.
Als Untersuchungsmaterial wurden die variablen Regionen der schweren und leichten Ketten der Antigenrezeptoren dreier Primär zerebraler Lymphome verwendet. Diese wurden zunächst in ein murines Expressionsplasmid kloniert, in E. coli exprimiert und schließlich mittels Metallaffinitätschromatographie aufgereinigt.
Diese so gewonnenen chimären Antigenrezeptoren wurden mittels ELISA und FACS weiter untersucht. Aufgrund der beschriebenen bevorzugten Verwendung von VH4-34 im Zusammenhang mit Autoimmunerkrankungen wurde eine Bindung an ds- oder ss-DNA sowie an B-Lymphozyten untersucht. Hierbei ergab sich lediglich in einem der Fälle eine schwache Bindung an B-Lymphozyten.
Die Bedeutung dieser Bindung ist unklar. Ein Zusammenhang mit der Lokalisation im ZNS ist eher unwahrscheinlich. Möglicherweise handelt es sich dabei um eine Kreuzreaktion.
Die Untersuchung einer größeren Fallzahl unter Einsatz moderner genomischer und proteomischer Verfahren auf der Basis der Fab-Expression in E. coli bietet sich zur Klärung der Antigenerkennung von PCNSL an.","abstract_html":"Primär zerebrale Lymphome (PCNSL) gewinnen als Untergruppe der Non-Hodgkin-Lymphome zunehmend an Bedeutung. Dies beruht einmal auf der zunehmenden Anzahl von durch AIDS immunsupprimierten Patienten, die ein vielfach erhöhtes Risiko haben, an einem PCNSL zu erkranken. Andererseits ist die Inzidenz auch bei immunkompetenten Personen steigend. Bei immunsupprimierten Patienten spielt eine Infektion mit dem Epstein-Barr-Virus (EBV) eine wichtige Rolle, während bei Immunkompetenten wohl andere, EBV-unabhängige Faktoren maßgeblich sind. <br>Durch Untersuchung der Genstruktur der Antigenrezeptoren von PCNSL konnte herausgearbeitet werden, dass bevorzugt bestimmte Gene zur Kodierung der schweren Ketten verwendet werden. Hier ist vor allem das VH4-34-Gen häufig vertreten. Dieses wurde bisher hauptsächlich im Zusammenhang mit Autoimmunerkrankungen beschrieben. Zusätzlich ergaben die Untersuchungen der Sequenzen der Antigenrezeptoren ein hohes Maß an Mutationen. Die bevorzugte Verwendung von Genen zur Kodierung der Antigenrezeptoren sowie das Muster der Mutationen geben Hinweis darauf, dass die Erkennung bislang unidentifizierter Antigene eine Rolle in der Pathogenese von PCNSL spielt. <br>Ziel dieser Arbeit war in erster Linie, aus DNA primär zerebraler Lymphome chimäre Antigenrezeptoren zu gewinnen mit konstanten Regionen der Maus und variablen Regionen der humanen, variablen Regionen aus den Primär zerebralen Lymphomen. <br>In einem weiteren Schritt sollte die Bindung der Antigenrezeptoren an Kandidaten-Antigene untersucht werden. <br>Als Untersuchungsmaterial wurden die variablen Regionen der schweren und leichten Ketten der Antigenrezeptoren dreier Primär zerebraler Lymphome verwendet. Diese wurden zunächst in ein murines Expressionsplasmid kloniert, in E. coli exprimiert und schließlich mittels Metallaffinitätschromatographie aufgereinigt. <br>Diese so gewonnenen chimären Antigenrezeptoren wurden mittels ELISA und FACS weiter untersucht. Aufgrund der beschriebenen bevorzugten Verwendung von VH4-34 im Zusammenhang mit Autoimmunerkrankungen wurde eine Bindung an ds- oder ss-DNA sowie an B-Lymphozyten untersucht. Hierbei ergab sich lediglich in einem der Fälle eine schwache Bindung an B-Lymphozyten. <br>Die Bedeutung dieser Bindung ist unklar. Ein Zusammenhang mit der Lokalisation im ZNS ist eher unwahrscheinlich. Möglicherweise handelt es sich dabei um eine Kreuzreaktion. <br>Die Untersuchung einer größeren Fallzahl unter Einsatz moderner genomischer und proteomischer Verfahren auf der Basis der Fab-Expression in E. coli bietet sich zur Klärung der Antigenerkennung von PCNSL an.","abstract_has_math":false,"creators":["Gebele, Verena"],"institution":null,"degree_name":null,"degree_level":null,"degree_discipline":null,"degree_department":null,"school":null,"contributors":["Veelken, Hendrik"],"advisors":[],"committee_chairs":[],"committee_members":[],"year":null,"date_issued":"","date_published":null,"updated_at":"2026-07-24T02:22:46Z","subjects":["Antigenrezeptor","Antigenspezifität","VH4-34-Gen","Primary central nervous system lymphomas","VH4-34 gene"],"languages":[],"rights":[],"rights_urls":[],"identifier_entries":[]},"links":{"outbound_url":"https://freidok.uni-freiburg.de/data/2465","outbound_label":"Repository record","outbound_source":"source_url"},"metadata_groups":[{"id":"people","label":"People","entries":[{"key":"dc:contributor","label":"Contributor","values":["Veelken, Hendrik"]},{"key":"dc:creator","label":"Author","values":["Gebele, Verena"]}]},{"id":"academic_context","label":"Academic Context","entries":[{"key":"dc:type","label":"Dc Type","values":["DoctoralThesis"]}]},{"id":"subjects_keywords","label":"Subjects and Keywords","entries":[{"key":"dc:subject","label":"Dc Subject","values":["Antigenrezeptor","Antigenspezifität","VH4-34-Gen","Primary central nervous system lymphomas","VH4-34 gene"]}]},{"id":"additional","label":"Additional Metadata","entries":[{"key":"dc:description.abstract","label":"Abstract","values":["Primär zerebrale Lymphome (PCNSL) gewinnen als Untergruppe der Non-Hodgkin-Lymphome zunehmend an Bedeutung. Dies beruht einmal auf der zunehmenden Anzahl von durch AIDS immunsupprimierten Patienten, die ein vielfach erhöhtes Risiko haben, an einem PCNSL zu erkranken. Andererseits ist die Inzidenz auch bei immunkompetenten Personen steigend. Bei immunsupprimierten Patienten spielt eine Infektion mit dem Epstein-Barr-Virus (EBV) eine wichtige Rolle, während bei Immunkompetenten wohl andere, EBV-unabhängige Faktoren maßgeblich sind.
Durch Untersuchung der Genstruktur der Antigenrezeptoren von PCNSL konnte herausgearbeitet werden, dass bevorzugt bestimmte Gene zur Kodierung der schweren Ketten verwendet werden. Hier ist vor allem das VH4-34-Gen häufig vertreten. Dieses wurde bisher hauptsächlich im Zusammenhang mit Autoimmunerkrankungen beschrieben. Zusätzlich ergaben die Untersuchungen der Sequenzen der Antigenrezeptoren ein hohes Maß an Mutationen. Die bevorzugte Verwendung von Genen zur Kodierung der Antigenrezeptoren sowie das Muster der Mutationen geben Hinweis darauf, dass die Erkennung bislang unidentifizierter Antigene eine Rolle in der Pathogenese von PCNSL spielt.
Ziel dieser Arbeit war in erster Linie, aus DNA primär zerebraler Lymphome chimäre Antigenrezeptoren zu gewinnen mit konstanten Regionen der Maus und variablen Regionen der humanen, variablen Regionen aus den Primär zerebralen Lymphomen.
In einem weiteren Schritt sollte die Bindung der Antigenrezeptoren an Kandidaten-Antigene untersucht werden.
Als Untersuchungsmaterial wurden die variablen Regionen der schweren und leichten Ketten der Antigenrezeptoren dreier Primär zerebraler Lymphome verwendet. Diese wurden zunächst in ein murines Expressionsplasmid kloniert, in E. coli exprimiert und schließlich mittels Metallaffinitätschromatographie aufgereinigt.
Diese so gewonnenen chimären Antigenrezeptoren wurden mittels ELISA und FACS weiter untersucht. Aufgrund der beschriebenen bevorzugten Verwendung von VH4-34 im Zusammenhang mit Autoimmunerkrankungen wurde eine Bindung an ds- oder ss-DNA sowie an B-Lymphozyten untersucht. Hierbei ergab sich lediglich in einem der Fälle eine schwache Bindung an B-Lymphozyten.
Die Bedeutung dieser Bindung ist unklar. Ein Zusammenhang mit der Lokalisation im ZNS ist eher unwahrscheinlich. Möglicherweise handelt es sich dabei um eine Kreuzreaktion.
Die Untersuchung einer größeren Fallzahl unter Einsatz moderner genomischer und proteomischer Verfahren auf der Basis der Fab-Expression in E. coli bietet sich zur Klärung der Antigenerkennung von PCNSL an.","As a subgroup of non-Hodgkin´s lymphoma primary central nervous system lymphomas (PCNSL) are getting more and more important. On one side, this is because of the increasing incidence of immunocomprised patients caused by AIDS. On the other side, the incidence in immunocompetent people is also rising. In the group of immunocomprised patients an infection with the Epstein-Barr virus (EBV) plays an important role while in immunocompetent patients different EBV-independent factors are decisive.
Examination of the gene structure of antigen receptors of PCNSL showed that there is a preferential usage of certain genes to encode the heavy chains. Especially the VH4-34-gene is often represented. This gene has so far mainly been described in context with autoimmune disease.
In addition, the examination of the sequences of the antigen receptors showed a high frequency of mutations. The preferential usage of genes encoding the antigen receptors and the pattern of mutations point out that the identification of so far unidentified antigens play a substantial role in pathogenesis of PCNSL.
The aim of this work was in first line to get chimeric antigen receptors of DNA of primary central nervous system lymphoma with constant regions of mice and variable regions of the human, variable regions of the PCNSL.
In another step the binding of the antigen receptors has been examined at candidate antigens.
The variable regions of the heavy and light chains of antigen receptors of three PCNSL were used as examination material. They were first cloned in a murine expression plasmid, then expressed in E. coli, and finally cleaned up with metal affinity chromatography.
These chimeric antigen receptors were examined with ELISA and FACS. Because of the preferential usage of VH4-34 in context with autoimmune diseases a binding with ds- or ss-DNA was tested. However, only in one case a weak binding at B-lymphocytes could be showed. The importance of this binding is not clear yet. A connection with the localisation in the CNS is improbable. It is possible that this binding results of a cross-reaction.
The examination of a larger group with modern genomic and proteomic methods on basic of Fab expression in E. coli might be useful to further investigate the antigen recognition of PCNSL."]},{"key":"dc:format.medium","label":"Dc Format Medium","values":["application/pdf"]},{"key":"dc:title","label":"Title","values":["Expression von chimären Fab-Fragmenten von Antigenrezeptoren primär zerebraler Lymphome und Untersuchung der Antigenspezifität","Expression of chimeric Fab-fragments of antigen receptors of primary central nervous system lymphomas and examination of antigen specifity"]}]}],"canonical_facts":{"dc:contributor":["Veelken, Hendrik"],"dc:creator":["Gebele, Verena"],"dc:description.abstract":["Primär zerebrale Lymphome (PCNSL) gewinnen als Untergruppe der Non-Hodgkin-Lymphome zunehmend an Bedeutung. Dies beruht einmal auf der zunehmenden Anzahl von durch AIDS immunsupprimierten Patienten, die ein vielfach erhöhtes Risiko haben, an einem PCNSL zu erkranken. Andererseits ist die Inzidenz auch bei immunkompetenten Personen steigend. Bei immunsupprimierten Patienten spielt eine Infektion mit dem Epstein-Barr-Virus (EBV) eine wichtige Rolle, während bei Immunkompetenten wohl andere, EBV-unabhängige Faktoren maßgeblich sind.
Durch Untersuchung der Genstruktur der Antigenrezeptoren von PCNSL konnte herausgearbeitet werden, dass bevorzugt bestimmte Gene zur Kodierung der schweren Ketten verwendet werden. Hier ist vor allem das VH4-34-Gen häufig vertreten. Dieses wurde bisher hauptsächlich im Zusammenhang mit Autoimmunerkrankungen beschrieben. Zusätzlich ergaben die Untersuchungen der Sequenzen der Antigenrezeptoren ein hohes Maß an Mutationen. Die bevorzugte Verwendung von Genen zur Kodierung der Antigenrezeptoren sowie das Muster der Mutationen geben Hinweis darauf, dass die Erkennung bislang unidentifizierter Antigene eine Rolle in der Pathogenese von PCNSL spielt.
Ziel dieser Arbeit war in erster Linie, aus DNA primär zerebraler Lymphome chimäre Antigenrezeptoren zu gewinnen mit konstanten Regionen der Maus und variablen Regionen der humanen, variablen Regionen aus den Primär zerebralen Lymphomen.
In einem weiteren Schritt sollte die Bindung der Antigenrezeptoren an Kandidaten-Antigene untersucht werden.
Als Untersuchungsmaterial wurden die variablen Regionen der schweren und leichten Ketten der Antigenrezeptoren dreier Primär zerebraler Lymphome verwendet. Diese wurden zunächst in ein murines Expressionsplasmid kloniert, in E. coli exprimiert und schließlich mittels Metallaffinitätschromatographie aufgereinigt.
Diese so gewonnenen chimären Antigenrezeptoren wurden mittels ELISA und FACS weiter untersucht. Aufgrund der beschriebenen bevorzugten Verwendung von VH4-34 im Zusammenhang mit Autoimmunerkrankungen wurde eine Bindung an ds- oder ss-DNA sowie an B-Lymphozyten untersucht. Hierbei ergab sich lediglich in einem der Fälle eine schwache Bindung an B-Lymphozyten.
Die Bedeutung dieser Bindung ist unklar. Ein Zusammenhang mit der Lokalisation im ZNS ist eher unwahrscheinlich. Möglicherweise handelt es sich dabei um eine Kreuzreaktion.
Die Untersuchung einer größeren Fallzahl unter Einsatz moderner genomischer und proteomischer Verfahren auf der Basis der Fab-Expression in E. coli bietet sich zur Klärung der Antigenerkennung von PCNSL an.","As a subgroup of non-Hodgkin´s lymphoma primary central nervous system lymphomas (PCNSL) are getting more and more important. On one side, this is because of the increasing incidence of immunocomprised patients caused by AIDS. On the other side, the incidence in immunocompetent people is also rising. In the group of immunocomprised patients an infection with the Epstein-Barr virus (EBV) plays an important role while in immunocompetent patients different EBV-independent factors are decisive.
Examination of the gene structure of antigen receptors of PCNSL showed that there is a preferential usage of certain genes to encode the heavy chains. Especially the VH4-34-gene is often represented. This gene has so far mainly been described in context with autoimmune disease.
In addition, the examination of the sequences of the antigen receptors showed a high frequency of mutations. The preferential usage of genes encoding the antigen receptors and the pattern of mutations point out that the identification of so far unidentified antigens play a substantial role in pathogenesis of PCNSL.
The aim of this work was in first line to get chimeric antigen receptors of DNA of primary central nervous system lymphoma with constant regions of mice and variable regions of the human, variable regions of the PCNSL.
In another step the binding of the antigen receptors has been examined at candidate antigens.
The variable regions of the heavy and light chains of antigen receptors of three PCNSL were used as examination material. They were first cloned in a murine expression plasmid, then expressed in E. coli, and finally cleaned up with metal affinity chromatography.
These chimeric antigen receptors were examined with ELISA and FACS. Because of the preferential usage of VH4-34 in context with autoimmune diseases a binding with ds- or ss-DNA was tested. However, only in one case a weak binding at B-lymphocytes could be showed. The importance of this binding is not clear yet. A connection with the localisation in the CNS is improbable. It is possible that this binding results of a cross-reaction.
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