{"id":{"repo_id":"freiburg-diss","oai_identifier":"oai:freidok.uni-freiburg.de:2161"},"canonical_url":"https://search.dev.ndltd.org/etd/freiburg-diss/oai:freidok.uni-freiburg.de:2161","repository":{"repo_id":"freiburg-diss","name":"University of Freiburg","base_url":"https://freidok.uni-freiburg.de/oai/oai2.php"},"display":{"title":"Differenzielle transkriptionelle Regulation der humanen Telomerase in einem zellulären Karzinogenese-Modell am Beispiel des Plattenepithelkarzinoms des Ösophagus","abstract":"Normale humane Zellen haben eine limitierte replikative Lebenszeit bevor sie
in Seneszenz gehen. Die Verkürzung der Telomere ist ein wichtiger Faktor in
diesem Prozess. Die Mehrzahl humaner Tumorzellen, unter anderem die des
Plattenepithelkarzinoms des Ösophagus, erhalten ihre Telomere durch die
Aktivierung des Enzyms Telomerase (hTERT). Bisher ist relativ wenig über die
Regulation der Telomerase während des Prozesses der malignen Transformation
bekannt. Aus diesem Grund haben wir die transkriptionelle Regulation der
Telomerase im Prozeß der malignen Transformation von normalen ösophagealer
Plattenepithelzellen zu Ösophaguskarzinomzellen untersucht. Normale humane
Ösophagusepithelzellen (EPC), in denen jeweils Cyclin D1 (EPC-D1), dominant
negatives p53 (EPC-Dp53) oder hTERT (EPC-hTERT) retroviral überexprimiert
war sowie die Tumorzelllinie TE-12 wurden als fünfstufiges Modell der
malignen Transformation verwendet. Die hTERT Genexpression (RT-PCR,
qRT-PCR), die Proliferation der Zellen, die Telomeraseaktivität (TRAP) und
Telomerlänge (TRF) in diesen Zelltypen wurden bestimmt. Der komplette (1242
bp) hTERT-Promotor und elf, mittels PCR hergestellte Deletionskonstrukte
wurden transient in die Zellen transfiziert. Die Transfektionsergebnisse
wurden mit TRAP, TRF und dem Methylierungsstatus (MSP) des hTERT-Promotors
korreliert. Zusätzlich wurde die Bindung von verschiedenen
Transkriptionsfaktoren (EMSA) an den hTERT-Promotor untersucht und mit der
Protein-Expression korreliert. In dem hier vorgestellen Modell der
ösophagealen Karzinogenese konnten wir zeigen, dass die Transkription und
Aktivität der humanen Telomerase in den genetisch alterierten Zellen
unterschiedlich reguliert wurde. Die Regulation ist dabei jeweils von den
eingefügten genetischen Veränderungen (Dp53, Cyclin D1, hTERT) abhängig. In
EPC, wie auch in den sterblichen EPC-Dp53, war die Telomerase hauptsächlich
durch Sp1 reguliert. Die hTERT-Expression und -Aktivität in den immortalen
EPC-hTERT und EPC-D1 war durch c-myc und Sp1 sowie E2F-1 reguliert. Die
Telomerase der Tumorzellen TE-12 war durch c-myc, eventuell in Kooperation
mit Sp1, reguliert. Zusätzlich spielte der Methylierungsstatus des
hTERT-Promotors vor allem in den immortalen Zellen eine Rolle bei der
Regulation der humanen Telomerase.","abstract_html":"Normale humane Zellen haben eine limitierte replikative Lebenszeit bevor sie <br>in Seneszenz gehen. Die Verkürzung der Telomere ist ein wichtiger Faktor in <br>diesem Prozess. Die Mehrzahl humaner Tumorzellen, unter anderem die des <br>Plattenepithelkarzinoms des Ösophagus, erhalten ihre Telomere durch die <br>Aktivierung des Enzyms Telomerase (hTERT). Bisher ist relativ wenig über die <br>Regulation der Telomerase während des Prozesses der malignen Transformation <br>bekannt. Aus diesem Grund haben wir die transkriptionelle Regulation der <br>Telomerase im Prozeß der malignen Transformation von normalen ösophagealer <br>Plattenepithelzellen zu Ösophaguskarzinomzellen untersucht. Normale humane <br>Ösophagusepithelzellen (EPC), in denen jeweils Cyclin D1 (EPC-D1), dominant <br>negatives p53 (EPC-Dp53) oder hTERT (EPC-hTERT) retroviral überexprimiert <br>war sowie die Tumorzelllinie TE-12 wurden als fünfstufiges Modell der <br>malignen Transformation verwendet. Die hTERT Genexpression (RT-PCR, <br>qRT-PCR), die Proliferation der Zellen, die Telomeraseaktivität (TRAP) und <br>Telomerlänge (TRF) in diesen Zelltypen wurden bestimmt. Der komplette (1242 <br>bp) hTERT-Promotor und elf, mittels PCR hergestellte Deletionskonstrukte <br>wurden transient in die Zellen transfiziert. Die Transfektionsergebnisse <br>wurden mit TRAP, TRF und dem Methylierungsstatus (MSP) des hTERT-Promotors <br>korreliert. Zusätzlich wurde die Bindung von verschiedenen <br>Transkriptionsfaktoren (EMSA) an den hTERT-Promotor untersucht und mit der <br>Protein-Expression korreliert. In dem hier vorgestellen Modell der <br>ösophagealen Karzinogenese konnten wir zeigen, dass die Transkription und <br>Aktivität der humanen Telomerase in den genetisch alterierten Zellen <br>unterschiedlich reguliert wurde. Die Regulation ist dabei jeweils von den <br>eingefügten genetischen Veränderungen (Dp53, Cyclin D1, hTERT) abhängig. In <br>EPC, wie auch in den sterblichen EPC-Dp53, war die Telomerase hauptsächlich <br>durch Sp1 reguliert. Die hTERT-Expression und -Aktivität in den immortalen <br>EPC-hTERT und EPC-D1 war durch c-myc und Sp1 sowie E2F-1 reguliert. Die <br>Telomerase der Tumorzellen TE-12 war durch c-myc, eventuell in Kooperation <br>mit Sp1, reguliert. Zusätzlich spielte der Methylierungsstatus des <br>hTERT-Promotors vor allem in den immortalen Zellen eine Rolle bei der <br>Regulation der humanen Telomerase.","abstract_has_math":false,"creators":["Quante, Michael"],"institution":null,"degree_name":null,"degree_level":null,"degree_discipline":null,"degree_department":null,"school":null,"contributors":["Blum, Hubert Erich Christoph"],"advisors":[],"committee_chairs":[],"committee_members":[],"year":null,"date_issued":"","date_published":null,"updated_at":"2026-07-24T02:22:40Z","subjects":["Telomerase","EMSA","Transcriptional regulation","telomere","carcinogenesis"],"languages":[],"rights":[],"rights_urls":[],"identifier_entries":[]},"links":{"outbound_url":"https://freidok.uni-freiburg.de/data/2161","outbound_label":"Repository record","outbound_source":"source_url"},"metadata_groups":[{"id":"people","label":"People","entries":[{"key":"dc:contributor","label":"Contributor","values":["Blum, Hubert Erich Christoph"]},{"key":"dc:creator","label":"Author","values":["Quante, Michael"]}]},{"id":"academic_context","label":"Academic Context","entries":[{"key":"dc:type","label":"Dc Type","values":["DoctoralThesis"]}]},{"id":"subjects_keywords","label":"Subjects and Keywords","entries":[{"key":"dc:subject","label":"Dc Subject","values":["Telomerase","EMSA","Transcriptional regulation","telomere","carcinogenesis"]}]},{"id":"additional","label":"Additional Metadata","entries":[{"key":"dc:description.abstract","label":"Abstract","values":["Normale humane Zellen haben eine limitierte replikative Lebenszeit bevor sie
in Seneszenz gehen. Die Verkürzung der Telomere ist ein wichtiger Faktor in
diesem Prozess. Die Mehrzahl humaner Tumorzellen, unter anderem die des
Plattenepithelkarzinoms des Ösophagus, erhalten ihre Telomere durch die
Aktivierung des Enzyms Telomerase (hTERT). Bisher ist relativ wenig über die
Regulation der Telomerase während des Prozesses der malignen Transformation
bekannt. Aus diesem Grund haben wir die transkriptionelle Regulation der
Telomerase im Prozeß der malignen Transformation von normalen ösophagealer
Plattenepithelzellen zu Ösophaguskarzinomzellen untersucht. Normale humane
Ösophagusepithelzellen (EPC), in denen jeweils Cyclin D1 (EPC-D1), dominant
negatives p53 (EPC-Dp53) oder hTERT (EPC-hTERT) retroviral überexprimiert
war sowie die Tumorzelllinie TE-12 wurden als fünfstufiges Modell der
malignen Transformation verwendet. Die hTERT Genexpression (RT-PCR,
qRT-PCR), die Proliferation der Zellen, die Telomeraseaktivität (TRAP) und
Telomerlänge (TRF) in diesen Zelltypen wurden bestimmt. Der komplette (1242
bp) hTERT-Promotor und elf, mittels PCR hergestellte Deletionskonstrukte
wurden transient in die Zellen transfiziert. Die Transfektionsergebnisse
wurden mit TRAP, TRF und dem Methylierungsstatus (MSP) des hTERT-Promotors
korreliert. Zusätzlich wurde die Bindung von verschiedenen
Transkriptionsfaktoren (EMSA) an den hTERT-Promotor untersucht und mit der
Protein-Expression korreliert. In dem hier vorgestellen Modell der
ösophagealen Karzinogenese konnten wir zeigen, dass die Transkription und
Aktivität der humanen Telomerase in den genetisch alterierten Zellen
unterschiedlich reguliert wurde. Die Regulation ist dabei jeweils von den
eingefügten genetischen Veränderungen (Dp53, Cyclin D1, hTERT) abhängig. In
EPC, wie auch in den sterblichen EPC-Dp53, war die Telomerase hauptsächlich
durch Sp1 reguliert. Die hTERT-Expression und -Aktivität in den immortalen
EPC-hTERT und EPC-D1 war durch c-myc und Sp1 sowie E2F-1 reguliert. Die
Telomerase der Tumorzellen TE-12 war durch c-myc, eventuell in Kooperation
mit Sp1, reguliert. Zusätzlich spielte der Methylierungsstatus des
hTERT-Promotors vor allem in den immortalen Zellen eine Rolle bei der
Regulation der humanen Telomerase.","Telomerase activity is observed in 90% of human cancer including esophageal
squamous cell cancer. Normal somatic cells do not display telomerase
activity on a regular basis. The major mechanism to regulate telomerase
activity in human cells is the transcriptional control of the catalytic
subunit, the human reverse transcriptase gene hTERT. However, the manner in
which telomerase activity is regulated during malignant transformation and
whether this regulation is influenced by single genetic alterations
important in this process are not well understood. In this study we
investigated the transcriptional regulation and activity of human telomerase
in a cellular model representing important known genetic alterations
observed in esophageal cancer. We characterized the respective cells with
regard to their telomere biology and telomerase expression, transcriptional
regulation using promoter- as well as electrophoretic mobility shift
assay-analyses and their promoter methylation status. We could demonstrate
that telomerase expression and subsequent activity are differentially
regulated in the progression from normal esophageal epithelial cells to
genetically defined esophageal cells harboring a specific genetic alteration
frequently found in esophageal cancer and compared those changes with
esophageal cancer cells. Whereas primary esophageal cells are mainly
regulated by Sp1, in cells harbouring a genetic alteration as cyclin D1
overexpression other transcription factors like E2F and c-myc as well as
promoter methylation influence hTERT transcription. This model demonstrates
that the transcriptional regulation of telomerase is influenced by a given
genetic alteration important in esophageal cancer, and therefore provides
new insight in telomerase regulation during carcinogenesis. most
importantly, the human telomerase reverse transcriptase (hTERT).
Introduction of the hTERT gene in normal cells is sufficient to immortalize
most cells and to bypass senescence through the induction of telomerase
activity."]},{"key":"dc:format.medium","label":"Dc Format Medium","values":["application/pdf"]},{"key":"dc:title","label":"Title","values":["Differenzielle transkriptionelle Regulation der humanen Telomerase in einem zellulären Karzinogenese-Modell am Beispiel des Plattenepithelkarzinoms des Ösophagus","Differential transcriptional regulation of human telomerase in a cellular model representing important genetic alterations in esophageal squamous carcinogenesis"]}]}],"canonical_facts":{"dc:contributor":["Blum, Hubert Erich Christoph"],"dc:creator":["Quante, Michael"],"dc:description.abstract":["Normale humane Zellen haben eine limitierte replikative Lebenszeit bevor sie
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diesem Prozess. Die Mehrzahl humaner Tumorzellen, unter anderem die des
Plattenepithelkarzinoms des Ösophagus, erhalten ihre Telomere durch die
Aktivierung des Enzyms Telomerase (hTERT). Bisher ist relativ wenig über die
Regulation der Telomerase während des Prozesses der malignen Transformation
bekannt. Aus diesem Grund haben wir die transkriptionelle Regulation der
Telomerase im Prozeß der malignen Transformation von normalen ösophagealer
Plattenepithelzellen zu Ösophaguskarzinomzellen untersucht. Normale humane
Ösophagusepithelzellen (EPC), in denen jeweils Cyclin D1 (EPC-D1), dominant
negatives p53 (EPC-Dp53) oder hTERT (EPC-hTERT) retroviral überexprimiert
war sowie die Tumorzelllinie TE-12 wurden als fünfstufiges Modell der
malignen Transformation verwendet. Die hTERT Genexpression (RT-PCR,
qRT-PCR), die Proliferation der Zellen, die Telomeraseaktivität (TRAP) und
Telomerlänge (TRF) in diesen Zelltypen wurden bestimmt. Der komplette (1242
bp) hTERT-Promotor und elf, mittels PCR hergestellte Deletionskonstrukte
wurden transient in die Zellen transfiziert. Die Transfektionsergebnisse
wurden mit TRAP, TRF und dem Methylierungsstatus (MSP) des hTERT-Promotors
korreliert. Zusätzlich wurde die Bindung von verschiedenen
Transkriptionsfaktoren (EMSA) an den hTERT-Promotor untersucht und mit der
Protein-Expression korreliert. In dem hier vorgestellen Modell der
ösophagealen Karzinogenese konnten wir zeigen, dass die Transkription und
Aktivität der humanen Telomerase in den genetisch alterierten Zellen
unterschiedlich reguliert wurde. Die Regulation ist dabei jeweils von den
eingefügten genetischen Veränderungen (Dp53, Cyclin D1, hTERT) abhängig. In
EPC, wie auch in den sterblichen EPC-Dp53, war die Telomerase hauptsächlich
durch Sp1 reguliert. Die hTERT-Expression und -Aktivität in den immortalen
EPC-hTERT und EPC-D1 war durch c-myc und Sp1 sowie E2F-1 reguliert. Die
Telomerase der Tumorzellen TE-12 war durch c-myc, eventuell in Kooperation
mit Sp1, reguliert. Zusätzlich spielte der Methylierungsstatus des
hTERT-Promotors vor allem in den immortalen Zellen eine Rolle bei der
Regulation der humanen Telomerase.","Telomerase activity is observed in 90% of human cancer including esophageal
squamous cell cancer. Normal somatic cells do not display telomerase
activity on a regular basis. The major mechanism to regulate telomerase
activity in human cells is the transcriptional control of the catalytic
subunit, the human reverse transcriptase gene hTERT. However, the manner in
which telomerase activity is regulated during malignant transformation and
whether this regulation is influenced by single genetic alterations
important in this process are not well understood. In this study we
investigated the transcriptional regulation and activity of human telomerase
in a cellular model representing important known genetic alterations
observed in esophageal cancer. We characterized the respective cells with
regard to their telomere biology and telomerase expression, transcriptional
regulation using promoter- as well as electrophoretic mobility shift
assay-analyses and their promoter methylation status. We could demonstrate
that telomerase expression and subsequent activity are differentially
regulated in the progression from normal esophageal epithelial cells to
genetically defined esophageal cells harboring a specific genetic alteration
frequently found in esophageal cancer and compared those changes with
esophageal cancer cells. Whereas primary esophageal cells are mainly
regulated by Sp1, in cells harbouring a genetic alteration as cyclin D1
overexpression other transcription factors like E2F and c-myc as well as
promoter methylation influence hTERT transcription. This model demonstrates
that the transcriptional regulation of telomerase is influenced by a given
genetic alteration important in esophageal cancer, and therefore provides
new insight in telomerase regulation during carcinogenesis. most
importantly, the human telomerase reverse transcriptase (hTERT).
Introduction of the hTERT gene in normal cells is sufficient to immortalize
most cells and to bypass senescence through the induction of telomerase
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