{"id":{"repo_id":"freiburg-diss","oai_identifier":"oai:freidok.uni-freiburg.de:2159"},"canonical_url":"https://search.dev.ndltd.org/etd/freiburg-diss/oai:freidok.uni-freiburg.de:2159","repository":{"repo_id":"freiburg-diss","name":"University of Freiburg","base_url":"https://freidok.uni-freiburg.de/oai/oai2.php"},"display":{"title":"Immunogenität translozierter Effektorproteine bei Infektionen mit Bartonella henselae","abstract":"Bartonella henselae, ein gramnegatives Stäbchenbakterium, ist weltweit verbreitet und bekannt als der Erreger der Katzenkratzkrankheit, einer häufigen Differentialdiagnose einer Lymphadenopathie. Vor allem bei Immunsuppimierten kann Bartonella henselae auch die Bazilläre Angiomatose, die Peliosis Hepatis oder eine Endokarditis hervorrufen. Als diagnostische Verfahren werden Immunfluoreszenztest (IFT), Polymerasenkettenreaktion (PCR) und die Histopathologie eingesetzt. Bisherige Versuche, einen sensitiven und spezifischen Western Blot zur Diagnostik einer B. henselae-Infektion aufzubauen, scheiterten an der mangelnden Immundominanz der eingesetzten Antigene. In der vorliegenden Arbeit wurden acht rekombinante Proteine von B. henselae auf ihre Immundominanz im Western Blot getestet. Sieben dieser Proteine (BepA – BepG) wurden kürzlich intrazellulär in mit B. henselae infizierten humanen Endothelzellen entdeckt, in welche sie durch ein Typ IV-Sekretionssystem (T4SS) transloziert wurden. Das achte Protein (17kDa) ist Teil dieses T4SS.
Es wurden 116 Seren von Patienten mit gesicherter Katzenkratzkrankheit und 110 IFT-negative Kontrollseren auf Antikörper gegen BepA – BepG und das 17kDa-Antigen getestet. Diese Antikörper waren in individuell unterschiedlichen Mustern nachzuweisen und konnten unter den Patientenseren deutlich häufiger beobachtet werden. Drei Proteine (BepA, BepD und BepG) zeigten signifikante Unterschiede zwischen IFT-positiven und IFT-negativen Seren. Bei alleinigem Nachweis eines der Antigene konnte bei BepG eine maximale Sensitivität von 50.9% mit einer Spezifität von 83.6% erzielt werden. Ein gemeinsamer Nachweis der signifikanten Proteine BepD und BepG erzielte bei der Trennung der Seren eine Spezifität von 100% und eine Sensitivität von 29%.
Untersuchungen zur Änderung der Seroprävalenzen im Krankheitsverlauf sowie zu Unterschieden zwischen den beiden bekannten Genotypen von B. henselae ließen keine eindeutige Korrelation zum Auftreten von Antikörpern erkennen. Eine geringe Korrelation (R2 = 25%) konnte zwischen der Höhe des im IFT gemessenen IgG-Titers und dem Bandenmuster im Western Blot festgestellt werden.
Um definitivere Aussagen zur Einsetzbarkeit dieses Testes in der Diagnostik machen zu können, sollten die Seroprävalenzen nach Aufreinigung der acht Proteine erneut bestimmt werden. Dadurch könnten Kreuzreaktionen gegen E. coli verhindert werden, die die Auswertung in dieser Arbeit vereinzelt erschwerten. Anhand der erzielten Ergebnisse ergaben sich aber deutliche Hinweise darauf, dass die untersuchten Antigene in der Diagnostik einer B. henselae-Infektion eine besondere Rolle spielen könnten.","abstract_html":"Bartonella henselae, ein gramnegatives Stäbchenbakterium, ist weltweit verbreitet und bekannt als der Erreger der Katzenkratzkrankheit, einer häufigen Differentialdiagnose einer Lymphadenopathie. Vor allem bei Immunsuppimierten kann Bartonella henselae auch die Bazilläre Angiomatose, die Peliosis Hepatis oder eine Endokarditis hervorrufen. Als diagnostische Verfahren werden Immunfluoreszenztest (IFT), Polymerasenkettenreaktion (PCR) und die Histopathologie eingesetzt. Bisherige Versuche, einen sensitiven und spezifischen Western Blot zur Diagnostik einer B. henselae-Infektion aufzubauen, scheiterten an der mangelnden Immundominanz der eingesetzten Antigene. In der vorliegenden Arbeit wurden acht rekombinante Proteine von B. henselae auf ihre Immundominanz im Western Blot getestet. Sieben dieser Proteine (BepA – BepG) wurden kürzlich intrazellulär in mit B. henselae infizierten humanen Endothelzellen entdeckt, in welche sie durch ein Typ IV-Sekretionssystem (T4SS) transloziert wurden. Das achte Protein (17kDa) ist Teil dieses T4SS. <br>Es wurden 116 Seren von Patienten mit gesicherter Katzenkratzkrankheit und 110 IFT-negative Kontrollseren auf Antikörper gegen BepA – BepG und das 17kDa-Antigen getestet. Diese Antikörper waren in individuell unterschiedlichen Mustern nachzuweisen und konnten unter den Patientenseren deutlich häufiger beobachtet werden. 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Es wurden 116 Seren von Patienten mit gesicherter Katzenkratzkrankheit und 110 IFT-negative Kontrollseren auf Antikörper gegen BepA – BepG und das 17kDa-Antigen getestet. Diese Antikörper waren in individuell unterschiedlichen Mustern nachzuweisen und konnten unter den Patientenseren deutlich häufiger beobachtet werden. Drei Proteine (BepA, BepD und BepG) zeigten signifikante Unterschiede zwischen IFT-positiven und IFT-negativen Seren. Bei alleinigem Nachweis eines der Antigene konnte bei BepG eine maximale Sensitivität von 50.9% mit einer Spezifität von 83.6% erzielt werden. Ein gemeinsamer Nachweis der signifikanten Proteine BepD und BepG erzielte bei der Trennung der Seren eine Spezifität von 100% und eine Sensitivität von 29%.
Untersuchungen zur Änderung der Seroprävalenzen im Krankheitsverlauf sowie zu Unterschieden zwischen den beiden bekannten Genotypen von B. henselae ließen keine eindeutige Korrelation zum Auftreten von Antikörpern erkennen. Eine geringe Korrelation (R2 = 25%) konnte zwischen der Höhe des im IFT gemessenen IgG-Titers und dem Bandenmuster im Western Blot festgestellt werden.
Um definitivere Aussagen zur Einsetzbarkeit dieses Testes in der Diagnostik machen zu können, sollten die Seroprävalenzen nach Aufreinigung der acht Proteine erneut bestimmt werden. Dadurch könnten Kreuzreaktionen gegen E. coli verhindert werden, die die Auswertung in dieser Arbeit vereinzelt erschwerten. Anhand der erzielten Ergebnisse ergaben sich aber deutliche Hinweise darauf, dass die untersuchten Antigene in der Diagnostik einer B. henselae-Infektion eine besondere Rolle spielen könnten.","Bartonella henselae is a gram negative bacteria found world wide. Infection can cause the cat scratch disease (CSD) and especially in immunocompromised patients the bacillary angiomatosis, the peliosis hepatis or an endocarditis. Common diagnostic tests are immunofluorecsece assay (IFT), polymerase chain reaction (PCR) and histopathology. Recent trials to establish western blot technique for infection with Bartonella henselae did not work due to the missing immunodominance of the used antigens. In this thesis eight recombinant proteins of Bartonella henselae expressed in E. coli were tested with western blot technique regarding their immunogenity. Seven of these proteins (BepA-BepG) were recently found intracellular in human endothelial cells infected with Bartonella henselae. These proteins had been translocated into the cells via a type IV secretion system (T4SS). The other protein (17kDa) is part of the T4SS.
116 sera of patients with diagnosed cat scratch disease and 110 controls which were negative in IFT were tested for antibodies against BepA – BepG and the 17kDa protein. The antibodies were found in individually variable combinations and could be found more frequently among the patients with CSD. Threee proteins (BepA, BepD and BepG) showed significant differences between sera of patients with CSD and the IFT negative controls. BepG had an sensitivity of 50.9% and a specifity of 83.6%. The combination of BepD and BepG could distinguish between the patients and controls with a spezifity of 100% and a sensitivity of 29%.
Examinations regarding the change of antibodies within time and examinations regarding the two known serotypes of Bartonella henselae did not provide any typical correlation with the antibodies found with western blot technique. A small correlation (R^2=25%) was found between the IgG-antibody level in IFT and the andibodies found in western blots.
Considering the role of the eight tested antigens for diagnostic purposes, future studies should re-evaluate the found serum prevalence, with purified proteins. This should prevent cross reaction with E. coli, which complicated the evaluation in this study sporadically. Nevertheless provides this study clear indications that the investigated proteins might play a special role in the diagonsis of infections with Bartonella henselae."]},{"key":"dc:format.medium","label":"Dc Format Medium","values":["application/pdf"]},{"key":"dc:title","label":"Title","values":["Immunogenität translozierter Effektorproteine bei Infektionen mit Bartonella henselae","Immunogenity of translocated effector proteins in infections with Bartonella henselae"]}]}],"canonical_facts":{"dc:contributor":["Sander, Anna"],"dc:creator":["Guhl, Christine Annegret"],"dc:description.abstract":["Bartonella henselae, ein gramnegatives Stäbchenbakterium, ist weltweit verbreitet und bekannt als der Erreger der Katzenkratzkrankheit, einer häufigen Differentialdiagnose einer Lymphadenopathie. Vor allem bei Immunsuppimierten kann Bartonella henselae auch die Bazilläre Angiomatose, die Peliosis Hepatis oder eine Endokarditis hervorrufen. Als diagnostische Verfahren werden Immunfluoreszenztest (IFT), Polymerasenkettenreaktion (PCR) und die Histopathologie eingesetzt. Bisherige Versuche, einen sensitiven und spezifischen Western Blot zur Diagnostik einer B. henselae-Infektion aufzubauen, scheiterten an der mangelnden Immundominanz der eingesetzten Antigene. In der vorliegenden Arbeit wurden acht rekombinante Proteine von B. henselae auf ihre Immundominanz im Western Blot getestet. Sieben dieser Proteine (BepA – BepG) wurden kürzlich intrazellulär in mit B. henselae infizierten humanen Endothelzellen entdeckt, in welche sie durch ein Typ IV-Sekretionssystem (T4SS) transloziert wurden. Das achte Protein (17kDa) ist Teil dieses T4SS.
Es wurden 116 Seren von Patienten mit gesicherter Katzenkratzkrankheit und 110 IFT-negative Kontrollseren auf Antikörper gegen BepA – BepG und das 17kDa-Antigen getestet. Diese Antikörper waren in individuell unterschiedlichen Mustern nachzuweisen und konnten unter den Patientenseren deutlich häufiger beobachtet werden. Drei Proteine (BepA, BepD und BepG) zeigten signifikante Unterschiede zwischen IFT-positiven und IFT-negativen Seren. Bei alleinigem Nachweis eines der Antigene konnte bei BepG eine maximale Sensitivität von 50.9% mit einer Spezifität von 83.6% erzielt werden. Ein gemeinsamer Nachweis der signifikanten Proteine BepD und BepG erzielte bei der Trennung der Seren eine Spezifität von 100% und eine Sensitivität von 29%.
Untersuchungen zur Änderung der Seroprävalenzen im Krankheitsverlauf sowie zu Unterschieden zwischen den beiden bekannten Genotypen von B. henselae ließen keine eindeutige Korrelation zum Auftreten von Antikörpern erkennen. Eine geringe Korrelation (R2 = 25%) konnte zwischen der Höhe des im IFT gemessenen IgG-Titers und dem Bandenmuster im Western Blot festgestellt werden.
Um definitivere Aussagen zur Einsetzbarkeit dieses Testes in der Diagnostik machen zu können, sollten die Seroprävalenzen nach Aufreinigung der acht Proteine erneut bestimmt werden. Dadurch könnten Kreuzreaktionen gegen E. coli verhindert werden, die die Auswertung in dieser Arbeit vereinzelt erschwerten. Anhand der erzielten Ergebnisse ergaben sich aber deutliche Hinweise darauf, dass die untersuchten Antigene in der Diagnostik einer B. henselae-Infektion eine besondere Rolle spielen könnten.","Bartonella henselae is a gram negative bacteria found world wide. Infection can cause the cat scratch disease (CSD) and especially in immunocompromised patients the bacillary angiomatosis, the peliosis hepatis or an endocarditis. Common diagnostic tests are immunofluorecsece assay (IFT), polymerase chain reaction (PCR) and histopathology. Recent trials to establish western blot technique for infection with Bartonella henselae did not work due to the missing immunodominance of the used antigens. In this thesis eight recombinant proteins of Bartonella henselae expressed in E. coli were tested with western blot technique regarding their immunogenity. Seven of these proteins (BepA-BepG) were recently found intracellular in human endothelial cells infected with Bartonella henselae. These proteins had been translocated into the cells via a type IV secretion system (T4SS). The other protein (17kDa) is part of the T4SS.
116 sera of patients with diagnosed cat scratch disease and 110 controls which were negative in IFT were tested for antibodies against BepA – BepG and the 17kDa protein. The antibodies were found in individually variable combinations and could be found more frequently among the patients with CSD. Threee proteins (BepA, BepD and BepG) showed significant differences between sera of patients with CSD and the IFT negative controls. BepG had an sensitivity of 50.9% and a specifity of 83.6%. The combination of BepD and BepG could distinguish between the patients and controls with a spezifity of 100% and a sensitivity of 29%.
Examinations regarding the change of antibodies within time and examinations regarding the two known serotypes of Bartonella henselae did not provide any typical correlation with the antibodies found with western blot technique. A small correlation (R^2=25%) was found between the IgG-antibody level in IFT and the andibodies found in western blots.
Considering the role of the eight tested antigens for diagnostic purposes, future studies should re-evaluate the found serum prevalence, with purified proteins. This should prevent cross reaction with E. coli, which complicated the evaluation in this study sporadically. Nevertheless provides this study clear indications that the investigated proteins might play a special role in the diagonsis of infections with Bartonella henselae."],"dc:format.medium":["application/pdf"],"dc:subject":["Typ IV Sekretionssystem","transloziert, Effektorprotein","Bartonella henselae","immunoblot","antibodies","type IV secretion system"],"dc:title":["Immunogenität translozierter Effektorproteine bei Infektionen mit Bartonella henselae","Immunogenity of translocated effector proteins in infections with Bartonella henselae"],"dc:type":["DoctoralThesis"]},"updated_at":"2026-07-24T02:22:40Z"}