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Die durch STAT Transkriptionsfaktoren vermittelte Signaltransduktion ist entscheidend involviert in die Regulation von Zellteilung und Zelldifferenzierung. Konstitutive STAT Aktivität korreliert mit einer Dysregulation dieser Prozesse. In dieser Arbeit sollte die Bedeutung der konstitutiven STAT5 Aktivierung im Prozeß der Leukämogenese untersucht werden. Primär wurde ein Zellmodell etabliert und charakterisiert, das aus den Prä-B-Zellen BaMRS und BaMR aufgebaut wurde. Hierzu wurden IL-10 Rezeptor transfizierte BaF3 Prä-B-Zellen in Abwesenheit von IL-3 kultiviert und die IL-3 unabhängig wachsenden BaMRS Zellen isoliert. Die Charakterisierung dieser Zellen ergab im Vergleich ein IL-3 unabhängiges Wachstum für BaMRS, das mit folgenden Phänomenen positiv korrelierte: (1) konstitutive STAT5 Phoshorylierung und konstitutive JAK2 Phosphorylierung, (2) transkriptionelle Aktivität des konstitutiv aktiven STAT5 Proteins (PRL-Promoter, Luciferase Assay), (3) klonogene Wachstumstendenz und hohe zelluläre Adhärenz und (4) Hemmung des Zellwachstums der BaMRS Zellen und Inhibition der STAT5 Phosphorylierung durch AG490, einen spezifischen JAK-Kinaseinhibitor.
Diese Charakteristika legen nahe, daß BaMRS Zellen funktionell und phänotypisch Zellen der ALL nahe kommen. Daher wurden BaMR und BaMRS Zellen im Vergleich mit der Methode des Differential Display auf Unterschiede in der Genexpression untersucht. Grundlage für diese Experimente war die Hypothese, daß eine Subtraktion des Genexpressionsmusters unstimulierter BaMR Zellen von der Genexpression der BaMR Zellen zur Identifizierung von STAT5 regulierter Gene führen würde. Es gelang, neben der Überexpression des c-abl-Proteins die Expression eines Ly6-Antigens in den BaMRS-Zellen nachzuweisen. Damit wurden sowohl c-abl, als auch Ly6-Antigen als Gene identifiziert, deren Expression mit der Aktivität des STAT5 Transkriptionsfaktors korreliert. Für c-abl decken sich die Ergebnisse mit der Beobachtung anderer Arbeitsgruppen, daß in humanen Zellen c-abl an der Aktivierung des Jak2-STAT5 Signaltransduktionsweges beteiligt zu sein scheint. Die Überexpression von Ly-Antigenen wurde sowohl auf murinen, als auch humanen Tumorzellen beobachtet und korreliert mit einem hochmalignen Phänotyp.
Zusammenfassend konnte in dieser Arbeit ein neues Zellmodell der ALL etabliert und charakterisiert werden, das ebenso dazu dienen kann, neue medikamentöse Ansätze der Wachstumsinhibition zu testen, wie dies für den Tyrosinkinaseinhibitor AG490 mit BaMR/BaMRS Zellen gezeigt worden ist.","abstract_html":"Zusammenfassung <br> <br>Die durch STAT Transkriptionsfaktoren vermittelte Signaltransduktion ist entscheidend involviert in die Regulation von Zellteilung und Zelldifferenzierung. Konstitutive STAT Aktivität korreliert mit einer Dysregulation dieser Prozesse. In dieser Arbeit sollte die Bedeutung der konstitutiven STAT5 Aktivierung im Prozeß der Leukämogenese untersucht werden. Primär wurde ein Zellmodell etabliert und charakterisiert, das aus den Prä-B-Zellen BaMRS und BaMR aufgebaut wurde. Hierzu wurden IL-10 Rezeptor transfizierte BaF3 Prä-B-Zellen in Abwesenheit von IL-3 kultiviert und die IL-3 unabhängig wachsenden BaMRS Zellen isoliert. Die Charakterisierung dieser Zellen ergab im Vergleich ein IL-3 unabhängiges Wachstum für BaMRS, das mit folgenden Phänomenen positiv korrelierte: (1) konstitutive STAT5 Phoshorylierung und konstitutive JAK2 Phosphorylierung, (2) transkriptionelle Aktivität des konstitutiv aktiven STAT5 Proteins (PRL-Promoter, Luciferase Assay), (3) klonogene Wachstumstendenz und hohe zelluläre Adhärenz und (4) Hemmung des Zellwachstums der BaMRS Zellen und Inhibition der STAT5 Phosphorylierung durch AG490, einen spezifischen JAK-Kinaseinhibitor. <br>Diese Charakteristika legen nahe, daß BaMRS Zellen funktionell und phänotypisch Zellen der ALL nahe kommen. Daher wurden BaMR und BaMRS Zellen im Vergleich mit der Methode des Differential Display auf Unterschiede in der Genexpression untersucht. Grundlage für diese Experimente war die Hypothese, daß eine Subtraktion des Genexpressionsmusters unstimulierter BaMR Zellen von der Genexpression der BaMR Zellen zur Identifizierung von STAT5 regulierter Gene führen würde. Es gelang, neben der Überexpression des c-abl-Proteins die Expression eines Ly6-Antigens in den BaMRS-Zellen nachzuweisen. Damit wurden sowohl c-abl, als auch Ly6-Antigen als Gene identifiziert, deren Expression mit der Aktivität des STAT5 Transkriptionsfaktors korreliert. Für c-abl decken sich die Ergebnisse mit der Beobachtung anderer Arbeitsgruppen, daß in humanen Zellen c-abl an der Aktivierung des Jak2-STAT5 Signaltransduktionsweges beteiligt zu sein scheint. Die Überexpression von Ly-Antigenen wurde sowohl auf murinen, als auch humanen Tumorzellen beobachtet und korreliert mit einem hochmalignen Phänotyp. <br>Zusammenfassend konnte in dieser Arbeit ein neues Zellmodell der ALL etabliert und charakterisiert werden, das ebenso dazu dienen kann, neue medikamentöse Ansätze der Wachstumsinhibition zu testen, wie dies für den Tyrosinkinaseinhibitor AG490 mit BaMR/BaMRS Zellen gezeigt worden ist.","abstract_has_math":false,"creators":["Zander, Luitgard"],"institution":null,"degree_name":null,"degree_level":null,"degree_discipline":null,"degree_department":null,"school":null,"contributors":["Weber, Renate"],"advisors":[],"committee_chairs":[],"committee_members":[],"year":null,"date_issued":"","date_published":null,"updated_at":"2026-07-24T02:22:28Z","subjects":["differential display","Prä-B-Zellen","Signaltransduktion","STAT5","Ly6","pre-B-cells","signal transduction"],"languages":[],"rights":[],"rights_urls":[],"identifier_entries":[]},"links":{"outbound_url":"https://freidok.uni-freiburg.de/data/1699","outbound_label":"Repository record","outbound_source":"source_url"},"metadata_groups":[{"id":"people","label":"People","entries":[{"key":"dc:contributor","label":"Contributor","values":["Weber, Renate"]},{"key":"dc:creator","label":"Author","values":["Zander, Luitgard"]}]},{"id":"academic_context","label":"Academic Context","entries":[{"key":"dc:type","label":"Dc Type","values":["DoctoralThesis"]}]},{"id":"subjects_keywords","label":"Subjects and Keywords","entries":[{"key":"dc:subject","label":"Dc Subject","values":["differential display","Prä-B-Zellen","Signaltransduktion","STAT5","Ly6","pre-B-cells","signal transduction"]}]},{"id":"additional","label":"Additional Metadata","entries":[{"key":"dc:description.abstract","label":"Abstract","values":["Zusammenfassung
Die durch STAT Transkriptionsfaktoren vermittelte Signaltransduktion ist entscheidend involviert in die Regulation von Zellteilung und Zelldifferenzierung. Konstitutive STAT Aktivität korreliert mit einer Dysregulation dieser Prozesse. In dieser Arbeit sollte die Bedeutung der konstitutiven STAT5 Aktivierung im Prozeß der Leukämogenese untersucht werden. Primär wurde ein Zellmodell etabliert und charakterisiert, das aus den Prä-B-Zellen BaMRS und BaMR aufgebaut wurde. Hierzu wurden IL-10 Rezeptor transfizierte BaF3 Prä-B-Zellen in Abwesenheit von IL-3 kultiviert und die IL-3 unabhängig wachsenden BaMRS Zellen isoliert. Die Charakterisierung dieser Zellen ergab im Vergleich ein IL-3 unabhängiges Wachstum für BaMRS, das mit folgenden Phänomenen positiv korrelierte: (1) konstitutive STAT5 Phoshorylierung und konstitutive JAK2 Phosphorylierung, (2) transkriptionelle Aktivität des konstitutiv aktiven STAT5 Proteins (PRL-Promoter, Luciferase Assay), (3) klonogene Wachstumstendenz und hohe zelluläre Adhärenz und (4) Hemmung des Zellwachstums der BaMRS Zellen und Inhibition der STAT5 Phosphorylierung durch AG490, einen spezifischen JAK-Kinaseinhibitor.
Diese Charakteristika legen nahe, daß BaMRS Zellen funktionell und phänotypisch Zellen der ALL nahe kommen. Daher wurden BaMR und BaMRS Zellen im Vergleich mit der Methode des Differential Display auf Unterschiede in der Genexpression untersucht. Grundlage für diese Experimente war die Hypothese, daß eine Subtraktion des Genexpressionsmusters unstimulierter BaMR Zellen von der Genexpression der BaMR Zellen zur Identifizierung von STAT5 regulierter Gene führen würde. Es gelang, neben der Überexpression des c-abl-Proteins die Expression eines Ly6-Antigens in den BaMRS-Zellen nachzuweisen. Damit wurden sowohl c-abl, als auch Ly6-Antigen als Gene identifiziert, deren Expression mit der Aktivität des STAT5 Transkriptionsfaktors korreliert. Für c-abl decken sich die Ergebnisse mit der Beobachtung anderer Arbeitsgruppen, daß in humanen Zellen c-abl an der Aktivierung des Jak2-STAT5 Signaltransduktionsweges beteiligt zu sein scheint. Die Überexpression von Ly-Antigenen wurde sowohl auf murinen, als auch humanen Tumorzellen beobachtet und korreliert mit einem hochmalignen Phänotyp.
Zusammenfassend konnte in dieser Arbeit ein neues Zellmodell der ALL etabliert und charakterisiert werden, das ebenso dazu dienen kann, neue medikamentöse Ansätze der Wachstumsinhibition zu testen, wie dies für den Tyrosinkinaseinhibitor AG490 mit BaMR/BaMRS Zellen gezeigt worden ist.","Abstract
Constitutive activation of STAT-proteins, which are responsible for signal transduction and activation of transcription, can cause cytokine independent cell proliferation and malignant transformation. Target of this thesis was to investigate the role of constitutively activated STAT5 in the process of leucemogenesis. With deliberate cloning of IL-3-dependent murine Pre-B-cells (BaMR-cells) in IL-3-deprived medium the IL3-independent growing mutant BaMRS could be separated. BaMRS-cells showed (1) constitutive phosphorylation of STAT5 and JAK2, (2) transcriptional activity of constitutively activated STAT5, (3) enhanced clonogenity and cell-cell-adhesion and (4) inhibition of cell proliferation including inhibition of STAT5 phosphorylation by the specific Jak-kinase-inhibitor AG 490. On account of these characteristics BaMR- and BaMRS-cells could be established as in-vitro cell model reflecting the development of pre-B-leucemia.
Transcriptional activity of STAT5 in BaMR-cells could be easily stopped by IL-3 deprivation, whereas STAT5 in BaMRS-cells showed constitutive transcriptional activity. Therefore assuming, that subtracting the pattern of gene expression of unstimulated BaMR-cells from the gene expression of BaMRS-cells should help to identify STAT5 regulated genes, Differential Display was performed with BaMR-and BaMRS-cells. Using this method it could be shown, that transcriptional activity of STAT5 in BaMRS-cells correlates with the expression of the ly6-antigen. The importance of ly6-expression in BaMRS-cells is underlined by the fact, that in literature overexpression of murine and human ly6-homologs is combined with a highly malignant phenotype of cells.
Thus the BaMR/BaMRS-cell model can be used to investigate the involvement of ly6-expression in B-cell-leucemogenesis. Further it can also help to test medicamental attempts at growth inibition, as it has been shown with tyrosine kinase inhibitor AG490 in BaMRS-cells."]},{"key":"dc:format.medium","label":"Dc Format Medium","values":["application/pdf"]},{"key":"dc:title","label":"Title","values":["STAT5 regulierte differentielle Genexpression in prä-B-leukämischen Zellen","STAT5 regulated differential gene expression in pre-B-leucemic cells"]}]}],"canonical_facts":{"dc:contributor":["Weber, Renate"],"dc:creator":["Zander, Luitgard"],"dc:description.abstract":["Zusammenfassung
Die durch STAT Transkriptionsfaktoren vermittelte Signaltransduktion ist entscheidend involviert in die Regulation von Zellteilung und Zelldifferenzierung. Konstitutive STAT Aktivität korreliert mit einer Dysregulation dieser Prozesse. In dieser Arbeit sollte die Bedeutung der konstitutiven STAT5 Aktivierung im Prozeß der Leukämogenese untersucht werden. Primär wurde ein Zellmodell etabliert und charakterisiert, das aus den Prä-B-Zellen BaMRS und BaMR aufgebaut wurde. Hierzu wurden IL-10 Rezeptor transfizierte BaF3 Prä-B-Zellen in Abwesenheit von IL-3 kultiviert und die IL-3 unabhängig wachsenden BaMRS Zellen isoliert. Die Charakterisierung dieser Zellen ergab im Vergleich ein IL-3 unabhängiges Wachstum für BaMRS, das mit folgenden Phänomenen positiv korrelierte: (1) konstitutive STAT5 Phoshorylierung und konstitutive JAK2 Phosphorylierung, (2) transkriptionelle Aktivität des konstitutiv aktiven STAT5 Proteins (PRL-Promoter, Luciferase Assay), (3) klonogene Wachstumstendenz und hohe zelluläre Adhärenz und (4) Hemmung des Zellwachstums der BaMRS Zellen und Inhibition der STAT5 Phosphorylierung durch AG490, einen spezifischen JAK-Kinaseinhibitor.
Diese Charakteristika legen nahe, daß BaMRS Zellen funktionell und phänotypisch Zellen der ALL nahe kommen. Daher wurden BaMR und BaMRS Zellen im Vergleich mit der Methode des Differential Display auf Unterschiede in der Genexpression untersucht. Grundlage für diese Experimente war die Hypothese, daß eine Subtraktion des Genexpressionsmusters unstimulierter BaMR Zellen von der Genexpression der BaMR Zellen zur Identifizierung von STAT5 regulierter Gene führen würde. Es gelang, neben der Überexpression des c-abl-Proteins die Expression eines Ly6-Antigens in den BaMRS-Zellen nachzuweisen. Damit wurden sowohl c-abl, als auch Ly6-Antigen als Gene identifiziert, deren Expression mit der Aktivität des STAT5 Transkriptionsfaktors korreliert. Für c-abl decken sich die Ergebnisse mit der Beobachtung anderer Arbeitsgruppen, daß in humanen Zellen c-abl an der Aktivierung des Jak2-STAT5 Signaltransduktionsweges beteiligt zu sein scheint. Die Überexpression von Ly-Antigenen wurde sowohl auf murinen, als auch humanen Tumorzellen beobachtet und korreliert mit einem hochmalignen Phänotyp.
Zusammenfassend konnte in dieser Arbeit ein neues Zellmodell der ALL etabliert und charakterisiert werden, das ebenso dazu dienen kann, neue medikamentöse Ansätze der Wachstumsinhibition zu testen, wie dies für den Tyrosinkinaseinhibitor AG490 mit BaMR/BaMRS Zellen gezeigt worden ist.","Abstract
Constitutive activation of STAT-proteins, which are responsible for signal transduction and activation of transcription, can cause cytokine independent cell proliferation and malignant transformation. Target of this thesis was to investigate the role of constitutively activated STAT5 in the process of leucemogenesis. With deliberate cloning of IL-3-dependent murine Pre-B-cells (BaMR-cells) in IL-3-deprived medium the IL3-independent growing mutant BaMRS could be separated. BaMRS-cells showed (1) constitutive phosphorylation of STAT5 and JAK2, (2) transcriptional activity of constitutively activated STAT5, (3) enhanced clonogenity and cell-cell-adhesion and (4) inhibition of cell proliferation including inhibition of STAT5 phosphorylation by the specific Jak-kinase-inhibitor AG 490. On account of these characteristics BaMR- and BaMRS-cells could be established as in-vitro cell model reflecting the development of pre-B-leucemia.
Transcriptional activity of STAT5 in BaMR-cells could be easily stopped by IL-3 deprivation, whereas STAT5 in BaMRS-cells showed constitutive transcriptional activity. Therefore assuming, that subtracting the pattern of gene expression of unstimulated BaMR-cells from the gene expression of BaMRS-cells should help to identify STAT5 regulated genes, Differential Display was performed with BaMR-and BaMRS-cells. Using this method it could be shown, that transcriptional activity of STAT5 in BaMRS-cells correlates with the expression of the ly6-antigen. The importance of ly6-expression in BaMRS-cells is underlined by the fact, that in literature overexpression of murine and human ly6-homologs is combined with a highly malignant phenotype of cells.
Thus the BaMR/BaMRS-cell model can be used to investigate the involvement of ly6-expression in B-cell-leucemogenesis. Further it can also help to test medicamental attempts at growth inibition, as it has been shown with tyrosine kinase inhibitor AG490 in BaMRS-cells."],"dc:format.medium":["application/pdf"],"dc:subject":["differential display","Prä-B-Zellen","Signaltransduktion","STAT5","Ly6","pre-B-cells","signal transduction"],"dc:title":["STAT5 regulierte differentielle Genexpression in prä-B-leukämischen Zellen","STAT5 regulated differential gene expression in pre-B-leucemic cells"],"dc:type":["DoctoralThesis"]},"updated_at":"2026-07-24T02:22:28Z"}