{"id":{"repo_id":"freiburg-diss","oai_identifier":"oai:freidok.uni-freiburg.de:1532"},"canonical_url":"https://search.dev.ndltd.org/etd/freiburg-diss/oai:freidok.uni-freiburg.de:1532","repository":{"repo_id":"freiburg-diss","name":"University of Freiburg","base_url":"https://freidok.uni-freiburg.de/oai/oai2.php"},"display":{"title":"Der monoklonale Antikörper Som5H5 : Charakterisierung seines Antigens in der Embryonalentwicklung des Hühnchens","abstract":"Das Ziel der vorliegenden Arbeit war es, das Antigen des <br>monoklonalen Antikörpers Som5H5 zu bestimmen und es <br>hinsichtlich seines Auftretens in der frühen <br>Embryonalentwicklung des Hühnchens zu charakterisieren. Mit <br>Hilfe verschiedener biochemischer Verfahren wurde das <br>Som5H5-Protein isoliert, massenspektroskopisch analysiert <br>und seine Identität gezielt überprüft. Es handelt sich <br>demnach um das Intermediärfilament-Protein Vimentin des <br>Hühnchens. <br>In immunhistochemischen Färbereihen wurde mit dem <br>Som5H5-Antikörper das Auftreten von Vimentin in <br>verschiedenen Stadien der Hühnchenentwicklung dargestellt <br>und mit dem Muster eines kommerziell erhältlichen <br>monoklonalen Anti-Vimentin-Antikörpers (Klon V9) <br>verglichen. Die Signale des Som5H5-Antikörpers fanden sich <br>sowohl in Zellen ektodermalen Ursprungs (Neuralrohr, <br>Neuralleistenderivate) wie auch in Zellen mesodermaler <br>Herkunft (Chorda dorsalis, Somitenepithel, Myotom, Aorta, <br>Nierenanlage, Wirbelanlage) und Entodermderivaten <br>(Darmrohrepithel, Luftsackanlagen). Zudem wurde in der Nähe <br>der Extremitätenanlage eine unbekannte Zone markiert. Der <br>kommerziell erhältliche Antikörper erzeugte ein Muster, das <br>zum einen einige dieser Strukturen nicht enthielt und zum <br>anderen die detektierten Strukturen anders markierte. <br>Generell färbte er in Kryoschnitten die Zellkerne der <br>positiven Gewebe, während der Som5H5-Antikörper stets nur <br>zytoplasmatische Bestandteile erkannte. <br>Bei Anwendung von Som5H5 an adulter <br>Hühnchen-Skelettmuskulatur zeigte sich das <br>Querstreifenmuster der Vimentin enthaltenden Costamere. <br>Zur Verifizierung der immunhistochemischen Färbemuster <br>wurden in situ-Hybridisierungen an Hühnchenembryonen <br>durchgeführt. In whole-mount-Färbungen konnte eine <br>Expression von Vimentin in der Extremitätenanlage <br>nachgewiesen und in Verlauf und Ausdehnung charakterisiert <br>werden. Es handelt sich hierbei um eine scharf begrenzte <br>Zone im posterio-proximalen Bereich der oberen und unteren <br>Extremität, die im HH-Stadium 20 erscheint, im HH-Stadium <br>26 ihre maximale Ausdehnung erreicht, dabei auch auf die <br>Rumpfwand übergreift, und sich anschließend rasch wieder <br>verkleinert. Vergleiche mit anderen morphologischen oder <br>funktionellen Zonen der Extremitätenentwicklung zeigten <br>keinerlei Ähnlichkeit. <br>In Wirbelanlagen von HH-Stadium-34-Embryonen wurden Zellen <br>des Randbereichs (Perichordium) gefärbt, während sich die <br>Chondrozyten Vimentin-negativ darstellten.","abstract_html":"Das Ziel der vorliegenden Arbeit war es, das Antigen des &lt;br&gt;monoklonalen Antikörpers Som5H5 zu bestimmen und es &lt;br&gt;hinsichtlich seines Auftretens in der frühen &lt;br&gt;Embryonalentwicklung des Hühnchens zu charakterisieren. 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Es handelt sich hierbei um eine scharf begrenzte <br>Zone im posterio-proximalen Bereich der oberen und unteren <br>Extremität, die im HH-Stadium 20 erscheint, im HH-Stadium <br>26 ihre maximale Ausdehnung erreicht, dabei auch auf die <br>Rumpfwand übergreift, und sich anschließend rasch wieder <br>verkleinert. Vergleiche mit anderen morphologischen oder <br>funktionellen Zonen der Extremitätenentwicklung zeigten <br>keinerlei Ähnlichkeit. <br>In Wirbelanlagen von HH-Stadium-34-Embryonen wurden Zellen <br>des Randbereichs (Perichordium) gefärbt, während sich die <br>Chondrozyten Vimentin-negativ darstellten.","To identify somite-specific antigens exhibiting novel <br>expression patterns in the developing chick embryo, <br>epithelial somites were isolated and used for intrasplenic <br>immunization. Immunohistochemical screening of chick <br>embryos of various stages focussed our attention on a <br>monoclonal antibody, Som5H5, which stained somitic <br>derivatives, spinal nerves, and neural tubes as well as the <br>costameres of adult skeletal muscle. Western blot and mass <br>spectrometric analysis revealed the Som5H5 antigen to be <br>vimentin, the distribution of which has been well <br>characterized before. In addition to the described vimentin <br>pattern, Som5H5 stained a region in the proximal portion of <br>the developing limb bud. This novel expression domain was <br>confirmed by in situ hybridization using vimentin <br>riboprobes. Signaling molecules (Shh and BMP-2), known to <br>play a role in limb development, did not influence vimentin <br>expression. Thus, no functional or cellular correlate to <br>this vimentin-positive region could be determined."]},{"key":"dc:format.medium","label":"Dc Format Medium","values":["application/pdf"]},{"key":"dc:title","label":"Title","values":["Der monoklonale Antikörper Som5H5 : Charakterisierung seines Antigens in der Embryonalentwicklung des Hühnchens","The monoclonal antibody Som5H5 : characterization of its antigen in chick embryo development"]}]}],"canonical_facts":{"dc:contributor":["Brand-Saberi, Beate"],"dc:creator":["Noack, Christian"],"dc:description.abstract":["Das Ziel der vorliegenden Arbeit war es, das Antigen des <br>monoklonalen Antikörpers Som5H5 zu bestimmen und es <br>hinsichtlich seines Auftretens in der frühen <br>Embryonalentwicklung des Hühnchens zu charakterisieren. Mit <br>Hilfe verschiedener biochemischer Verfahren wurde das <br>Som5H5-Protein isoliert, massenspektroskopisch analysiert <br>und seine Identität gezielt überprüft. 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Der <br>kommerziell erhältliche Antikörper erzeugte ein Muster, das <br>zum einen einige dieser Strukturen nicht enthielt und zum <br>anderen die detektierten Strukturen anders markierte. <br>Generell färbte er in Kryoschnitten die Zellkerne der <br>positiven Gewebe, während der Som5H5-Antikörper stets nur <br>zytoplasmatische Bestandteile erkannte. <br>Bei Anwendung von Som5H5 an adulter <br>Hühnchen-Skelettmuskulatur zeigte sich das <br>Querstreifenmuster der Vimentin enthaltenden Costamere. <br>Zur Verifizierung der immunhistochemischen Färbemuster <br>wurden in situ-Hybridisierungen an Hühnchenembryonen <br>durchgeführt. In whole-mount-Färbungen konnte eine <br>Expression von Vimentin in der Extremitätenanlage <br>nachgewiesen und in Verlauf und Ausdehnung charakterisiert <br>werden. Es handelt sich hierbei um eine scharf begrenzte <br>Zone im posterio-proximalen Bereich der oberen und unteren <br>Extremität, die im HH-Stadium 20 erscheint, im HH-Stadium <br>26 ihre maximale Ausdehnung erreicht, dabei auch auf die <br>Rumpfwand übergreift, und sich anschließend rasch wieder <br>verkleinert. Vergleiche mit anderen morphologischen oder <br>funktionellen Zonen der Extremitätenentwicklung zeigten <br>keinerlei Ähnlichkeit. <br>In Wirbelanlagen von HH-Stadium-34-Embryonen wurden Zellen <br>des Randbereichs (Perichordium) gefärbt, während sich die <br>Chondrozyten Vimentin-negativ darstellten.","To identify somite-specific antigens exhibiting novel <br>expression patterns in the developing chick embryo, <br>epithelial somites were isolated and used for intrasplenic <br>immunization. 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