Untersuchung der Rolle des Fas/FasL-Systems bei der Auslösung der Apoptose durch Tumorzellen in Fas-knock out-Makrophagen
Durch die Dissertationen von Woisetschläger und Wolff wurde ein System etabliert, mit dem es gelang, Wachstum, Differenzierung, Reifegrad und vor allem apoptotische Aktivität bei in in-vitro kultivierten Mausmakrophagen mit Hilfe des immunhistochemischen Nachweises der Apoptosemarker bcl-2, bcl-xL und bax zu erfassen und zu quantifizieren. Ein besonderer Schwerpunkt lag auf einem Vergleich zwischen Kontroll- und Versuchsmakrophagen. Letztere wurden mit Tumorzellüberstand (TZÜ) inkubiert. Die Analyse der Ergebnisse dieser beiden Arbeiten zeigte, dass der TZÜ eine deutliche Steigerung der Apoptoseinduktion bewirkte. Aus der Beobachtung dieser Werte und der Überlegung, ob dem Fas/FasL-System eine bedeutende Rolle in dem o.g. Apoptosegeschehen zugemessen werden kann, sollten in dieser Arbeit Fas-k.o.-Mäuse mit den gleichen drei Apoptosemarkern unter den gleichen Bedingungen angefärbt werden. Um die Untersuchungszeitpunkte von C57/BL6-Mäusen auf Fas-k.o.-Mäuse übertragen zu können, wurde zuerst mit Hilfe des Reifemarkers Bm8, dem BrdU-Proliferationstest und dem Latexphagozytosetest gezeigt, dass sich die beiden Mäusearten in ihrer Kinetik nicht unterscheiden. Bei der Untersuchung der Apoptosemarker zeigten sich deutliche Unterschiede zu den nicht-Fas-k.o.-Mäusen. Sowohl beim bcl-2-Protein, als auch beim bcl-xL-Protein war kein signifikanter Unterschied zwischen der Kontrollgruppe und der Expositionsgruppe zu erkennen. Dies weist stark auf die bedeutende Rolle, die das Fas/FasL-System beim Ablauf der Apoptose zu spielen scheint, hin. Bei der Untersuchung des bax-Proteins hingegen war an beiden Tagen ein signifikanter Unterschied zu beobachten. Dies deutet auf einen Fas-unabhängigen Weg hin, mit dessen Hilfe bax Apoptose auch ohne das Fas/FasL-System Apoptose bewirken kann.
bcl-2, bax, bcl-x, FasFasL-System,, apoptosis, fas/fasL-system
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