Die Wirksamkeit TRAIL-induzierter Nekroptose gegenüber Tumorstammzellen und zellzyklusarretierten Tumorzellen
Viele Tumor Subpopulationen sind restistent gegenüber Apoptose. Eine mögliche Therapieoption stellt die Induktion alternativer Zelltodformen wie Nekroptose, eine reguliert ablaufende Form der Nekrose, dar. In der hier vorliegenden Arbeit konnte nachgewiesen werden, dass TRAIL-induzierte Nekroptose gegenüber nicht-zirkulierenden Krebszellen, sowie gegenüber Holo-, Mero-, und Paraklonen effektiv ist. Diese Klone weisen einen erhöhten (Holoklone), mittleren (Meroklone), oder geringen Anteil von Zellen mit Stammzelleigenschaften (Paraklone) auf. In dieser Arbeit wurden Holo-, Mero-, und Paraklone von drei verschiedenen Krebszelllinien, davon einem Pankreasadenokarzinomen, einer Lymphknotenmetastase eines Pankreasadenokarzinoms, sowie aus einer Bauchwandmetastase eines Gallenblasenkarzinoms mittels monoklonaler Kultivierung generiert. Die generierten Klone wurden morphologisch, mit quantitativer reverse Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktion und Immunfluoreszenzfärbungen für Stammzellmarker analysiert und im Anschluss auf ihre Sensitivität gegen TRAIL-induzierte Nekroptose untersucht. Weitergehend wurden zellzyklusarretiere Tumorzellen als Modell für nicht-zirkulierende Tumorzellen durch Bestrahlung, sowie durch Transfektion mit small-interfering RNA gegen Cycline generiert. Nicht-zirkulierende, ruhende Tumorzellen mit Stammzelleigenschaften sind schwer durch Apoptose zu eliminieren und entziehen sich so dem Immunsystem und aktuellen Therapien. Die Zellen wurden am Übergang der G2- in die M-Phase und der G1/0 in die SPhase arretiert und ebenfalls auf ihre Sensitivität gegen TRAIL-induzierte Nekroptose untersucht. Die Untersuchungen konnten zeigen, dass Holoklone in der G2/M-Phase arretiert werden können und somit ein Modell für ruhende Tumorstammzellen darstellen können. Eine Effektivität von TRAIL-induzierter Nekroptose gegenüber zellzyklusarretierten Tumorzellen konnte nachgewiesen werden. Diese Ergebnisse implizieren, dass TRAIL-induzierte Nekroptose eine mögliche spätere Therapieoption darstellt und auch Krebszellen wie Holoklone und ruhende Krebszellen erreicht, welche normalerweise schwer zu eliminieren sind.
TRAIL, Holoklone, Tumorstammzellen, arretierte Tumorzellen, Nekroptose
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