Caracterización de la función de la proteína humana znf330/noa36 mediante estudios interactómicos y de mutagénesis con el sistema crispr/cas9
type: CreativeWork
description: Inicialmente descrita como un autoantígeno, NOA36/ZNF330 (NOA36 de aquí en adelante) es una proteína nucleolar con dominios en dedos de zinc cuya secuencia de aminoácidos está muy conservada en grupos taxonómicos eucariotas unicelulares y pluricelulares, tanto del reino animal como vegetal, lo que indica que debe tener un papel fisiológico muy relevante. El gen de NOA36 se expresa en todos los tejidos y líneas celulares humana y, aunque anteriormente se relacionó la función de esta proteína con la apoptosis en células humanas y la morfogénesis muscular y la hematopoyesis en Drosophila, hay pocos estudios que indaguen su papel fisiológico o su interacción con otras proteínas. En esta tesis se investiga la interacción de NOA36 con otras proteínas mediante un estudio interactómico en el que se combina la inmunoprecipitación con el análisis proteómico mediante espectrometría de masas (AP-EM), utilizando extractos de proteínas de células HeLa que sobreexpresan la proteína recombinante Flag-NOA36. Como resultado de este estudio se encontró que NOA36 interacciona con las proteínas de choque térmico HSPA1 y HSPA8, lo que posteriormente se validó mediante co-inmunoprecipitación de las proteínas recombinantes en células HeLa y HEK293. En este análisis se detectó también una posible interacción con la proteína Enhancer of Rudimentary Homolog (ERH) que en células humanas está involucrada en la regulación del ciclo celular. Dado que estos resultados indicaban que NOA36 podría estar relacionada con la respuesta al estrés y el ciclo celular, se realizaron ensayos de tratamiento de choque térmico en células HEK293 en las que se examinó la apoptosis, el ciclo celular y la proliferación mediante citometría de flujo. Para analizar la falta de función del gen NOA36 se empleó una línea celular derivada de HEK293 en la que se eliminó su expresión mediante la tecnología CRISPR/CAS9n (línea celular 2D12). Los resultados obtenidos indican que la falta de expresión de NOA36 no afecta a la ap…
abstract: Inicialmente descrita como un autoantígeno, NOA36/ZNF330 (NOA36 de aquí en adelante) es una proteína nucleolar con dominios en dedos de zinc cuya secuencia de aminoácidos está muy conservada en grupos taxonómicos eucariotas unicelulares y pluricelulares, tanto del reino animal como vegetal, lo que indica que debe tener un papel fisiológico muy relevante. El gen de NOA36 se expresa en todos los tejidos y líneas celulares humana y, aunque anteriormente se relacionó la función de esta proteína con la apoptosis en células humanas y la morfogénesis muscular y la hematopoyesis en Drosophila, hay pocos estudios que indaguen su papel fisiológico o su interacción con otras proteínas. En esta tesis se investiga la interacción de NOA36 con otras proteínas mediante un estudio interactómico en el que se combina la inmunoprecipitación con el análisis proteómico mediante espectrometría de masas (AP-EM), utilizando extractos de proteínas de células HeLa que sobreexpresan la proteína recombinante Flag-NOA36. Como resultado de este estudio se encontró que NOA36 interacciona con las proteínas de choque térmico HSPA1 y HSPA8, lo que posteriormente se validó mediante co-inmunoprecipitación de las proteínas recombinantes en células HeLa y HEK293. En este análisis se detectó también una posible interacción con la proteína Enhancer of Rudimentary Homolog (ERH) que en células humanas está involucrada en la regulación del ciclo celular. Dado que estos resultados indicaban que NOA36 podría estar relacionada con la respuesta al estrés y el ciclo celular, se realizaron ensayos de tratamiento de choque térmico en células HEK293 en las que se examinó la apoptosis, el ciclo celular y la proliferación mediante citometría de flujo. Para analizar la falta de función del gen NOA36 se empleó una línea celular derivada de HEK293 en la que se eliminó su expresión mediante la tecnología CRISPR/CAS9n (línea celular 2D12). Los resultados obtenidos indican que la falta de expresión de NOA36 no afecta a la ap…
author: Sánchez-Briñas Otte, Alejandra
language: spa
license: http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
date published: 2024-05-31
date modified: 2026-07-24T01:29:31Z
provider: Universidad de Cadiz
publisher: Networked Digital Library of Theses and Dissertations
type: WebPage
source organization: Universidad de Cadiz

PropertyValue
property ID: Handle
value: http://hdl.handle.net/10498/33397