Fatores de virulência de Bacillus cereus isolado na cadeia produtiva do leite na microrregião de Viçosa, Minas Gerais
A ocorrência de Bacillus cereus na cadeia produtiva do leite cru e de fatores de virulência associados a intoxicação diarréica foi avaliada em dois sistema de produção, um tecnificado e outro, não. Inicialmente o isolamento do micro-organismo foi feito no meio seletivo MYP (Manitol-Egg Yolk-Polymyxin), em tanques de armazenamento de leite, latão de leite, mão de ordenhador, teteiras, ar do ambiente e em amostras de água e de leite. Um total de 116 isolados de Bacillus spp. apresentavam atividade de lecitinase e não fermentavam manitol e foram submetidas à prova morfotintorial de coloração de Gram e às provas bioquímicas. Dos 116 isolados, 32 apresentaram resultado característico de B. cereus nas provas realizadas e foram submetidas aos testes de biologia molecular. Os 32 isolados foram submetidos a análises de PCR (Polymerase Chain Reaction) para a detecção do gene gyrB. Em todos os isolados foi amplificado um produto de 352pb que após digestão utilizando e enzima de restrição RsaI apresentaram tamanhos de aproximadamente 250pb, resultados que de acordo com a literatura confirmam serem isolados de Bacillus cereus. Na análise dos fatores de virulência, em 15 isolados (47%) foram amplificados fragmentos de DNA de761pb, indicando a ocorrência do gene produtor da toxina não-hemolítica (NHE). Também, foram encontrados em 7 (22%) dos 32 isolados fragmentos de DNA de 421pb, demonstrando a presença do gene que codifica a citotoxina K (CytK). Bacillus cereus NHE e, ou, CytK positivos foram isolados em todas as fontes de contaminação avaliadas em ambos os sistemas de produção de leite, embora houvesse uma maior prevalência do gene NHE. A análise de 14 isolados positivos para NHE ou CytK apresentaram sequências de genes conservadas semelhante à do Bacillus cereus ATCC 14579 usada como referência, indicando que esses isolados apresentam potencial patogênico.
Qualidade do leite, Bacillus cereus, Enterotoxinas, Fatores de virulência, Quality of milk, Bacillus cereus, Enterotoxins, Virulence factors
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