Desenvolvimento de moléculas aplicadas no diagnóstico sorológico e molecular de doenças bovinas

Falhas reprodutivas que afetam animais de produção geralmente são causadas por agentes infecciosos e geram enormes prejuízos aos produtores. Entre estes patógenos estão os protozoários da tripanossomíase e neosporose bovina. As principais técnicas de diagnóstico se baseiam na percepção dos sinais clínicos, que são inespecíficos. Logo, buscamos estabelecer metodologias eficientes e de baixo custo para desenvolvimento de moléculas que possam ser aplicadas em plataformas de diagnóstico destas duas protozooses. Primeiro, utilizamos da tecnologia do phage-display para rastrear epítopos que diferenciassem soros de animais tripanossomíase positivo daqueles coletados de animais saudáveis, a fim de selecionar uma proteína de Trypanosoma vivax para uso no diagnóstico sorológico da infecção. As análises sorológicas indicaram sensibilidade de 88,9% e especificidade de 89,3%, no diagnóstico da tripanossomíase. No segundo capítulo, foi aplicado um rastreio computacional no desenho de uma proteína quimérica para o diagnóstico da neosporose. As análises dos testes sorológicos indicaram sensibilidade de 96,6% e especificidade de 97% na diferenciação dos soros. Na terceira parte, foi estabelecida uma metodologia para seleção de aptâmeros específicos para proteínas-alvo, através de uma metodologia de baixo custo, aplicada para prospecção de aptâmeros que detectem diretamente o patógeno. Um total de cinco sondas de oligonucleotídeos foram identificadas pelo método de Evolução Sistemática de Ligantes por Enriquecimento Exponencial (SELEX) aplicado a alvos proteicos. As evidências experimentais encontradas sugerem que as três metodologias são promissoras e permitem a triagem de novos testes para o diagnóstico de baixo custo, otimizados para uma detecção Point-of-care (POC). Palavras-chave: Phage-display. Aptâmero. Proteína quimérica. Triagem computacional

Grantor dc:publisher

Universidade Federal de Viçosa

Year dc:date.issued

2021

Author dc:creator

• Pereira, Higor Sette

Advisor dc:contributor.advisor

• Mendes, Tiago Antônio de Oliveira

Contributors dc:contributor

• Zhou, Jiehua

• Técnicas de visualização da superfície celular
• Técnica de seleção de aptâmeros
• Proteínas quiméricas
• Triagem genética - Simulação por computador

Statement dc:rights

• Acesso Aberto

Language dc:language.iso

por

Repository record dc:identifier.uri

https://locus.ufv.br//handle/123456789/28243

OAI identifier oai:identifier

oai:locus.ufv.br:123456789/28243