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Showing 1 to 20 of 38 for “"heterolog"”.
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Molekulargenetische und biochemische Untersuchungen zur Tryptophan-5-Halogenase aus der Biosynthese von Pyrroindomycin B in Streptomyces rugosporus
… werden. Das Tryptophan-5-Halogenase-Gen wurde heterolog exprimiert. In einem spezifischen Enzymtest konnte die Aktivität der Tryptophan-5-Halogenase gezeigt werden. Tryptophan wurde im Enzymtest durch dieses Enzym monobromiert und monochloriert. Das Protein konnte über …
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Charakterisierung und Kristallisation der Elektronen-einspeisenden Module der F<sub>420</sub>H<sub>2</sub>-Dehydrogenase
… FqoF, FpoF und FpoO in Escherichia coli heterolog überproduziert und aufgereinigt. Die gereinigten F Untereinheiten waren in der Lage reduziertes F420 unter Verwendung des Elektronen-akzeptorsystems Methylviologen und Metronidazol, zu oxidieren. Alle heterolog produzierten Untereinheiten …
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Gene der Chinaldin-Degradation in Arthrobacter ilicis Rü61a: Charakterisierung und funktionelle Expression der Chinaldin-4-Oxidase Strukturgene
… erfolgreich in Pseudomonas putida KT2440 pKP1 heterolog expremiert. Der Austausch eines in den molybdänhaltigen Hydroxylasen strikt konservierten Gluamatratrestes gegen einen Glutaminrest führte zum nahezu vollständigen Verlust von Qox-Aktivität, was die Hypothese unterstützt, dass dieser …
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Reinigung, Klonierung und heterologe Expression der Methyljasmonat-Esterase aus Lycopersicon esculentum
… Volllänge-Sonde mit Pseudogenen erfolgte. Die heterologe Expression der MeJA-Esterase cDNA wurde erfolgreich durchgeführt. Hierdurch wurde der Beweis erbracht werden, dass die klonierte cDNA tatsächlich für das Gen der MeJA-Esterase codierte. Nach Klonierung der cDNA in den …
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Heterologe Überexpression, Reinigung, biochemische Charakterisierung und Untersuchungen zur Struktur der A1 ATPase aus Methanosarcina mazei Gö1
… ahaE 3.Die auf pTL2 lokalisierten Gene wurden heterolog in E. coli DK8 exprimiert und die A1-ATPase funktionell synthetisiert.Die spezifische ATPase-Aktivität im zellfreien Extrakt von E. coli DK8 (pSÖ1)betrug 186 mU/mg Protein.Die Synthese der A1-ATPase-Untereinheiten AhaA,AhaB,AhaC und AhaF …
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Molekulare Mechanismen und Asymmetrie im Transport von Lactat
… Direktionalität untersucht. Hierzu wurde MCT1 heterolog in Saccharomyces cerevisiae exprimiert. Der ethanol-fermentative Modellorganismus eignete sich, um in einem 14C-Transportassay die kinetischen Parameter und die Gleichgewichtslage des MCT1-vermittelten Lactattransports (Keq =kin / kout) zu …
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Identifizierung und Charakterisierung von Proteasen der Photosynthesemembran
… Arabidopsis unter Zuhilfenahme eines gegen das heterolog exprimierte gereifte Genprodukt produzierten polyklonalen Antikörpers bewiesen, daß hhoA auch in vivo synthetisiert wird und wie im Importexperiment im Thylakoidlumen lokalisiert ist. Verschiedene Versuche zur Funktion des Proteins …
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Aktivierung des humanen Süßgeschmacksrezeptors im zellbasierten Testsystem
Zellbasierte heterologe Expressionssysteme bieten ein einfaches und schnelles Verfahren, um neue Süßstoffe oder Süßverstärker zu finden. Unter Verwendung eines solchen Testsystems, konnte ich in Zusammenarbeit mit der Symrise AG, Holzminden und dem Institut für Pflanzenbiochemie in Halle/Saale die …
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Herstellung rekombinanter Vaccinia-Viren als Träger des Oberflächenproteins MSP1 aus Plasmodium falciparum und ihre Charakterisierung in Hinsicht auf einen Malaria-Impfstoff
… Systemen zu klonieren und das Protein heterolog herzustellen. Im ersten Teil der Arbeit wurde die Synthese des msp1d-Gens (msp1 des MAD20-Prototyp) abgeschlossen und das Gen anschließend in E. coli kloniert und exprimiert. Der Hauptteil der Arbeit befasst sich mit der Entwicklung …
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On the chloride dependence of vesicular glutamate transport
… untersuchen wurde das VGLUT1-Protein der Ratte heterolog exprimiert und aufgereinigt und zusammen mit einer Protonenpumpe in Liposomen rekonstituiert. Dieser Versuchsaufbau ermöglichte, unabhängig vom zellulären Kontext, einen Glutamat/Chlorid Antiport nachzuweisen, eine bislang nur vermutete …
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Selenoprotein-Biosynthese in Archaea
… worden war, konnte im heterologen Wirt E. coli Selenocystein inserieren. b) Die Natur und die Lokalisation des archaeellen SECIS-Elements konnte durch die heterologe Expression eines Selenoprotein-Gens von M. jannaschii in M. maripaludis bewiesen werden. Die heterologe …
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Detektion und Überexpression von Genen FADH2- abhängiger Halogenasen aus Actinoplanes sp. ATCC 33002
… FADH2-abhängiger Halogenasen zu suchen und diese heterolog zu überexprimieren. Durch Hybridisierungsexperimente mit prnC[2] (Halogenasegen aus Pseudo¬monas fluorescens) als Sonde konnten in Actinoplanes sp. ATCC 33002 zwei potentielle Gene FADH2-abhängiger Halogenasen (halA und halB) detektiert …
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Untersuchung der Stressantwort von <i>Picrophilus torridus</i> mittels 2D-Gelelektrophorese und Charakterisierung ausgewählter Dehydrogenase
… Expressionssysteme kloniert, versucht heterolog zu expremieren, aufzureinigen und zu charakterisieren. Zum anderen wurden die pH-Stress- und Temperaturstressantwort in P. torridus mittels vergleichender 2D-Gelelektrophorese untersucht. Im Rahmen der heterologen Expression der …
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Die Kinetik des heteromeren 5-HT3-Rezeptors: Untersuchungen mit Patch-Clamp-Technik und Computersimulationen
… wird. Funktionelle Unterschiede zwischen heterolog exprimierten und nativen 5-HT3-Rezeptoren konnten lange nicht erklärt werden und man machte unbekannte zelluläre Faktoren dafür verantwortlich (van Hooft et al., 1997). Erst die Entdeckung der 5-HT3B-Rezeptoruntereinheit (Davies et al., …
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Biochemische Charakterisierung und physiologische Bedeutung eines neuen durch Typ I Interferon induzierten Gens
… biochemische Charakterisierung wurde das Protein heterolog in Bakterien exprimiert und als aufgereinigtes GST-Fusionsprotein einer Sprague Dawley Ratte zur Herstellung von monoklonalen Antikörpern injiziert. Nach Zellfusion und anschließendem Screening konnten 18 Hybridome identifiziert werden, …
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DAHP Synthasen aus Pilzen
… ist. Dieses E. coli Enzym kann stabil heterolog in Hefe exprimiert werden. Das Genprodukt kann einen Hefestamm retten, der bei Inhibierung der eigenen DAHP Synthasen durch Tyrosin und Phenylalanin die allgemeine Kontrolle der aromatischen Biosynthese nicht mehr einschalten kann (Dgcn4). …
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Metagenombasierte Isolierung und biochemische Charakterisierung neuartiger stereospezifischer Lipasen für biokatalytische Anwendungen
… aufwies. Beide Enzyme wurden in Escherichia coli heterolog exprimiert, gereinigt und mit Hinblick auf biokatalytische Anwendungen charakterisiert. EstCE wies ein Temperaturoptimum von 47°C und ein sehr hohes pH-Optimum von pH 10 verbunden mit hoher Stabilität bei alkalischen pH-Werten auf. Es …
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Aufklärung der Funktion von zwei rRNA-Methyltransferasen und Untersuchungen zur Eurekanat-Biosynthese in Streptomyces viridochromogenes Tü57
… Substrate für Methylierungsversuche mit beiden heterolog exprimierten rRNA-Methyl-transferasen. Durch Primer-Extension und MALDI-TOF-MS-Analytik konnten die genauen Zielstrukturen in der 23S rRNA für beide Enzyme identifiziert werden. AviRa ist eine N-Methyltransferase, die Position G2535 in …
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Erzeugung und Charakterisierung von Mausmodellen mit lichtsensitivem Geschmackssystem zur Aufklärung der neuronalen Geschmackskodierung
… wurden 16 der 35 Bitterrezeptoren der Maus heterolog in HEK293T-Zellen exprimiert und in Calcium-Imaging-Experimenten funktionell charakterisiert. Die Daten belegen, dass das Funktionsspektrum der Bitterrezeptoren der Maus im Vergleich zum Menschen enger ist und widerlegen damit die Aussage, …
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Metagenomanalysen von zwei Habitaten mit (hemi-)cellulolytischen mikrobiellen Gemeinschaften
… trugen. Zwei dieser ORFs wurden erfolgreich heterolog in E. coli BL21 exprimiert, und die davon kodierten Enzyme, eine Xylanase (Xyn1015) und eine Lichenase (Bga48), aufgereinigt. Es folgte eine biochemische Charakterisierung der Genprodukte. Xyn1015 zeigte eine maximale hydrolytische …
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