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Results
Showing 1 to 20 of 20 for “"Expressionsvektor"”.
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Directed evolution of novel properties starting from HisF of <i>Thermotoga maritima</i> as a structural scaffold
… thisF-Gen im Phagemid-Vektor pCANTAB 5E und im Expressionsvektor pKK223-3 konstruiert. Um neue Eigenschaften aus der thisF Bibliothek zu evolvieren, wurde ein dreistufiger Ansatz vorgenommen. Auf der ersten Stufe wurden tHisF-Varianten ausgewählt, die in der Lage waren eHisF-Aktivität im …
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Mutagenese des nuo-Operons von Escherichia coli
… hergestellt, die mittels PCR mutiert und in den Expressionsvektor rückkloniert werden sollten. Dies war aufgrund fehlender Zwischenvektoren nur für die Gene nuoA bis nuoE´ möglich. Die Mutationen auf den übrigen Genen wurden über die sogenannte l-Red vermittelte Rekombination in das …
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Etablierung eines Expressions- und Testsystems für Membranrezeptoren an Oozyten von Xenopus laevis
… bei denen ein eukaryontischer GnRH-Rezeptor-Expressionsvektor in den Kern mikroinjiziert wurde, nicht aber unbehandelte Oozyten oder andere Negativkontrollen. An glatten Gefäßmuskelzellen (RSMC) kann in vitro eine schnelle Erhöhung von [Ca2+]i auf Aldosteron (ALDO) und an Spermatozoen auf …
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Herstellung und Charakterisierung eines anti-HIV-Inhibitors basierend auf modifiziertem Serum Albumin
… und CCR5 exprimieren, wurden mit einem gp160-Expressionsvektor transfiziert und die gp120/gp41-induzierte Synzytienbildung beobachtet. Für die Transfektion wurden zwei Expressionsvektoren für ein X4-tropes und ein R5-tropes gp120 (NL4-3, NL-991) eingesetzt. In den beiden Experimenten zeigte …
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Tissue Engineering von Skelettmuskelgewebe : neue Ansätze zur Generierung von Skelettmuskelgewebe in vitro und in vivo
… wurde ein eukaryoter GFP-Expressionsvektor für Myogenin hergestellt, mit dem die Myoblasten durch verschiedene Methoden transient transfiziert wurden. Hier konnte durch GFP-Detektion und immunhistochemischen Nachweis in transfizierten Zellen eine erfolgreiche Transfektion …
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Vergleich von rekombinanten Vaccinia- und DNA-Vektoren zur Tumorimmuntherapie im C57BL/6-Mausmodell
… Mäusen verglichen. Die auf dem eukaryotischen Expressionsvektor pCI basierende DNA-Vakzinierung induzierte einen sehr wirksamen, antigenspezifischen und langfristigen Schutz vor Muzin, CEA oder beta-Galactosidase exprimierenden Tumoren. Eine MVA-Vakzinierung bietet in den in dieser Arbeit …
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Stabile Expression von Sulfotransferasen - allein oder in Kombination mit Cytochrom P450 - in Zelllinien für Mutagenitätsuntersuchungen
… SULT-cDNAs wurden in den Säugerzell Expressionsvektor pMPSV kloniert und in Standardindikatorzellen für Mutagenitätsuntersuchungen (V79 Zellen aus dem Chinesischen Hamster) transfiziert. Das Expressionsniveau von CYP1A2 und SULT wurde mittels Immunblotanalyse und radiometrischen …
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Pathologie und Pathogenität eines viralen Strukturproteins : Faltung und pathogene Effekte von mutierten TMV -Hüllproteinen in pflanzlichen und tierischen Zellen
… die cDNAs tr und ts Mutanten des TMV-HP in einem Expressionsvektor transient in Säugerzellen (Neuro2a und Cos7) transfiziert und die Zustandsformen der TMV-HPs und die Reaktion der Zelle darauf untersucht. Die Bedeutung der Prolinreste (P) im TMV-HP für seine Stabilität wurde durch den Austausch …
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Identifizierung immunodominanter antigener Strukturen von Methicillin-resistenten Staphylococcus aureus (MRSA) mit Hilfe einer Expressionsgenbank
… DNA gewonnenen Fragmente wurden in einen Expressionsvektor kloniert. Die so hergestellte Genbank des ausgewählten MRSA-Stammes A 134 umfasst ca. 10000 Klone. Ein vergleichendes Screening der Genbank erfolgte mit dem Serum eines Patienten mit einer MRSA-Sepsis und mit dem Serum einer …
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Bibliotheken von Stationärphasen-Promotoren in gramnegativen Bakterien : Erzeugung, Screening und verfahrenstechnische Analyse
… verglichen worden. Dazu wurde ein LacZ-GFP-Expressionsvektor konstruiert. Dadurch konnte gezeigt werden, dass das gentechnisch veränderte GFP im Gegensatz zum natürlichen GFP erfolgreich zur Charakterisierung von Promotoraktivitäten eingesetzt werden kann. Das Expressionsverhalten der beiden …
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Die außergewöhnliche Diversität der der Proteolipide in Archaea: Multimere und monomere Rotoren mit sechs bis dreizehn Ionenbindestellen in A1AO-ATPasen
… Archäons Methanosarcina mazei Gö1 wurde in den Expressionsvektor pVSBAD2 hinter den ara-Promotor kloniert. Das Konstrukt wurde pRT1 genannt. 12. Die auf pRT1 lokalisierten Gene wurden heterolog in E. coli DK8 exprimiert. Die A1AO-ATPase war in E. coli membran-assoziiert und funktionell. Die …
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Analyse Neurone-generierender Zellteilungen im Neuroepithel der Maus
… mit einem b-Galaktosidase- und einem GFP-Expressionsvektor, inhibierte spezifisch die b-Galaktosidase- nicht aber die GFP-Expression. In einem analogen Experiment in E10 TIS21-GFP-knock in Embryonen verhinderte die Elektroporation von esiRNA gerichtet gegen GFP die GFP-Expression zu Beginn …
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Untersuchungen zur Struktur und Wirkung von Pasteurella multocida Toxin
… könnten. <br>Das PMT-Gen wurde zunächst in den Expressionsvektor pGEX-2TGL kloniert und in E. coli exprimiert. Anschließend wurde das GST-Fusionsprotein über Glutathion-Sepharose-Beads gereinigt und durch Thrombin gespalten. Das rekombinant hergestellte Toxin war aktiv und führte in EBL-Zellen …
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Untersuchungen zur Apoptose
… zeigten Zellen nach Transfektion mit dem EGFP-Expressionsvektor alleine das für EGFP typische diffuse, zytosolische Fluoreszenzsignal. Sowohl im Fluoreszenz-Mikroskop als auch im konfokalen Laser-Scann-Mikroskop lokalisierte mDAP-3/EGFP zusammen mit einem mitochondrialen Farbstoff, jedoch nicht …
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Studien zur zellbiologischen Funktion des „Progressions-assoziierten Proteins“ (PAP) und dessen Bedeutung für die Invasivität von Mammakarzinomzellen
… konnte gezeigt werden, daß die in einen Expressionsvektor klonierte PAP-cDNS für ein Protein mit einer Größe von etwa 18 kDa kodierte. Auch mittels Immunfluoreszenzstudien transient transfizierter COS-7-Zellen konnte die Expression eines Epitop-markierten Proteins und die Lokalisierung an …
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Reinigung, Klonierung und heterologe Expression der Methyljasmonat-Esterase aus Lycopersicon esculentum
… codierte. Nach Klonierung der cDNA in den pQE70-Expressionsvektor und Transformation in kompetente E. coli (M15) konnte im Proteinrohextrakt eine spezifische Enzymaktivität von 1.64 pkat/mg detektiert werden. In einem 4-stufigen Reinigungsverfahren wurde das heterolog exprimierte Enzym mit einer …
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Generierung von chimären Mäusen mit Mutationen in der Signalleitungs-Domäne von CD22 und Untersuchungen zur Funktion von CD22 in Knockout-Mäusen
… vitro in einer Zelllinie wurde ein CD22-ITIM-KO-Expressionsvektor konstruiert, und Sialyltransferase/CD22-ITIM-KO Doppeltransfektanten der Plasmozytom-Zelllinie J558L gewonnen. CD22-ITIM-KO wurde nach BCR-Stimulation nicht tyrosinphosphoryliert, SHP-1 konnte entsprechend nicht mit CD22-ITIM-KO …
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18F-markierte S100-Proteine als potentielle Radioliganden für die funktionelle Charakterisierung des Rezeptors für advanced glycation endproducts (RAGE) in vitro und in vivo
… entsprechenden S100-Gene in den prokaryotischen Expressionsvektor pGEX-6P-1 kloniert. Mit diesen Konstrukten wurden E. coli-Zellen transformiert, aus denen nachfolgend die S100-Proteine isoliert und gereinigt werden konnten. Es konnte eine Reinigung unter nativen, milden Bedingungen etabliert …
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Engineering and use of plant viral expression vectors
Different plant virus-based expression systems were developed and compared using the colorectal cancer antibody CO17-1A and the corresponding antigen GA733-2 as model proteins. Tobacco mosaic virus (TMV) and alfalfa mosaic virus (AlMV) were used to construct the vector backbones of four systems to …
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Einfluss der MAP-Kinase ERK3 (p97) auf EBV-positive Burkitt-Lymphom-Zellen
In previous papers it was shown that Epstein-Barr Virus (EBV), a double stranded-DNA-Virus of the herpes virus family, is able to immortalize B-Cells. This assists the development of cancer as the Burkitt-Lymphoma.It was also shown, that stimulation of Epstein-Barr-Virus-genome-positive …