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Results
Showing 1 to 20 of 39 for “"Aufreinigung"”.
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Expression und Aufreinigung von intrazellulären Anteilen des Interleukin-4-Rezeptors als GST-Fusionsproteine und Messung von Protein-Protein-Wechselwirkungen
In dieser Doktorarbeit wurden zwei intrazelluläre Anteile des IL-4 Rezeptors als GST-Fusionsproteine exprimiert. GST-E1, in dem das cytoplasmatische membranproximale 1/3 von IL-4Ralpha (173 AS) einschließlich des Box 1 Motivs an GST fusioniert ist, konnte nach differenzierter De- und Renaturierung …
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Isolation and characterisation of synaptic vesicles from mouse brain
… Neurotransmittern. Mehrere Protokolle für die Aufreinigung der synaptischen Vesikel auf tierischem Gerhirn wurden etabliert. Einige Protokolle die zu sher sauber aufgereinigten Vesikeln fürhten hatten den Nachteil das die Ausbeute sehr gering war. Hier beschreibe Ich eine Verbesserte Methode …
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Untersuchung der lipidvermittelten Kristallisation der Ionenpumpen Bakteriorhodopsin und Halorhodopsin aus Halobacterium Salinarum
… gefunden, die im Rahmen dieser Arbeit durch Aufreinigung des Proteins und Kristallisation in kubischen Lipidphasen erhalten wurden (Kolbe et al., 2000). Damit wurde gezeigt, dass in den 3D-Kristallen von HR die gleiche Anordnung wie in der Zellmembran auftreten kann. Dies ließ auch auf eine …
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Expression und Isolierung des BMP-bindenden Proteins Ep45
… Dazu wurde Ep45 an MBP gekoppelt, so dass eine Aufreinigung mittels Chromatographie an einer Amylosesäule möglich werden sollte. Nach Spaltung durch Faktor Xa sollten die beiden Proteine durch Chromatographie voneinander getrennt werden, so dass schließlich Ep45 als reines aktives Protein …
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Identifizierung und Charakterisierung von Proteasen der Photosynthesemembran
… 1. Nachweis, Charakterisierung und Aufreinigung lichtstreßinduzierter Proteasen des Thylakoidlumens: Die zu diesem Ansatz durchgeführten Experimente konnten im Thylakoidlumen von Erbsenchloroplasten durch den Einsatz von Aktivitätstests auf substrathaltigen Polyacrylamidgelen …
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Analyse von Protein-Protein Interaktionen im Typ IV Sekretionssystem von Agrobacterium tumefaciens
… interagierendes Protein wurde entdeckt und nach Aufreinigung und N-terminaler Sequenzierung als „trans-Zeatin produzierendes Protein“ (Tzs) identifiziert. Die Untersuchung der enzymatischen Aktivität von Tzs ergab eine Umsetzung von 4-Hydroxy-3-methyl-2-(E)-butenyldiphosphat (HMBPP) mit AMP zu …
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Spurenelementuntersuchungen an bodengelagertem Skelettmaterial
… unter der Liegezeit wurden überprüft. Für diese Aufreinigungsmethoden wurden keine bzw. nur unzureichende Aufreinigungseffekte festgestellt. Insbesondere muß die allgemein akzeptierte chemische Aufreinigung als ineffizient bewertet werden.Die Evidenz diagenetischer Konzentrationserhöhungen für …
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Untersuchung der Stressantwort von <i>Picrophilus torridus</i> mittels 2D-Gelelektrophorese und Charakterisierung ausgewählter Dehydrogenase
… einem Maltose-Binde-Protein kloniert werden. Die Aufreinigung erfolgte über eine Amylose-Gravitationssäule mit einer anschließenden spezifischen Aktivitätsbestimmung von 1,92 U/mg bei 55°C und pH 5. Im Rahmen der quantitativen 2D-Gelelektrophorese wurden die pH- und Temperatur-spezifischen …
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Bifunktionale Fusionsproteine : Kombination hochselektiver, direkter FXa Inhibition mit aktivationsspezifischer GP IIb/IIIa Blockade einerseits, und zielgerichtetem Fibrin-Targeting andereseits
… Eine Optimierung der Proteinexpression und -aufreinigung war nur durch eine Vielzahl systematischer methodischer Untersuchungen möglich. <br> <br>Das Konstrukt scFv59d8-TAP reichert sich lokal am fibrinreichen venösen Thrombus an. Die Fibrinspezifität erlaubt eine hohe TAP Konzentration am …
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Klonierung, Expression und Charakterisierung von Mutanten des Bone Morphogenetic Protein-2
… Renaturierung und säulenchromatographischer Aufreinigung der Proteine konnte in dieser Arbeit in drei verschiedenen funktionellen in vitro-Tests eine abnehmende Wirkung der Mutanten gezeigt werden. Neben dem biophysikalischen Nachweis der apparenten Affinitäten der Mutanten zu Rezeptor und …
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Untersuchungen zur Biosynthese und Regulation von Oligosaccharid-Antibiotika
… Nach heterologer Expression in E. coli und Aufreinigung des Enzyms konnte gezeigt werden, dass AviX12 ein [3Fe-4S]-Cluster enthält. <br>Der zweite Teil der Arbeit beinhaltet die Klonierung eines Teils des Saccharomicin-Biosynthesegenclusters aus Saccharothrix espanaensis. Saccharomicin ist …
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Sequenzierung und molekulare Charakterisierung einer Lon-homologen Protease aus Bartonella henselae und heterologe Expression in Escherichia coli
… in E. coli überexprimiert. Durch Aufreinigung über Amylosesäulen, Spaltung des Fusionsproteins durch den Faktor Xa und anschließende Größenaufreinigung konnte die Lon-Protease unter nativen Bedingungen und in homogener Form isoliert werden. Die heterologe Expression der …
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Mutagenese des nuo-Operons von Escherichia coli
… gebunden. Für eine schnelle und effiziente Aufreinigung des Komplexes muß das Peptid an andere Untereinheiten fusioniert werden. Die Deletion der Gene nuoCD, nuoG, nuoM und der Gengruppe nuoE bis nuoF verhinderte jeweils die Assemblierung des Komplex I. Das Cytosol der DnuoCD Mutante …
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Charakterisierung der gamma-Untereinheiten AGG1 und AGG2 der heterotrimeren G-Proteine aus Arabidopsis thaliana
… einem TAP-tag fusioniert exprimieren. Bei der Aufreinigung der Fusionsproteine konnten die anderen Untereinheiten angereichert werden. Um die Funktion von AGG1 untersuchen zu können, wurde eine T DNA-Insertionslinie molekularbiologisch analysiert und Arabidopsis-RNAi-Linien hergestellt, in …
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Antikörper-Fusionsproteine zur Beeinflussung intrazellulärer Vorgänge
… E. coli und der affinitäts-chromatographischen Aufreinigung aus periplasmatischen Extrakten konnte die Identität der Fusionsproteine im Western Blot bestätigt werden. In einer ELISA-Bindungsstudie wurde die spezifische Bindung an den Transferrinrezeptor belegt. Mit Hilfe konfokalmikroskopischer …
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Immunogenität translozierter Effektorproteine bei Infektionen mit Bartonella henselae
… zu können, sollten die Seroprävalenzen nach Aufreinigung der acht Proteine erneut bestimmt werden. Dadurch könnten Kreuzreaktionen gegen E. coli verhindert werden, die die Auswertung in dieser Arbeit vereinzelt erschwerten. Anhand der erzielten Ergebnisse ergaben sich aber deutliche Hinweise …
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Die Interaktion der Transkriptionsfaktoren NF-ATc und GATA-3 in T-Helfer-Zellen
… die bakterielle Expression und nachfolgende Aufreinigung der GST-Fusionsproteine. Mit GST wurde jeweils eine N- und C-terminale Hälfte von NF-ATc und GATA-3 fusioniert. Mit diesen rekombinanten Proteinen wurden die „pulldown“-Experimente durchgeführt. Dabei konnte eine Interaktion des …
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Die Rolle der DGDG Synthase DGD1 bei der Galaktolipid Synthese in den Hüllmembranen von Chloroplasten
… Mit Pflanzenmaterial dieser Linien kann nun eine Aufreinigung des getaggten Proteins und eventueller Interaktionspartner erfolgen.
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CHLAMY 1, ein circadianes RNS-Bindeprotein aus Chlamydomonas reinhardtii
… aus den drei Untereinheiten C1 bis C3. Die Aufreinigung von CHLAMY 1 wurde in drei Schritten ausgeführt: (a) Herstellung eines Rohextraktes, (b) Durchführung einer 0,5-1 M AS-Fällung und (c) Ausführung einer spezifischen RNS-Affinitätschromatographie. Es konnten dadurch drei für CHLAMY 1 …
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Guanylatkinase: Von einem aktiven Enzym zu einem inaktiven Multidomänen-Protein.
… der MAGUK-Proteine SAP97 und hCASK zeigten nach Aufreinigung aus E. coli keine meßbare Guanylatkinase-Aktivität und konnten den rezessiv letalen Phänotyp eines GUK1-defizienten Hefestammes nicht komplementieren. Vieles deutet daraufhin, daß die GK-Domäne in MAGUK-Proteinen nur noch eine …
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